醒腦靜不同口服固體制劑的溶出度對比研究Δ

杜守穎，陳雯，徐冰，張倩怡

（1.北京中醫藥大學中藥學院，北京市 100102；2.中國中醫科學院廣安門醫院，北京市 100053）

醒腦靜不同口服固體制劑的溶出度對比研究Δ

杜守穎1＊，陳雯2，徐冰1，張倩怡1

（1.北京中醫藥大學中藥學院，北京市 100102；2.中國中醫科學院廣安門醫院，北京市 100053）

目的：對醒腦靜不同口服固體制劑進行溶出度考察，對比其有效成分的體外溶出特點，為優選醒腦靜口服劑型提供依據。方法：采用小杯法，轉速100r·min-1，以蒸餾水為溶出介質。采用高效液相色譜法測定不同口服固體制劑中有效成分梔子苷和龍腦的溶出度，計算累積溶出度，用相似因子進行釋放曲線的相似性比較，對溶出曲線進行多種數學模型擬合。結果：不同口服固體制劑中，除水溶性包衣片和膠囊中梔子苷溶出曲線有一定相似性外，各制劑中梔子苷溶出曲線、龍腦溶出曲線均有較大差異，各劑型有效成分溶出曲線基本符合一級動力學方程。結論：醒腦靜不同口服固體制劑中有效成分溶出度15min之內均可達到90%以上；梔子苷在膠囊中溶出最快，龍腦在水溶性包衣片中溶出最快。

醒腦靜；口服固體制劑；梔子苷；龍腦；溶出度；相似因子；高效液相色譜法

醒腦靜注射液由麝香、冰片、梔子、郁金提取精制而成，具有醒神開竅、清熱解毒、涼血止痙的作用，常用于腦中風急救期，作用迅速、明確[1]。但中藥注射劑存在使用不便、醫療費用高、不適合長期給藥等問題。另外，醒腦靜注射液主要提取了方中藥物的揮發性成分，而忽視了對治療腦中風同樣有效的非揮發性成分，藥效沒有得到充分發揮。基于中醫傳統理論，本課題組進行處方分析后確定有效成分，對其進行了系統的工藝研究，既提取了揮發性成分，又保存非揮發性成分，考察了將醒腦靜處方制成口服制劑的可行性，與其注射劑形成互補，為醒腦靜復方的系列化用藥打下基礎。

與注射劑不同，口服制劑中有效成分體外溶出的速度和程度直接影響其在體內的吸收和利用，是評價口服固體藥物內在質量的一個重要指標[2，3]。本研究以梔子苷和龍腦為指標，對醒腦靜不同口服固體制劑進行溶出度考察，為優選醒腦靜口服劑型提供依據。

1 儀器與試藥

Agilent 1100高效液相色譜儀、Agilent化學工作站、Agilent 6890N型氣相色譜儀、Agilent化學工作站（美國惠普公司）；RC-8DS溶出度測試儀（天津市光學儀器廠）；AE240型電子分析天平（日本島津公司）。

龍腦、梔子苷對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號分別為110881-200706、110749-200613）；醒腦靜片、滴丸、膠囊均由北京中醫藥大學制藥系自制；水為純凈水，十八烷、乙腈為色譜純，其余試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 梔子苷的含量測定

2.1.1 色譜條件[4]色譜柱：DiamonsilTMC18（250mm×4.6mm，5μm）；流動相：乙腈-水（14∶86）；檢測波長：238nm；流速：1.0mL·min-1；柱溫：室溫。色譜見圖1。

2.1.2 線性關系考察 以甲醇配制濃度為0.114mg·mL-1的梔子苷對照品溶液。精密吸取對照品溶液2、4、6、8、10μL，分別注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定峰面積。以峰面積積分值（Y）為縱坐標，梔子苷的進樣量（X，μg）為橫坐標，制備標準曲線，得回歸方程為Y＝1631X+3.995（r＝0.9999）。結果表明，梔子苷進樣量在0.228～1.14μg范圍內與峰面積積分值呈良好線性關系。

