8種生物殺菌劑對南瓜疫病菌的室內毒力測定

摘要：采用菌絲生長速率法和孢子萌發法進行了8種生物殺菌劑對南瓜疫病菌(Phytophthoracapsicl)的毒力測定。結果表明，供試8種生物殺菌劑對南瓜疫病菌菌絲生長和孢子萌發均具有一定的抑制效果，其中1％申嗪霉素懸乳劑對南瓜疫病菌菌絲生長的抑制作用最強，2％寧南霉素次之，5％井岡霉素水劑最弱。

關鍵詞：生物殺菌劑；南瓜疫病菌；毒力測定

南瓜疫病是南瓜生產上的毀滅性病害，在我國普遍發生，通常發病率在30％以上，嚴重地塊造成絕產。南瓜疫病菌以卵孢子在土壤中越冬，游動孢子侵入寄主，病菌可通過土壤傳播。選育和合理使用抗病品種是控制南瓜疫病危害最有效的方法。但由于南瓜疫病傳播和侵染的特點，以及目前尚無理想的抗病品種，藥劑防治仍是主要的防治手段。但化學防治具有污染環境等缺點，因而利用生物殺菌劑是生產綠色蔬菜的主要措施。筆者通過室內毒力測定方法測定了8種生物殺菌劑對南瓜疫病菌的毒力，擬為南瓜疫病防治提供理想的殺菌劑。

1 材料與方法

1.1供試材料

供試菌種：南瓜疫病菌由本研究室從南瓜疫病植株上分離保存。供試藥劑：3％中生菌素可濕性粉劑，由福建凱立生物制品有限公司生產：5％井岡霉素水劑，由武漢科諾生物科技股份有限公司生產：2％春雷霉素水劑，由河北博嘉農業有限公司生產：3％多抗霉素可濕性粉劑，由陜西綠盾生物制品有限公司生產：4％農抗120水劑，由武漢科諾生物科技股份有限公司生產：2％寧南霉素水劑，由黑龍江強爾生物技術開發有限公司生產：1％申嗪霉素懸浮劑，由上海農樂生物制品股份有限公司生產：2％武夷菌素水劑，由山東濰坊萬勝生物農藥有限公司生產：對照化學藥劑25％甲霜靈可濕性粉劑，由江蘇省南通染化廠生產。

1.2方法

1.2.1幾種生物殺菌劑對南瓜疫病菌菌絲生長的影響將供試菌株接種于胡蘿卜瓊脂培養基(CA.配方為胡蘿卜200g，葡萄糖20g，瓊脂20g，定容至1000mL)上，25℃恒溫箱培養5d，待菌絲布滿培養皿后用無菌打孔器在菌落邊緣打取直徑5mm菌餅備用。將供試藥劑按照稀釋500、800、1000倍稱量試驗所需用量，待小三角瓶中培養基溫度降到50℃時分別加入供試藥劑并充分搖勻后倒平板，以無菌水為對照，每個處理倒3個培養皿。待皿內培養基凝固后，每皿加入菌餅1枚，置于25℃恒溫箱內培養5d后，采用十字法測量菌落直徑，3次重復。根據菌絲生長抑制率分析法計算毒力回歸曲線，并求出EC₅₀值。

菌絲生長抑制率(％)=(對照菌落直徑一處理菌落直徑)，

對照菌落直徑×100

1.2.2幾種生物殺菌劑對南瓜疫病菌孢子囊萌發的影響將供試菌株接種于CA平板上，25℃下培養5d，然后用直徑5mm無菌打孔器在菌落邊緣打孔制得菌餅，將菌餅放入含有10mL無菌水的無菌培養皿內，25℃保濕培養36h，即產生孢子囊。毒力測定時將供試藥劑按照稀釋500、800及1000倍分別加入孢子囊懸浮液中，以無菌水為對照，混合后置于25℃恒溫箱中培養48h。觀察孢子囊萌發情況，每個處理觀察記錄200-300個孢子囊。以游動孢子全部從孢子囊中游出被記錄為萌發。3次重復。然后根據孢子萌發抑制率分析法計算毒力回歸曲線，并求出ECho值。

