香丹注射液配伍組對小鼠缺氧模型的保護作用

楊超燕， 唐春萍， 沈志濱， 丘俊文， 陳燕思

(廣東藥學(xué)院中藥學(xué)院，廣東廣州510006)

香丹注射液又稱復(fù)方丹參注射液，是由丹參、降香兩味中藥經(jīng)提取精制而成，具有擴張冠脈、增加冠脈血液量、保護心肌缺血缺氧、清除自由基、保護肝損害、鎮(zhèn)靜、改善血液流變學(xué)等作用，主要用于心絞痛，也可用于心肌梗塞［1］。前期實驗結(jié)果表明香丹注射液ADE配伍組(16 g生藥/kg)對小鼠常壓耐缺氧存活的時間具有延長作用且優(yōu)于香丹注射液組［2］;對垂體后葉素致大鼠心肌缺血具有較好的改善作用［3］，本實驗通過幾種小鼠動物缺氧模型考察香丹注射液ADE配伍組對缺氧模型動物的保護作用，從抗整體小鼠缺氧作用方面初步探討香丹注射液改善心腦血管作用的物質(zhì)基礎(chǔ)，為其在心腦血管方面的臨床應(yīng)用提供基礎(chǔ)實驗研究依據(jù)。

1 試驗材料

1.1 試劑與藥品 香丹注射液提取部位配伍ADE低、中、高劑量(8、16、32 g生藥/kg)組，均由廣東藥學(xué)院中藥學(xué)院中藥化學(xué)教研室提供;美托洛爾注射液(廣州白云山天心制藥股份有限公司，081101);鹽酸異丙腎上腺素注射液(上海禾豐制藥有限公司，070701)。

1.2 動物 NIH小鼠，SPF級，體質(zhì)量18～22 g，雄性，由廣東省醫(yī)學(xué)實驗動物中心提供(合格證號:2008A021)。

2 實驗方法與結(jié)果

2.1 藥液的制備 取香丹注射液的石油醚萃取部分(A)、正丁醇萃取部分(D)和水萃取部分(E)組合配得ADE配伍組，作為樣品溶液。

2.2 對小鼠常壓耐缺氧存活時間的影響 取60只小鼠，隨機分5組:生理鹽水對照組，美托洛爾陽性組，ADE高、中、低劑量(32、16、8 g生藥/kg)組，每組12只，各組iv給藥，每日1次，連續(xù)給藥3 d，末次給藥3 min后，將小鼠分別放入125 mL磨口廣口瓶內(nèi)密封，立即計時，以停止呼吸為標準，觀察小鼠存活時間。由表1可知，ADE高、中、低劑量組都有明顯延長小鼠存活時間的作用。見表1。

表1 香丹注射液ADE配伍組對小鼠常壓耐缺氧存活時間的影響(±s，n=12)

表1 香丹注射液ADE配伍組對小鼠常壓耐缺氧存活時間的影響(±s，n=12)

注:與生理鹽水組比較:*P＜0.05，＊＊P＜0.01(t檢驗)。

/min生理鹽水 ——組別 劑量/(g生藥/kg) 小鼠存活時間17.08±1.84美托洛爾組 2 mg 59.48±18.15＊＊ADE高劑量組 32 21.03±4.39*ADE中劑量組 16 20.72±4.34*ADE低劑量組 8 20.08±3.97*

2.3 對亞硝酸鈉中毒小鼠存活時間的影響 取50只小鼠，隨機分5組:同2.2項，每組10只，各組iv給藥，每日1次，連續(xù)給藥3 d，末次給藥3 min后，各組小鼠均腹腔注射亞硝酸鈉250 mg/kg，觀察小鼠存活時間。由表2可知，ADE低、中、高劑量(8、16、32 g生藥/kg)組對亞硝酸鈉中毒致小鼠存活時間無顯著性影響，表明ADE配伍組對亞硝酸鈉中毒致小鼠組織缺氧無保護作用。見表2。

表2 香丹注射液ADE配伍組對亞硝酸鈉中毒小鼠存活時間的影響(±s，n=10)

表2 香丹注射液ADE配伍組對亞硝酸鈉中毒小鼠存活時間的影響(±s，n=10)

注:與生理鹽水組比較:*P＜0.05(t檢驗)。

/min生理鹽水 ——組別 劑量/(g生藥/kg) 小鼠存活時間27.28±6.52美托洛爾組 2 mg 32.80±5.05*ADE高劑量組 32 24.95±2.11 ADE中劑量組 16 24.25±2.37 ADE低劑量組825.56±5.29