圖1 高效液相色譜圖A.梔子苷對照品；B.樣品Fig1 HPLC chromatogramsA.geniposide control；B.sample

2.1.3 溶出樣品處理方法 取溶出水液，過0.45μm微孔濾膜，精密吸取濾液10μL，進樣測定。

2.2 龍腦的含量測定

2.2.1 色譜條件 色譜柱：db-wax型氣相毛細管（30m×530μm，1.00μm）；檢測器：FID；載氣：高純氮氣；載氣流速：6mL·min-1；分流比：10∶1；檢測器溫度：190℃；柱溫：130℃。氣相色譜見圖2。

圖2 氣相色譜圖A.龍腦對照品；B.樣品；1.龍腦；2.十八烷Fig2 GC chromatogramsA.borneol control；B.sample；1.borneol；2.octadecane

2.2.2 線性關系考察 精密稱取5.5mg龍腦對照品，置于25mL量瓶中，加濃度為258μg·mL-1的十八烷乙酸乙酯內標液定容，制成對照品貯備液。以內標液不同程度稀釋貯備液，得到一系列濃度的龍腦對照品溶液。吸取上述溶液1μL進樣，以龍腦檢測濃度（X）為橫坐標，龍腦和內標峰面積積分值的比值（Y）為縱坐標，制備標準曲線，得回歸方程為Y＝3.4980X+0.0005868（r＝ 0.9999）。結果表明，龍腦檢測濃度在0.0044～0.2200μg·mL-1范圍內與其內標峰面積比值呈良好線性關系。

2.2.3 溶出樣品處理方法 取溶出水液，過0.45μm微孔濾膜，精密吸取濾液0.5mL，置于1.5mL離心管中，加入0.2mL十八烷乙酸乙酯內標液，渦旋混合3min，4℃離心10min，轉速為4000r·min-1，吸取上層乙酸乙酯液1μL，進樣測定。

2.3 溶出度測定

由于醒腦靜處方每日劑量低，其口服制劑規格較小，考慮到含量測定方法的線性范圍和檢測靈敏度的要求，采用2005年版《中國藥典》（二部）附錄ⅩC小杯法[5]測定，減少溶出介質的體積以增加藥物的濃度。分別取醒腦靜脂溶性包衣片、水溶性包衣片、滴丸（每杯15粒）和膠囊，以150mL（符合漏槽條件）脫氣處理后的蒸餾水為溶出介質，轉速100r·min-1，溫度為（37±0.5）℃，依法操作。分別在不同時間點取樣1.8mL，0.45μm濾膜過濾，每次取樣后補加同體積同溫度的溶出介質，以梔子苷和龍腦為指標，考察4種醒腦靜制劑的溶出情況。醒腦靜不同口服固體制劑有效成分累積溶出度見表1；醒腦靜不同口服固體制劑中梔子苷、龍腦溶出曲線分別見圖3、圖4。

由溶出度測定結果可知，醒腦靜不同口服固體制劑中有效成分溶出度15min之內均可達到90%以上。梔子苷水溶性較強，在水溶性包衣片、膠囊和滴丸中溶出迅速、完全，在脂溶性包衣片中溶出度稍低。龍腦在脂溶性包衣片、水溶性包衣片和滴丸中溶出完全，在膠囊中溶出度稍低，溶出較慢。由溶出曲線可看出，由于脂溶性包衣片的包衣材料在水中不會快速溶解，整體推遲了梔子苷和龍腦溶出的時間，但當包衣膜破裂后，片劑吸水崩解，有效成分迅速溶出，且溶出曲線形狀與水溶性包衣片最相近。

表1 醒腦靜不同口服固體制劑有效成分累積溶出度Tab1 Accumulative dissolution of active components of different oral solid preparations of Xingnaojing

