徐 靜 刁煥榮 拱玉華 郭長江 韋京豫 楊繼軍 (沈陽軍區總醫院營養科,遼寧 沈陽 006)
抗氧化活性較強果汁一次性灌胃對老年大鼠外周血抗氧化活性的影響
徐 靜 刁煥榮1拱玉華 郭長江2韋京豫2楊繼軍2(沈陽軍區總醫院營養科,遼寧 沈陽 110016)
目的 觀察抗氧化活性較強水果汁對老齡大鼠外周血抗氧化活性的影響。方法 自然衰老及成年Wistar大鼠各20只分為實驗組和對照組,取山楂、獼猴桃、石榴、草莓制汁灌胃,連續動態觀察5 h內大鼠外周血抗氧化活性的變化。結果 灌胃4 g抗氧化活性較強的山楂、獼猴桃、石榴汁后,老齡大鼠外周血抗氧化活性沒有顯著變化,而成年大鼠顯著增強,與老年組相比有顯著性差別(P<0.01);10 g獼猴桃榨汁及含500 mg維生素C(VC)水溶液灌胃后老齡大鼠5 h內外周血抗氧化活性動態變化不顯著,成年大鼠顯著升高。結論 灌胃后老齡大鼠與成年大鼠對抗氧化物質的吸收利用能力存在顯著差異。
水果汁;抗氧化活性;老年大鼠
我們前期測定了30種水果的體外抗氧化活性,發現不同品種水果抗氧化活性相差非常大,最強的山楂與最弱的柿子之間相差達95.9倍〔1〕。因此,我們估計不同抗氧化活性水果對機體抗氧化防御體系功能的影響也會有所不同。食物中抗氧化物質在衰老機體的吸收利用情況鮮有報道。我們選擇了幾種抗氧化活性較強的水果,通過一次性灌胃的方法觀察老齡大鼠外周血抗氧化活性的變化。
1.1 材料 選擇抗氧化活性較強的鮮品,山楂(13.42 mmol/100 g)、獼猴桃(4.38 mmol/100g)、石榴(3.10 mmol/100 g)(均購于本地農貿市場),分別以自來水、雙蒸水沖洗干凈后,晾干,將可食部分切成丁塊狀,稱取一定量果肉,迅速充分研磨后置于離心管中,5 000 r/min離心10 min,取上層果汁備用(均為臨用前制備)。
1.2 灌胃實驗 自然衰老Wistar大鼠(20月齡以上)20只作為實驗組,成年Wistar大鼠(2~3月齡)20只作為對照組,由軍事醫學科學院實驗動物中心提供。由于大鼠無食用水果的習性,因此,采用水果原汁灌胃。大鼠空腹12 h后分別灌胃上述不同水果汁,于灌胃前及灌胃后1、3、5 h采取眼眶后靜脈叢血液,3 000 r/min離心10 min,取上層血清,以鐵離子還原/抗氧化能力測定法(FRAP)測定抗氧化活性,大致步驟如下:取適量樣品,加入1.8ml三吡啶三吖嗪(TPTZ)工作液,混勻后37℃反應10 min,測定593 nm處吸光度。
1.3 統計學方法 用SAS統計軟件進行t檢驗和相關分析。
2.1 不同品種水果汁灌胃對大鼠外周血抗氧化活性(以AUC表示)的影響 由表1可見,山楂、獼猴桃、石榴各4 g(約相當于大鼠每天進食量的20%)榨汁灌胃后老年大鼠外周血抗氧化活性沒有顯著變化,而成年大鼠較老年大鼠外周血抗氧化活性顯著升高(P<0.01)。
2.2 10 g獼猴桃榨汁灌胃對大鼠外周血抗氧化活性動態變化的影響 將10 g獼猴桃(約相當于大鼠每天進食量的50%)榨汁灌胃,由表2可見,老齡大鼠外周血抗氧化活性5 h內變化不明顯,成年大鼠外周血抗氧化活性1 h后升高,3 h顯著升高。
2.3 500 mg VC水溶液灌胃對大鼠外周血抗氧化活性動態變化的影響 500mg VC水溶液灌胃后成年大鼠外周血抗氧化活性升高,而老齡大鼠外周血抗氧化活性無明顯變化。見表3。
表1 不同水果汁對大鼠血清抗氧化活性的影響(±s,mmol/L)

表1 不同水果汁對大鼠血清抗氧化活性的影響(±s,mmol/L)
與老年組比較:1)P<0.01
組別 山楂 獼猴桃 石榴成年組 1.17±0.511) 0.48±0.151) 0.45±0.121)老年組0.15±0.05 0.12±0.03 0.12±0.04
表2 10 g獼猴桃榨汁灌胃對大鼠血清抗氧化活性的動態影響(±s,mmol/L)

