摘要:貂大腸桿菌病是由大腸埃希氏菌的某些致病血清型引起的一類疾病的總稱。主要臨床癥狀為發(fā)病急劇,死亡率高。無菌條件下采取病死仔貂的心臟、肝臟、脾臟、腎臟進(jìn)行病原菌的分離、鑒定、藥敏試驗(yàn)、生化試驗(yàn)和動(dòng)物回歸試驗(yàn)等。結(jié)果表明引起該貂場仔貂發(fā)病的病原為致病性大腸桿菌,并且該菌對(duì)小白鼠有較強(qiáng)的致病力。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果可得出,大腸桿菌對(duì)仔貂危害嚴(yán)重,而且易產(chǎn)生耐藥性,平時(shí)應(yīng)合理的預(yù)防和治療。
關(guān)鍵詞:仔貂大腸桿菌分離鑒定
中圖分類號(hào):S85文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1672-3791(2011)02(b)-0249-01
大腸桿菌作為人和動(dòng)物腸道內(nèi)正常菌群成員之一,人和動(dòng)物出生后數(shù)小時(shí)即可經(jīng)口進(jìn)入消化道后段,大量繁殖而定居,終生伴隨,并經(jīng)糞便不斷散播于周圍環(huán)境。故大腸桿菌在環(huán)境衛(wèi)生和食品衛(wèi)生學(xué)上,常被用作糞便直接或間接污染的檢測指標(biāo)。本菌還是分子生物學(xué)和基因工程中重要的實(shí)驗(yàn)材料和研究對(duì)象[1]。
隨著大型集約化養(yǎng)畜(禽)業(yè)的發(fā)展,致病性大腸桿菌對(duì)畜牧業(yè)所造成的損失已日益明顯。其發(fā)病率和死亡率因各地區(qū)的飼養(yǎng)條件和衛(wèi)生防治措施等不同而有很大差異。大型集約化養(yǎng)畜(禽)場密度過大、通風(fēng)換氣不良、飼養(yǎng)管理及環(huán)境消毒不徹底,是加速本病流行不容忽視的因素。除此之外,近十幾年來在畜牧養(yǎng)殖中,為了控制大腸桿菌及某些細(xì)菌感染,在飼料添加劑及治療中盲目的使用一些抗菌藥物,常導(dǎo)致大腸桿菌菌株產(chǎn)生耐藥性。本文擬研究主要是對(duì)貂的大腸桿菌進(jìn)行診斷與治療。通過流行病學(xué)調(diào)查、臨床檢查和剖檢變化初步診斷為大腸桿菌;通過室驗(yàn)室檢查、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、等進(jìn)一步確診為大腸桿菌。其目的是為了控制和防治大腸桿菌病,以降低養(yǎng)殖業(yè)中因大腸桿菌而造成的經(jīng)濟(jì)損失。
1材料與方法
1.1 材料
(1)病料。石家莊市正定某狐貂養(yǎng)殖場死亡的和即將死亡的仔貂,無菌采取其心、肝、脾、腎。
(2)培養(yǎng)基。普通營養(yǎng)肉湯(批號(hào)2006115)、普通營養(yǎng)瓊脂(批號(hào)2005125)、麥康凱瓊脂(批號(hào)2006049)、伊紅美藍(lán)瓊脂(批號(hào)2005403)、SS瓊脂(批號(hào)20060212)。以上培養(yǎng)基均由由杭州天和微生物試劑有限公司生產(chǎn),由河北省預(yù)防獸醫(yī)學(xué)重點(diǎn)試驗(yàn)室提供。
(3)試劑。染色試劑革蘭氏染色液由臨床實(shí)驗(yàn)室提供。
(4)儀器設(shè)備。顯微鏡、恒溫培養(yǎng)箱、超凈工作臺(tái)、高壓滅菌鍋等均由河北省預(yù)防獸醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供。
(5)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。由北戴河試驗(yàn)動(dòng)物養(yǎng)殖場購買的20日齡的健康小白鼠10只。
1.2 方法
(1)流行病學(xué)調(diào)查。主要通過問診了解發(fā)病的情況,通過實(shí)地調(diào)查了解飼養(yǎng)管理情況、飼料、溫度、濕度等環(huán)境因素。
(2)臨床癥狀及剖檢癥狀。主要通過主訴及現(xiàn)場觀察和簡易檢查;通過剖檢觀察內(nèi)臟器官的變化。