圖3 醒腦靜不同口服固體制劑中梔子苷溶出曲線Fig3 Dissolution curve of geniposide of different oral solid preparations of Xingnaojing

圖4 醒腦靜不同口服固體制劑中龍腦溶出曲線Fig4 Dissolution curve of borneol of different oral solid preparations of Xingnaojing

2.4 各指標成分溶出曲線相似因子（f2）計算

為了更加準確地說明4種醒腦靜口服固體制劑中梔子苷和龍腦的溶出情況，采用f2法對溶出曲線進行分析[6]。f2的數學表達式為：

式中，Rt為t時間參比制劑累積溶出百分率；Tt為t時間受試制劑累積溶出百分率；n為時間點數目。f2值愈接近100，相似程度就愈高；愈接近0，相似度愈低。一般認為，當f2值在50～100時，認為兩制劑的溶出過程無顯著性差異。不同口服固體制劑中龍腦、梔子苷的f2計算結果見表2。

表2 不同口服固體制劑中龍腦、梔子苷的f2計算結果Tab2 f2value of dissolution curve of borneol and geniposide in different oral solid preparations

通過預試驗可知，不同制劑有效成分溶出度存在差異。為了更好地描述溶出過程，溶出度測定時4種制劑的取樣時間點并不完全一致，在進行不同制劑比較時，均選取共同時間點計算f2。結果表明，除水溶性包衣片和膠囊中梔子苷溶出曲線有一定相似性外，各制劑中梔子苷溶出曲線、龍腦溶出曲線均有統計學差異。

2.5 溶出曲線數學方程擬合

制劑的溶出曲線常采用數學模型加以描述，本試驗運用SAS統計軟件，分別以零級動力學方程、一級動力學方程和Higuchi方程對各制劑中不同有效成分的溶出曲線進行擬合。結果根據信息量準則（AIC）[7]，數據擬合既好又盡可能節省參數數目的模型才是可取模型，即當有若干個模型可選時，AIC為最小的模型是可取模型；若可選的若干模型的獨立未知參數均相等時，殘差平方和（RSS）小的模型為可取模型。通過AIC、RSS和相關系數（r）的計算可知，各劑型的有效成分溶出曲線基本符合一級動力學方程，可用其描述溶出過程，結果見表3。

2.6 溶出參數的計算

根據一級動力學方程擬合結果，計算各制劑中梔子苷和龍腦的釋放速率常數（K）。結果，不同口服固體制劑有效成分溶出速度不同，龍腦在水溶性包衣片中溶出最快，梔子苷在膠囊中溶出最快，詳見表4。

3 討論

由f2計算結果可知，除水溶性包衣片和膠囊中梔子苷的溶出過程近似外，其余兩兩劑型間均有較大差異。膠囊中梔子苷溶出速度較快，這是因為梔子苷水溶性極佳，在膠囊殼破裂后提取物粉末快速溶解所致；水溶性片劑衣膜在水中快速溶解，片劑迅速崩解，梔子苷溶出也較快；梔子苷在滴丸的水溶性混合PEG基質中呈固體分散狀態，但因為滴丸漸漸溶化，所以較膠囊和水溶性包衣片中梔子苷溶出稍緩；由于脂溶性包衣片劑的包衣材料在水中并不會快速溶解，所以整體推遲了梔子苷溶出的時間，但當包衣膜破裂后，由于片劑中PVPP和黏合劑PVP K30的應用，片劑迅速吸水崩解，梔子苷迅速溶出。

表3 溶出曲線數學模型擬合結果Tab3 Model fitting results of accumulation dissolution curve

表4 不同口服固體制劑中梔子苷和龍腦K值計算結果Tab4 Rate constant（K）of geniposide and borneol in different oral solid preparations

