中醫(yī)藥治療慢性盆腔炎實(shí)驗(yàn)研究概述

賈 磊，王希浩

(1.河南中醫(yī)學(xué)院，河南 鄭州450008;2.河南省中醫(yī)藥研究院，河南 鄭州450004)

盆腔炎(pelvic inflammatory disease，PID)是指女性上生殖道及其周?chē)M織的炎癥，主要包括子宮內(nèi)膜炎、輸卵管炎、輸卵管卵巢膿腫、盆腔腹膜炎［1］，炎癥可局限于一個(gè)部位，也可同時(shí)累及幾個(gè)部位，臨床分為急性期和慢性期，尤以慢性盆腔炎(chronic pelvic inflammatory disease，CPID)多見(jiàn)，為婦科常見(jiàn)病、多發(fā)病。本病具有纏綿難愈、易于復(fù)發(fā)的特點(diǎn)，嚴(yán)重影響婦女身心健康。本病屬中醫(yī)學(xué)“瘕瘕”、“腹痛”、“帶下病”、“痛經(jīng)”、“不孕”范疇。近年來(lái)，慢性盆腔炎的實(shí)驗(yàn)研究取得了很大進(jìn)展，主要從以下幾個(gè)方面進(jìn)行研究。

1 動(dòng)物模型的研究

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇

目前，文獻(xiàn)報(bào)道中絕大部分采用大鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，構(gòu)建大鼠子宮內(nèi)膜炎模型［2］。選用大鼠子宮作為研究對(duì)象的原因是:子宮內(nèi)膜炎是盆腔炎的一種，可因其上行感染引起盆腔其他臟器的炎癥，大鼠具有雙側(cè)子宮，并且子宮在盆腔生殖器官中占有相當(dāng)大的比重，可以進(jìn)行單側(cè)感染，便于對(duì)照。聞莉等［3］通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，單側(cè)感染時(shí)，另外一側(cè)未受病變累及，未見(jiàn)IgG 沉積，說(shuō)明本模型無(wú)自身免疫因素存在，可進(jìn)行自身對(duì)照，故認(rèn)為大鼠子宮內(nèi)膜炎基本反映盆腔的炎癥狀態(tài)。

1.2 造模方法

1.2.1 化學(xué)性燒傷

蔡雪 芬 等［4］采 用0. 4% 戊 巴 比 妥 鈉(50 μg/g 或30 μg/g)腹腔注射麻醉大鼠，無(wú)菌條件下取大鼠下腹正中切口約0.8～1 cm，開(kāi)腹后暴露并固定子宮，用4 號(hào)針頭選取左側(cè)子宮在其分叉處向卵巢方向緩慢注入20% 苯酚膠漿0.1 mL，然后分層縫合關(guān)腹，消毒術(shù)區(qū)，關(guān)于苯酚膠漿的濃度與劑量，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)所需的炎癥嚴(yán)重程度而定。王靜等［5］采用4 號(hào)針頭于子宮分叉處進(jìn)針入子宮腔內(nèi)，朝卵巢方向緩慢推注25%苯酚膠漿0.05 mL 的方法制備模型，病理結(jié)果也顯示為慢性炎癥;在此次實(shí)驗(yàn)研究中還通過(guò)組織形態(tài)學(xué)觀察和免疫學(xué)指標(biāo)檢測(cè)，更客觀的反應(yīng)出該模型有炎癥反應(yīng)，與人類(lèi)盆腔炎有相似之處。