孢子萌發抑制率(％)：(對照萌發孢子數-處理萌發孢子

2 結果與分析

2.1幾種生物殺菌劑對南瓜疫病菌菌絲生長的影響

試驗結果(表1)表明，供試8種生物殺菌劑對南瓜疫病菌菌絲生長均具有一定的抑制效果，8種生物殺菌劑的有效成分ECso值的大小順序依次為：5％井岡霉素水劑>3％中生菌素可濕性粉劑>2％春雷霉素水劑>2％武夷菌素水劑>3％多抗霉素可濕性粉劑>4％農抗120水劑>2％寧南霉素水劑>1％申嗪霉素懸乳劑。其中5％井岡霉素水劑最大，為160.9758mg，L^-1：1％申嗪霉索懸乳劑最小，為3.8225mg，L^-1。不同濃度各藥劑對菌絲生長的抑制作用相關性均達到極顯著水平，綜合各殺菌劑的EC₅₀值，1％申嗪霉素懸乳劑對南瓜疫病菌菌絲生長的抑制作用最強，2％寧南霉素水劑次之，5％井岡霉素水劑最弱。

2.2幾種生物殺菌劑對南瓜疫病菌孢子囊萌發的影響

試驗結果(表2)表明，供試殺菌劑對南瓜疫病菌孢子囊萌發的抑制效果明顯，8種殺菌劑的有效成分ECso值大小順序為：5％井岡霉素水劑>3％中生菌素可濕性粉劑>2％春雷霉素水劑>4％農抗120水劑>2％武夷菌素水劑>3％多抗霉素可濕性粉劑>2％寧南霉素水劑>1％申嗪霉素懸乳劑。其中5％井岡霉素水劑最大，為342.0267mg，L^-1：1％申嗪霉素懸乳劑最小，為8.6230mg，L^-1。不同濃度各藥劑對孢子囊萌發的抑制作用相關性均達到極顯著水平，綜合各殺菌劑的EC₅₀值，1％申嗪霉素懸乳劑對南瓜疫病菌孢子囊萌發的抑制作用最強，2％寧南霉素水劑次之，5％井岡霉素水劑最弱。

3 討論與結論

南瓜疫病是南瓜生產中的主要病害，生產中尚缺乏抗病品種，藥劑防治是防治該病的主要措施。使用生物農藥不會產生農藥殘留，而且環保無公害，可以替代一部分化學農藥，能夠放心生產無公害食品和綠色蔬菜，可以在蔬菜生產中推廣應用。為了延緩化學農藥產生抗性，可采用生物農藥和化學農藥混配，提高防治效果。韓新才等分別利用農抗120和百菌清對9種植物病原真菌進行毒力測定，認為農抗120抑菌率好于百菌清，原因可能是植物病原菌已對百菌清產生一定的抗藥性。韓新才等分別利用農抗120和多菌靈對棉花枯萎病菌進行毒力測定，認為農抗120對植物病原菌的作用機理是抑制孢子萌發、導致菌絲畸形和原生質凝聚，具有保護和治療作用。劉振海等認為寧南霉素對水稻立枯病的防治效果好于多菌靈和甲霜靈。在南瓜疫病的防治過程中，由于大量使用甲霜靈等藥劑既污染環境同時也出現了抗藥性等問題，因此，可以將篩選出的高效生物防治藥劑與化學藥劑混配，提高防治效果，為南瓜疫病的防治提供一條新的途徑。

8種生物殺菌劑對南瓜疫病菌進行毒力測定的結果表明，8種生物殺菌劑對南瓜疫病菌菌絲生長均有抑制作用，且隨濃度增加抑制作用加大。其中1％申嗪霉素懸乳劑對南瓜疫病菌抑制效果最好，其次為2％寧南霉素水劑及4％農抗120水劑。8種生物殺菌劑對南瓜疫病菌孢子囊萌發都有一定的抑制作用，其中抑制作用最大的是1％申嗪霉素懸乳劑，其次為2％寧南霉素水劑和3％多抗霉素可濕性粉劑，最高抑制率分別為63.2％、51.2％和50.2％。