從龍腦溶出角度來看，2種片劑和滴丸最終的溶出度很接近，膠囊較前三者稍低。水溶性包衣片中龍腦溶出最快，滴丸其次；脂溶性包衣片中由于包衣膜的原因，龍腦溶出時間延遲，但衣膜破裂后，龍腦快速崩解溶出。

綜上所述，除水溶性包衣片和膠囊中梔子苷溶出曲線較相似外，其余各劑型中梔子苷和龍腦的溶出均有差異。水溶性包衣片中龍腦和梔子苷的溶出較快，溶出度高；滴丸中各成分溶出也較快，但滴丸中PEG混合基質用量與片劑和膠囊相比較大，為藥物粉末的3倍，服用量較大；膠囊中龍腦溶出度最低；脂溶性包衣片中各成分因包衣膜的原因溶出時間整體延后，但是一旦衣膜溶解破裂，片劑迅速崩解，有效成分快速溶出。最終劑型的選擇尚需考慮水溶和脂溶性2種包衣材料對片芯的適應性、包衣溫度、揮發性成分的損失和穩定性等。

[1] 過海東，郝春梅，邱英茹.醒腦靜注射液臨床應用概況[J].中國中西醫結合急救雜志，2002，9（1）：60.

[2] 蔣 曄，田書霞.中藥溶出度的研究進展[J].中成藥，2006，28（3）：415.

[3] 楊 青，陳 英.心腦康膠囊中葛根素和二苯乙烯苷的溶出度測定[J].中國藥房，2009，20（30）：2369.

[4] 張倩怡，杜守穎.梔子提取物中梔子苷油水分配系數及大鼠腸吸收動力學研究[J].中國中藥雜志，2009，34（14）：1840.

[5] 國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典（二部）[S].2005年版.北京：化學工業出版社，2005：附錄73.

[6] FDA.Guidance for industry：dissolution testing of immediate release solid oral dosage forms[S].1997.

[7] 林亞平，董 蕓.藥物釋放數學模型的評價及選擇[J].數理醫藥學雜志，1994，7（4）：308.

Comparative Study of the Dissolution of Different Oral Solid Preparation of Xingnaojing

DU Shou-ying，XU Bing，ZHANG Qian-yi
（School of Traditional Chinese Medicine，Beijing University of Traditional Chinese Medicine，Beijing 100102，China）
CHEN Wen
（Guang’an Men Hospital of China Academy of Chinese Medical Sciences，Beijing 100053，China）

OBJECTIVE：To investigate the dissolution of different oral solid preparation of Xingnaojing and to compare the dissolution characteristics of active components of different oral solid preparation of Xingnaojing in order to provide reference for dosage form selection of Xingnaojing.METHODS：The dissolution of Xingnaojing was determined by small cup method at rotating speed of 100r·min-1using distilled water as dissolution medium.The dissolution of gardenin and borneol in Xingnaojing were determined by HPLC method.The accumulative dissolution percentages were calculated，and the resemblance of release curves were compared by similarity factors.RESULTS：The dissolution curves of different oral solid preparations were similar besides Xingnaojing water-soluble coating tablets and Xingnaojing capsules.The dissolution curves of gardenin and borneol were different significantly among different oral solid preparations.The dissolution curves of active components were up to first order kinetic equation.CONCLUSION：The accumulative dissolution of active components can be more than 90%in 15min.The dissolution of gardenin in capsule was the fastest as borneol in water-soluble coating tablet.

Xingnaojing；Oral solid preparation；Gardeninin；Borneol；Dissolution；Similarity factors；HPLC

R283.6；R944.2

A

1001-0408（2011）19-1761-04

Δ國家科技支撐計劃課題（2006BAI06A17）；國家科技重大專項課題（2009ZX09502-008）

＊教授，博士研究生導師，博士。研究方向：中藥新劑型與中藥制劑關鍵技術。電話：010-84738615。E-mail：dushouying@263.com

2010-06-23

2010-09-02）