1.2.2 細(xì)菌感染

早在20 世紀(jì)80 年代就有細(xì)菌性盆腔炎癥模型研制成功的報(bào)道［6］，采用的方法為:使用B 型溶血性鏈球菌菌液對(duì)新西蘭雌兔雙側(cè)輸卵管進(jìn)行接種，每側(cè)輸卵管接種0.04 mL濃度為1.5 ×108/mL 的菌液，造成兔輸卵管炎性阻塞模型。觀察模型病理切片，結(jié)果顯示為慢性中度炎癥。此模型制作方法簡(jiǎn)單，重復(fù)性好。馮光榮等［7－8］采用大腸埃希菌液作為致炎劑，注入大鼠子宮，血液流變學(xué)測(cè)定以及子宮病理形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果均表明該方法可以造成大鼠慢性盆腔炎。也有學(xué)者將慢性盆腔炎的常用致病菌進(jìn)行混合，配制成混合菌液作為致炎劑。如陳瑩等［9］以大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、鏈球菌按2∶1∶1 比例采用無(wú)菌生理鹽水稀釋?zhuān)渲瞥蓾舛燃s為3 ×109/mL 的混合菌，將菌液注入大鼠輸卵管內(nèi)，模型動(dòng)物的輸卵管增粗，呈輕度或中度腫大，并與周?chē)M織粘連;病理切片顯示為上皮細(xì)胞壞死;大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)伴充血水腫，提示大鼠慢性盆腔炎造模成功。

1.2.3 機(jī)械損傷加細(xì)菌感染

方法:一側(cè)子宮用注射器劃傷子宮內(nèi)膜，然后注入菌液，另一側(cè)作為自身對(duì)照，不劃傷也不注射菌液;宮腔組織的損傷是細(xì)菌在組織內(nèi)停滯并形成病變的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，但應(yīng)注意損傷的程度。該造模方法能成功的制造更貼近人類(lèi)慢性盆腔炎的動(dòng)物病理模型，如劉國(guó)生等［10］采用大腸埃希菌菌液為致炎劑，按上述方法造模，造模子宮紅腫、充血、重量增加;病理切片發(fā)現(xiàn)子宮有明顯的粘連、炎癥浸潤(rùn)、黏膜層水腫、腺體破壞或減少等變化，與人類(lèi)慢性盆腔炎疾病表現(xiàn)相似。

2 抗炎研究

2.1 減少炎性滲出與增生

楊東霞等［11］證實(shí)，炎克寧IV 號(hào)方能明顯減輕組織充血、水腫、炎性滲出及粘連，促進(jìn)組織修復(fù);明顯降低促炎癥基因表達(dá)關(guān)鍵性的轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子NF-KB 的表達(dá)水平，進(jìn)而降低由細(xì)胞因子引起的炎癥病理?yè)p害;明顯降低ICAM-1 的表達(dá)水平，減輕組織損傷及局部組織慢性纖維化;明顯降低TNF-a 和IL-10 水平，促進(jìn)促炎因子和抑炎因子恢復(fù)平衡;明顯降低NO 和NOS 的水平，減輕組織細(xì)胞的損傷;能夠促進(jìn)Bax 表達(dá)，從而促進(jìn)炎癥細(xì)胞的凋亡;能夠通過(guò)增加血清超氧化物歧化酶(SOD)含量，加快清除氧自由基;抑制NF-KB及炎癥介質(zhì)、促進(jìn)炎細(xì)胞的凋亡及氧自由基的清除治療慢盆腔炎。賈麗娜等［12］在婦科千金軟膠囊對(duì)大腸桿菌致炎的治療作用的研究中，采用左側(cè)子宮注入大腸桿菌制備慢性盆腔炎模型，以右側(cè)子宮作為對(duì)照，造模后第10 天起給藥治療15 d，比較兩側(cè)子宮重量差異，計(jì)算腫脹率，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，婦科千金軟膠囊能消除炎性包塊。

2.2 誘導(dǎo)炎細(xì)胞凋亡

曲凡等［13］證實(shí)，炎克寧IV 號(hào)方通過(guò)增加模型大鼠子宮組織中Caspase-3、Fas/FasLmRNA 和p53mRNA 的表達(dá)，誘導(dǎo)炎細(xì)胞凋亡，抑制炎細(xì)胞生長(zhǎng)，從而減輕炎癥反應(yīng)，有利于慢性盆腔炎癥的消除。