(3)實(shí)驗(yàn)室檢查。
①微生物形態(tài)學(xué)觀察。無菌采取心、肝、脾等病料進(jìn)行觸片,革蘭氏染色后鏡檢。
②分離培養(yǎng)。將采集的病料分別接種于麥康凱瓊脂平板、營養(yǎng)瓊脂平板、伊紅美藍(lán)瓊脂平板、SS瓊脂平板上,于37℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)24h,觀察并記錄菌落的特征。后挑取單個(gè)可疑菌落接種于營養(yǎng)肉湯中,于37℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24h后觀察變化情況;并從麥康凱瓊脂平板上挑取可疑單個(gè)菌落接種于普通營養(yǎng)瓊脂斜面,于37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24h,保存菌種用于下一步的生化試驗(yàn);除此之外,挑取單個(gè)可疑菌落涂片、革蘭氏染色后鏡檢觀察。
2結(jié)果與分析
2.1 臨床癥狀及剖檢變化
(1)臨床癥狀。以斷乳后的仔貂發(fā)生最多,成年貂很少發(fā)生,散發(fā)性流行。潛伏期2~5d。初期糞便稀軟,呈黃色周狀,隨后下痢加劇,糞便呈灰白色,帶有粘液和泡沫。體溫升高達(dá)40℃~41℃。有時(shí)伴有嘔吐。糞便中有條狀血液和未消化飼料。嚴(yán)重的發(fā)生水瀉,肛門失禁,呼吸、心跳加快。病貂迅速消瘦、弓腰、眼下陷、乏力,臨死前體溫下降。
2.2 剖檢變化
剖檢可見胃腸有卡他性或出血性炎癥變化,腸系膜淋巴結(jié)腫大、充血、出血,脾臟腫大,腎柔軟,心肌變性。
2.3 分離培養(yǎng)
在營養(yǎng)瓊脂平板上37℃培養(yǎng)24h后,形成圓形凸起、光滑、濕潤、半透明、灰白色菌落,直徑在2mm~3mm;在麥康凱瓊脂平板上,形成中等大小、表面光滑濕潤的紅色菌落;在伊紅美藍(lán)瓊脂平板上產(chǎn)生黑色金屬閃光的菌落;在SS瓊脂平板上生長較差;在營養(yǎng)肉湯中培養(yǎng)24h后,呈均勻混濁、管底有粘性沉淀,液面管壁有菌環(huán)。
2.4 試驗(yàn)組結(jié)果
試驗(yàn)組(第一組)小鼠4只24h內(nèi)死亡,1只36h內(nèi)死亡。剖檢可見肝臟腫大、有出血點(diǎn)和壞死點(diǎn)、腸嚴(yán)重鼓氣、心包淤血、肺出血、脾臟淤血。無菌采取試驗(yàn)組小鼠的心、血、肝和脾接種在普通瓊脂平板及普通營養(yǎng)肉湯中,于37℃培養(yǎng)24h,有細(xì)菌生長。革蘭氏染色及生化鑒定表明此菌與接種細(xì)菌為同種細(xì)菌,表明該菌對(duì)小鼠具有較強(qiáng)的致病力。
2.5 治療
分別選用頭孢哌酮和磺胺甲噁唑兩種藥物,其中頭孢哌酮按每公斤體重0.04g~0.08g,肌肉注射;磺胺甲噁唑按每公斤體重0.05g~0.06g,口服給藥,每天早晚各一次,連用三天。經(jīng)過治療收到了良好的效果,除了并重的仔貂沒有恢復(fù),其它均基本康復(fù)。
3小結(jié)與討論
3.1 診斷結(jié)果
通過實(shí)驗(yàn)室檢查,該菌在普通培養(yǎng)基上生長良好,形成圓形凸起、光滑、濕潤、半透明、灰白色菌落;在麥康凱瓊脂上形成紅色菌落;在伊紅美藍(lán)瓊脂上產(chǎn)生黑色帶金屬閃光的菌落;在SS瓊脂上生長較差;本菌能夠迅速發(fā)酵乳糖、葡萄糖、麥芽糖、甘露醇,不產(chǎn)生硫化氫,吲哚試驗(yàn)和甲基紅試驗(yàn)均為陽性,V-P試驗(yàn)為陰性,以上試驗(yàn)可以確診為該病原為大腸桿菌。
3.2 防制
大腸桿菌是條件致病菌,所以防制該病的關(guān)鍵在于加強(qiáng)對(duì)貂群的飼養(yǎng)管理,特別是產(chǎn)仔及育成期更應(yīng)注意。仔貂要盡快吃到初乳,母貂產(chǎn)仔過多時(shí)要及時(shí)代養(yǎng),在正常情況下,日糧中可不加抗生素添加劑,在幼貂斷奶后開始補(bǔ)給,每3天補(bǔ)1次,能收到良好的效果。
參考文獻(xiàn)
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