表2 10 g獼猴桃榨汁灌胃對大鼠血清抗氧化活性的動態影響(±s,mmol/L)
與成年組0 h值比較:1)P<0.05
組別0 h 1 h 3 h 5 h成年組 0.72±0.21 0.85±0.15 0.91±0.141)0.82±0.08老年組0.58±0.12 0.52±0.15 0.58±0.08 0.64±0.09
表3 500 mg VC水溶液灌胃對大鼠血清抗氧化活性的動態影響(±s,mmol/L)

表3 500 mg VC水溶液灌胃對大鼠血清抗氧化活性的動態影響(±s,mmol/L)
與成年組0 h值比較:1)P<0.01
組別0 h 1 h 3 h 5 h成年組 0.69±0.18 1.33±0.201)1.28±0.141)1.18±0.171)老年組0.61±0.10 0.59±0.13 0.65±0.19 0.64±0.10
隨著年齡的增加,體內一些抗氧化物質含量減少,一些抗氧化酶活性下降,造成抗氧化防御體系功能的下降,導致自由基損傷加劇。外周血抗氧化活性能較好的反映血中抗氧化防御系統的功能變化,我們用該指標觀察灌胃不同抗氧化活性水果后機體抗氧化防御系統功能的變化情況。
本研究發現老齡大鼠外周血抗氧化活性5 h內沒有顯著變化,而成年大鼠外周血抗氧化活性1 h后即可見升高,然后緩慢下降,5 h基本恢復至原點水平,說明成年大鼠對水果中的抗氧化物質吸收代謝情況良好。Kiefer等〔2〕研究也表明給予機體一定量水果后,血清抗氧化物質包括VC、VE、β-胡蘿卜素、硒等含量均顯著升高。隨后我們又以500 mg/ml VC水溶液灌胃,5 h內仍未發現老齡大鼠血清抗氧化活性有明顯變化,而成年大鼠則顯著升高,說明老齡大鼠與成年大鼠對抗氧化物質的吸收利用能力確實存在顯著差異。胃腸道功能隨年齡增加而逐步退化,可能導致老年機體對于營養素的吸收、代謝等速率減緩,所以抗氧化物質無法在短期內發揮生理作用。Cardinault等〔3〕分別觀察了老年人及年輕人對番茄紅素的吸收情況,結果發現老年人對番茄紅素的生物利用度比年輕人顯著降低。目前也有一些研究報道未能證實蔬菜、水果攝入對人體抗氧化防御功能的改善作用,如Mφller等〔4〕的短期(24 d)干預研究結果表明,每天補充600 g的蔬菜、水果混合物,體內DNA氧化損傷水平并沒有顯著降低。而一些長期的干預實驗則證實了蔬菜、水果攝入對人體抗氧化防御功能的改善作用,如Smith等〔5〕給老年人每天補充蔬菜、水果提取混合物,80 d后發現外周血淋巴細胞DNA損傷明顯減輕。
本一次性灌胃實驗未發現抗氧化物質短時間干預能顯著升高衰老大鼠外周血抗氧化活性,應適當延長干預時間,進行長期喂養實驗以進一步驗證抗氧化活性作用較強的水果對衰老機體抗氧化防御體系功能的改善作用。
1 郭長江,韋京豫,楊繼軍,等.66種蔬菜、水果抗氧化活性的比較研究〔J〕.營養學報,2003;25:203-7.
2 Kiefer I,Prock P,Lawrence C,et al.Supplementation with mixed fruit and vegetable juice concentrates increased serum antioxidants and folate in healthy adults〔J〕.JAm Coll Nutr,2004;23:205-11.
3 Cardinault N,Tyssandier V,Grolier P,et al.Comparison of the postprandial chylomicron carotenoid responses in young and older subjects〔J〕.Eur JNutr,2003;42(6):315-23.
4 Mφller P,Vogel V,Pevan den Berg BR,et al.A vegetable/fruit concentratewith high antioxidant capacity hasno effecton biomarkersof antioxidant status in male smokers〔J〕.JNutr,2001;131:1714-22.
5 Smith MJ,Inserra PF,Watson RR,et al.Supplementation with fruit and vegetable extractsmay decrease DNA damage in the peripheral lymphocytes of and elderly population〔J〕.Nutr Res,1999;19:1507-18.
R339.3
A
1005-9202(2011)12-2263-02
達能膳食營養研究與宣教基金(No.DIC2002-09)
1 中國醫科大學附屬第四醫院 2 衛生學環境醫學研究所
徐 靜(1974-),女,營養師,博士,主要從事老年人群營養研究。
〔2010-05-26收稿 2010-11-04修回〕
(編輯 劉 愉/曹夢園)