2.3 炎癥介質(zhì)測(cè)定

王瑩等［14］在炎克寧沖劑對(duì)慢性盆腔炎模型炎性介質(zhì)含量的影響研究中，采用混合菌制備大鼠慢性盆腔炎模型，采用熒光分度法檢測(cè)模型局部組織NO 水平，結(jié)果表明慢性盆腔炎病灶中存在大量NO，NO 不僅對(duì)細(xì)菌、真菌和腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生殺傷作用，而且還可以損傷正常組織，炎克寧沖劑能減少炎性介質(zhì)的釋放，發(fā)揮治療慢性盆腔炎的作用。

3 鎮(zhèn)痛研究

目前，疼痛的動(dòng)物模型主要是軀體疼痛模型，常用的有熱板法、扭體法等［15］。王玉坤等［16］在婦炎康軟膠囊對(duì)大鼠慢性盆腔炎的鎮(zhèn)痛作用研究中，分組給藥7 d 后，采用小鼠熱板舔足反應(yīng)的方法，觀察到婦炎康軟膠囊(5. 88，11.76 g/kg)可延長(zhǎng)小鼠熱板舔足反應(yīng)潛伏期;通過(guò)小鼠腹腔注射0.8%冰醋酸0.01 mL/g，觀察15 min 內(nèi)小鼠扭體次數(shù)，結(jié)果顯示，婦炎康軟膠囊(5.88，11.76 g/kg )可抑制冰醋酸引起的扭體次數(shù)。

4 免疫功能研究

盆腔炎發(fā)病除與病原體感染有關(guān)外，還與機(jī)體免疫功能低下或紊亂有關(guān)。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，“正氣存內(nèi)，邪不可干”、“邪之所湊，其氣必虛”，機(jī)體的免疫狀態(tài)對(duì)病原微生物引起的炎癥過(guò)程有著重大的影響，在抗感染過(guò)程中，體液免疫和細(xì)胞免疫起著重要作用。

4.1 體液免疫

陳穎異等［17］觀察中藥舒康湯對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性子宮內(nèi)膜炎免疫功能的影響，用酸度非特異性酯酶染色法測(cè)定T 細(xì)胞百分率;用PHA 刺激的形態(tài)學(xué)法測(cè)定淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率;吞噬中性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)測(cè)定腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能;用攻擊YAC-1 細(xì)胞法測(cè)定脾細(xì)胞NK 活性;用免疫濁度法測(cè)定免疫球蛋白IgG、lgA、IgM 的含量。結(jié)果顯示，大鼠在接受慢性盆腔炎動(dòng)物模型造模后，細(xì)胞免疫、體液免疫各項(xiàng)指標(biāo)均明顯下降(P＜0.05)。舒康湯治療后，血液中免疫球蛋白IgG、lgA、IgM 的含量、T 細(xì)胞百分率、淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率及腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能均恢復(fù)到正常水平(P＜0.01，或P＜0.05)。

4.2 細(xì)胞免疫

曲凡等［14］觀察炎克寧IV 號(hào)方通過(guò)降低慢性盆腔炎模型大鼠血清中白介素－2、白介素－6 含量和子宮組織中INF-r的表達(dá)，使其接近正常水平，恢復(fù)免疫平衡，從而控制慢性盆腔炎的病理發(fā)展。史凱凱等［18］觀察發(fā)現(xiàn)，敗醬復(fù)方膠囊給藥組大鼠較模型組大鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化指數(shù)、血清IL-2 降低，IL-6 升高。劉瑞芬等［19］采用混合細(xì)菌造模法制模，模型大鼠表現(xiàn)出血清TNF 濃度明顯增高、IL-2 的濃度明顯下降，經(jīng)盆腔炎顆粒治療后大鼠血清TNF、IL-2 值與對(duì)照組相比差異有顯著性(P＜0.05)。

