牛蒡根水提物對(duì)高尿酸血癥小鼠的保護(hù)作用研究

王龍?jiān)矗醭快o，袁田道，王美芝，白紅斌，袁新道，王春波，韓志武#（.青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，青島市 6606；.山東青島市昊田食品有限公司，青島市 66；.青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院，青島市 6607）

高尿酸血癥是指細(xì)胞外液的尿酸鹽呈飽和狀態(tài)，一般認(rèn)為血尿酸鹽濃度≥417 μmol·L-1時(shí)，應(yīng)考慮為高尿酸血癥[1]。引起高尿酸血癥的原因主要是嘌呤代謝紊亂和（或）尿酸排泄減少。高尿酸血癥可導(dǎo)致多種疾病的發(fā)生，如痛風(fēng)、尿酸性腎病、腎功能不全等[2]，且與脂代謝紊亂、糖尿病、心腦血管疾病密切相關(guān)[3，4]。目前，治療高尿酸血癥的藥物主要有黃嘌呤氧化酶抑制劑、促進(jìn)尿酸排泄藥物等，其中以別嘌醇最為常用。別嘌醇在常規(guī)劑量（300 mg·d-1）下能夠引起較嚴(yán)重的不良反應(yīng)，如藥物超敏綜合征、藥源性肝損傷等[5，6]。因此，近年來，國(guó)內(nèi)、外學(xué)者不斷從天然植物中尋找新型的安全可靠的抗高尿酸血癥藥物，并通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，金錢草、雞矢藤等多種天然植物的提取物能夠降低高尿酸血癥小鼠的血清尿酸水平[7，8]。

牛蒡（Arctium lappa L.），菊科草本植物，其根、葉、果實(shí)均可入藥。牛蒡根是牛蒡的肉質(zhì)直根，具有極高的食用和藥用價(jià)值。本研究以ip次黃嘌呤復(fù)制小鼠高尿酸血癥模型，以其血尿酸水平為指標(biāo)，探討牛蒡根水提物對(duì)高尿酸血癥模型小鼠血尿酸水平的影響。

1 儀器與材料

1.1 儀器

7180 ISE型全自動(dòng)生化分析儀（日本日立高科株式會(huì)社）。

1.2 試藥

牛蒡根飲片由青島昊田食品有限公司提供，由筆者鑒定為真品；次黃嘌呤（美國(guó)Sigma公司，批號(hào)：036k0725）；別嘌醇片（廣東彼迪藥業(yè)有限公司，批號(hào)：20070602）；其余試劑均為分析純。

1.3 動(dòng)物

SPF級(jí)昆明種小鼠90只，♂，體重（20±2）g，由山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司動(dòng)物中心提供（動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（魯）20080002）。

2 方法

2.1 牛蒡根水提物的制備

取牛蒡根600 g用80%乙醇4 000 mL提取2次后所得藥渣，加水約9 000 mL，加熱煮沸并保持微沸2 h，傾出水提液；藥渣再加水約9 000 mL，加熱煮沸提取2 h，傾出水提液。合并2次水提液，濾過，濃縮成稠膏，加入適量糊精，70℃減壓干燥，粉碎成細(xì)粉，所得牛蒡根水提物相當(dāng)于7.5 g·g-1（生藥）/干膏。臨用時(shí)用蒸餾水配制。

2.2 模型的復(fù)制

參照文獻(xiàn)[9]，給小鼠ip次黃嘌呤 1 000 mg·kg-1，使小鼠尿酸大量生成，以復(fù)制小鼠高尿酸血癥模型。

2.3 牛蒡根水提物對(duì)高尿酸血癥模型小鼠血尿酸水平的影響

取小鼠60只，隨機(jī)分為6組，即空白對(duì)照（等體積蒸餾水）、模型（等體積蒸餾水）、別嘌醇（40 mg·kg-1）和牛蒡根水提物高、中、低劑量（6.67、3.33、1.67 g·kg-1）組。ig給藥，每天1次，連續(xù)10 d。在末次給藥后1 h，除空白對(duì)照組外，其余各組分別ip次黃嘌呤1 000 mg·kg-1，ip后1 h眼眶采血，測(cè)血尿酸水平。

2.4 牛蒡根水提物對(duì)正常小鼠血尿酸水平的影響

取小鼠30只，隨機(jī)分為3組，即空白對(duì)照（等體積蒸餾水）、別嘌醇（40 mg·kg-1）和牛蒡根水提物（6.67 g·kg-1）組。ig給藥，每天1次，連續(xù)10 d，于末次給藥后2 h眼眶采血，測(cè)血尿酸水平。

2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS 13.0軟件處理，采用單因素方差分析，結(jié)果以±s 表示。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 牛蒡根水提物對(duì)高尿酸血癥模型小鼠血尿酸水平的影響

與空白對(duì)照組比較，模型組小鼠血尿酸水平顯著升高（P＜0.01），提示復(fù)制模型成功。與模型組比較，牛蒡根水提物高劑量組和別嘌醇組血尿酸水平顯著降低（P＜0.01或P＜0.05）；牛蒡根水提物中、低劑量組血尿酸水平有降低趨勢(shì)，提示牛蒡根水提物對(duì)高尿酸血癥小鼠的血尿酸水平影響可能具有劑量依賴性。牛蒡根水提物對(duì)高尿酸血癥模型小鼠血尿酸水平的影響見表1。

表1 牛蒡根水提物對(duì)高尿酸血癥模型小鼠血尿酸水平的影響（±s，n＝10）Tab 1 Effect of the aqueous extract of A.lappa root on the serum uric acid level of hyperuricemic mic（e±s，n＝10）