2.4 對異丙腎上腺素性心肌缺氧模型小鼠常壓耐缺氧的影響 取72只小鼠，隨機分6組:生理鹽水對照組，模型組，美托洛爾陽性組，ADE高、中、低劑量組，每組12只，各組iv給藥，每日1次，連續(xù)給藥3 d。于第3天除正常組小鼠腹腔注射生理鹽水外，其余各組小鼠腹腔注射鹽酸異丙腎上腺素15 mg/kg造模。20 min后，各組小鼠iv給藥后3 min，將小鼠分別放入250 mL磨口廣口瓶內(nèi)密封，立即計時，以停止呼吸為標準，觀察小鼠存活時間。結(jié)果表明ADE高劑量組能顯著提高小鼠異丙腎上腺素模型耐缺氧的能力，顯著延長小鼠存活時間;ADE高、中、低劑量組對15 min、20 min小鼠存活率也有提高作用，但與模型組無顯著性差異。見表3。

表3 香丹注射液ADE配伍組對異丙腎上腺素性心肌缺氧模型小鼠的存活時間及存活率的影響(±s，n=12)

表3 香丹注射液ADE配伍組對異丙腎上腺素性心肌缺氧模型小鼠的存活時間及存活率的影響(±s，n=12)

注:與生理鹽水組比較:*P＜0.05;與模型組比較:△P＜0.05;△△P＜0.05(t檢驗)。

組別 劑量/(g生藥/kg) 小鼠存活時間/min 15 min存活鼠/只 存活率/%20 min存活鼠/只 存活率/%正常組 ——22.06±4.45 12 100 7 58.3模型組 —— 18.18±4.71* 9 75 4 33.3美托洛爾組 2 mg 66.32±10.87△△ 12 100 12 100 ADE高劑量組 32 22.15±2.31△ 12 100 9 75 ADE中劑量組 16 21.06±3.60 12 100 6 50 ADE低劑量組819.95±4.54 11 91.7 5 41.7

3 討論

本實驗結(jié)果顯示:香丹注射液ADE配伍組有明顯延長小鼠常壓存活時間的作用，說明其能改善機體的心、腦等主要器官缺氧供能不足情況。

香丹注射液ADE配伍高劑量組能顯著延長小鼠對異丙腎上腺素引起的心肌耗氧增加所致心肌缺血的存活時間，可確定其對心肌缺血具有明顯的改善作用。

在亞硝酸鈉致小鼠中毒存活實驗中，亞硝酸鈉使正常二價鐵血紅蛋白轉(zhuǎn)變?yōu)槿齼r鐵血紅蛋白，破壞血紅蛋白攜氧能力，造成腦和機體重要器官、組織供氧不足而死亡，一般具有升高血漿血紅蛋白量作用的受試物可以延長小鼠亞硝酸鈉中毒存活時間［4］，但ADE配伍組對亞硝酸鈉中毒致小鼠組織缺氧無明顯的保護作用，提示香丹注射液ADE配伍組不能改善血漿血紅蛋白量。

根據(jù)香丹注射液ADE配伍組的高效液相圖譜可知，其主要化學(xué)成分量的多少依次為:丹參素＞迷迭香酸＞丹酚酸B＞丹酚酸D＞丹酚酸C＞原兒茶醛。從3個缺氧模型實驗結(jié)果表明香丹注射液ADE配伍組對小鼠全身性缺氧和異丙腎上腺素所致的心肌缺氧有明顯的改善作用，但關(guān)于其耐缺氧的具體有效成分和機制還有待于進一步研究。

［1］楊 麗.香丹注射液的臨床用途及其不良反應(yīng)［J］.中華實用醫(yī)藥雜志，2004，14(4):60－61.

［2］楊超燕.香丹注射液抗缺氧有效部位的實驗研究［J］.時珍國醫(yī)國藥，2010，21(4):55－56.

［3］尹永芹，朱俊訪，沈志濱，等.神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)分析香丹注射液抗心肌缺血有效成分的譜效相關(guān)性研究［J］.中草藥，2009，40(8):1284－1287.

［4］彭雪芹，陳 文，李麗燕，等.馬鹿茸血口服液對小鼠耐缺氧作用的影響［J］. 石河子大學(xué)學(xué)報，2008，26(4):477－479.