5 血液流變學(xué)及微循環(huán)研究

慢性盆腔炎可導(dǎo)致血液黏滯性升高，處于“濃、黏、凝、聚”的狀態(tài)。李靈芝等［20］研究新制易黃丸的藥物作用，選用苯酚膠漿致大鼠子宮內(nèi)膜炎進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果血液流變學(xué)包括全血比黏度、血細(xì)胞比容、血漿比黏度均有顯著性改變，血清血栓素B2(TXB2)含量升高(P ﹤0.05)，6－酮前列腺素F1a(6－Keto－PGF1a)含量下降(P＜0.05)。谷風(fēng)［21］通過(guò)利濕化瘀法對(duì)慢性盆腔炎大鼠血清SOD、MDA 影響的研究表明，以利濕化瘀法為主治療慢性盆腔炎可以升高超氧化物歧化酶(SOD)、降低丙二醛(MDA)，改善血液的濃、黏、凝、聚的狀態(tài)，能抗組織氧化、改善局部血液循環(huán)和組織營(yíng)養(yǎng)、有利于炎性分泌物的消散和吸收，從而達(dá)到治療的作用。沈碧瓊等［22］通過(guò)對(duì)大白鼠腸系膜微循環(huán)的影響，了解盆炎清膠囊對(duì)免疫及微循環(huán)的作用，結(jié)果顯示，盆炎清膠囊能改善由去甲腎上腺素(NA)所致的大白鼠腸系膜微循環(huán)障礙，使血流量增加，在短時(shí)間內(nèi)將微循環(huán)狀態(tài)恢復(fù)到實(shí)驗(yàn)前水平。

6 病理組織學(xué)研究

病理組織學(xué)觀察是反應(yīng)模型是否成功以及藥物是否有治療意義的重要手段之一。盧如玲等［23］研究了盆炎康合劑對(duì)慢性盆腔炎大鼠病理形態(tài)學(xué)的影響，結(jié)果顯示，盆炎康合劑能有效改善慢性盆腔炎大鼠盆腔粘連，能緩解炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)，改善子宮病理狀態(tài)，起到治療盆腔炎的目的。向海燕等［24］研究了金剛藤分散片對(duì)大鼠慢性盆腔炎的藥效學(xué)作用，實(shí)驗(yàn)中采用苯酚膠漿致炎，取子宮肉眼觀察并進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。結(jié)果顯示，金剛藤分散片組大鼠子宮內(nèi)膜變化均較模型組有顯著改善，說(shuō)明金剛藤分散片能夠抑制炎癥細(xì)胞的增生，促進(jìn)組織的修復(fù)，對(duì)大鼠慢性盆腔炎有較理想的治療作用。

7 討 論

近年來(lái)，中醫(yī)藥治療慢性盆腔炎取得可喜的進(jìn)展，但尚存在著一些不容忽視的問(wèn)題，主要有以下幾個(gè)方面:①研究出更加符合人類(lèi)慢性盆腔炎炎性病變的動(dòng)物模型，最好能建立不同的癥候模型使該模型更符合臨床發(fā)病病因;②加強(qiáng)對(duì)藥物作用機(jī)制研究，從不同層次進(jìn)行藥物作用的機(jī)制研究，如整體的、細(xì)胞的、分子的等，使藥物在治療該病方面的理論與現(xiàn)代科學(xué)緊密結(jié)合;③藥物成分、藥物組方的研究，如在中藥方中究竟哪些中藥具有明顯的治療急慢性盆腔炎的作用，其有效成分是什么，那些藥物可以刪減，以求用藥的合理性。

［1］樂(lè)杰，謝幸，豐有吉.婦產(chǎn)科學(xué)［M］.6 版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2004.