表1 牛蒡根水提物對(duì)高尿酸血癥模型小鼠血尿酸水平的影響（±s，n＝10）Tab 1 Effect of the aqueous extract of A.lappa root on the serum uric acid level of hyperuricemic mic（e±s，n＝10）

與空白對(duì)照組比較：＊P＜0.01；與模型組比較：#P＜0.05，##P＜0.01vs.blank control group：＊P＜0.01；vs.model group：#P＜0.05，##P＜0.01

組別空白對(duì)照組模型組牛蒡根水提取物低劑量組牛蒡根水提取物中劑量組牛蒡根水提取物高劑量組別嘌醇組血尿酸水平/μmol·L-1 120.15±70.33 297.50±100.06＊289.24±120.25 268.07±60.10 179.64±89.62#123.65±100.77##劑量/g·kg-1--1.67 3.33 6.67 0.04

3.2 牛蒡根水提物對(duì)正常小鼠血尿酸水平的影響

與空白對(duì)照組比較，別嘌醇與牛蒡根水提物組小鼠血尿酸水平均有降低趨勢(shì)，但二者比較無顯著差異；牛蒡根水提取物組小鼠血尿酸降低水平低于別嘌醇組。牛蒡根水提物對(duì)正常小鼠血清尿酸水平的影響見表2。

4 討論

近年來，隨著人們生活水平的提高、飲食結(jié)構(gòu)的改變，痛風(fēng)的發(fā)病率越來越高；大量臨床資料顯示，高尿酸血癥往往與高血脂、高血糖、高血壓、肥胖等疾病的發(fā)生密切相關(guān)[10]。牛蒡根作為藥食兩用植物，其降血脂、降血糖、抗氧化等作用已被廣泛認(rèn)識(shí)。因此，牛蒡根水提物對(duì)伴有高血脂、高血糖等代謝綜合征的高尿酸血癥的作用優(yōu)于其他天然藥物。

表2 牛蒡根水提物對(duì)正常小鼠血清尿酸水平的影響（±s，n＝10）Tab 2 Effect of the aqueous extract of A.lappa root on the serum uric acid level of normal mic（e±s，n＝10）

表2 牛蒡根水提物對(duì)正常小鼠血清尿酸水平的影響（±s，n＝10）Tab 2 Effect of the aqueous extract of A.lappa root on the serum uric acid level of normal mic（e±s，n＝10）

組別空白對(duì)照組別嘌醇組牛蒡根水提取物組劑量/g·kg-1-0.04 6.67血尿酸水平/μmol·L-1 123.15±69.33 97.65±61.68 106.52±63.12

本研究發(fā)現(xiàn)，高劑量牛蒡根水提物能夠顯著降低次黃嘌呤所致高尿酸血癥小鼠的血尿酸水平，而對(duì)正常小鼠的血尿酸水平影響較小；中、低劑量牛蒡根水提物雖然未顯著降低高尿酸血癥模型小鼠的血尿酸水平，但是隨著劑量的增加，模型小鼠的血尿酸水平降低幅度也逐漸增加，因此推斷其具有劑量依賴性。本研究中牛蒡根水提物高、中、低劑量的選取是隨機(jī)的，這主要是由于未查閱到相關(guān)的實(shí)驗(yàn)報(bào)道以及其作用機(jī)制尚未知曉的緣故。但是，在此劑量下，小鼠的一切活動(dòng)均正常，未發(fā)現(xiàn)異常現(xiàn)象，因此可以初步判定此劑量對(duì)小鼠來說具有一定的安全性。其次，由于實(shí)驗(yàn)的局限性，能夠顯著降低模型小鼠血尿酸水平的牛蒡根水提物的最低劑量尚未發(fā)現(xiàn)。隨著對(duì)牛蒡根研究的深入，筆者將優(yōu)化實(shí)驗(yàn)過程，進(jìn)一步探討牛蒡根水提物降低血尿酸水平的最低起效劑量、作用機(jī)制及其有效成分等。

[1] 陳光亮，徐叔云.高尿酸血癥研究進(jìn)展[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2003，19（10）：1 088．

[2] Johnson RJ，Kang DH，F(xiàn)eig D，et al.Is there a pathogenic role for uric acid in hypertension and cardiovascular and renal disease[J].Hypertension，2003，41（6）：1 183．

[3] Iseki K，Ikemiya Y，Inoue T，et al.Significance of hyperuricemia as a risk factor for developing ESRD in a screened cohort[J].Am J Kidney Dis，2004，44（4）：642.

[4] Sundstrom J，Sullivan L，DA gostino RB，et al.Relations of serum uric acid to longitudinal blood pressure tracking and hypertension incidence[J].Hypertension，2005，45（1）：28.

[5] 付 濤，溫 海，黃 欣，等.別嘌醇致藥物超敏綜合征23例臨床分析[J].中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志，2006，20（10）：602.

[6] 李澤華，勞海燕，萬 波.別嘌醇不良反應(yīng)文獻(xiàn)及臨床案例分析[J].中國(guó)藥房，2009，20（29）：2 301.

[7] 王海東，葛 飛，郭玉松，等.金錢草提取物對(duì)高尿酸血癥小鼠的影響[J].中國(guó)中藥雜志，2002，27（12）：939.

[8] 顏海燕，馬 穎，劉 梅，等.雞矢藤提取物對(duì)酵母膏致小鼠高尿酸血癥的影響[J].中藥藥理與臨床，2007，23（5）：115。

[9] 唐 燦，楊 奎.高尿酸血癥動(dòng)物模型初探[J].中藥新藥與臨床藥理，2000，11（5）：292.

[10] 王超英，何金紅.高尿酸血癥與高血壓、肥胖、高血脂、糖尿病的關(guān)系分析[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2010，26（5）：819.