［2］丁孝良，王偉卓. 坤復(fù)康膠囊對(duì)慢性盆腔炎模型大鼠的TNF-α、IL-2 的影響［J］. 陜西中醫(yī)，2009，30(3):354－355.

［3］聞莉.大鼠慢性盆腔炎模型的技術(shù)要求及模型特點(diǎn)［J］.浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志，2001，11(8):484－486.

［4］蔡雪芬，王樟連，陳利芳.黃芪注射液穴位注射治療慢性盆腔炎的實(shí)驗(yàn)研究［J］.浙江大學(xué)學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)版，2006，35(4):430－434.

［5］王靜. 盆腔炎顆粒對(duì)大鼠慢性子宮內(nèi)膜炎療效的研究［J］.中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2006，12(1):56－58.

［6］李祥云.峻竣煎對(duì)輸卵管炎性阻塞動(dòng)物模型影響的實(shí)驗(yàn)研究［J］.上海中醫(yī)藥雜志，1997，31(10):41.

［7］馮光榮，楊志強(qiáng)，李翠萍，等. 婦樂(lè)維康膠囊對(duì)大腸桿菌所致大鼠慢性盆腔炎局部免疫功能的調(diào)節(jié)作用［J］. 中醫(yī)研究，2004;17(4):6－8.

［8］馮光榮.婦樂(lè)維康膠囊對(duì)慢性盆腔炎大鼠血液流變學(xué)及病理形態(tài)學(xué)改變的影響［J］. 中國(guó)中醫(yī)藥科技，2005，12

(5):152－153.

［9］陳瑩，田璐，王昕.婦炎寧顆粒對(duì)慢性盆腔炎模型大鼠的IL-2、IL-6 影響［J］.中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2008，26(8):1705－1706.

［10］劉國(guó)生，王桐生，龍子江，等.盆腔炎沖劑對(duì)大鼠慢性盆腔炎模型的影響［J］. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2004，10(3):24－26.

［11］楊東霞，馬寶璋. 炎克寧IV 號(hào)方對(duì)慢性盆腔炎模型大鼠免疫及凋亡調(diào)控作用的實(shí)驗(yàn)研究［D］.哈爾濱:黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，2007.

［12］賈麗娜，趙世萍，閆靜，等.婦科千金軟膠囊治療盆腔炎藥效學(xué)研究［J］. 中藥新藥與臨床藥理，2006，17(1):18－20.

［13］曲凡，馬寶璋. 炎克寧IV 號(hào)方對(duì)慢性盆腔炎模型大鼠免疫及凋亡調(diào)控作用的實(shí)驗(yàn)研究(I)［D］.哈爾濱:黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，2007.

［14］王瑩，馬文光，張三元，等.炎克寧沖劑對(duì)慢性盆腔炎模型炎性介質(zhì)含量的影響［J］. 首都醫(yī)藥藥物研究，2005，12(6):41－42.

［15］陳明. 中藥治療慢性盆腔炎的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)研究概述［J］.中醫(yī)藥臨床雜志，2008，20(2):202－204.

［16］王玉坤，江勤，李前進(jìn). 婦炎康軟膠囊對(duì)大鼠慢性盆腔炎的作用［J］.安徽醫(yī)學(xué)，2007，11(5):393－395.

［17］陳穎異，何曉文，肖振字. 舒康湯對(duì)慢性盆腔炎大鼠免疫功能的影響［J］. 中國(guó)中醫(yī)藥科技，2002，9(6):335－336.

［18］史凱凱，段徐華.敗醬復(fù)方膠囊對(duì)混合菌液所致大鼠慢性盆腔炎的治療作用［J］. 數(shù)理醫(yī)藥學(xué)雜志，2006，19(2):169－71.

［19］劉瑞芬，楊曉娜，李伯勤. 盆腔炎顆粒治療慢性盆腔炎的臨床與實(shí)驗(yàn)研究［J］. 山東中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，27(6):424－425.

［20］李靈芝，李桂華，崔兆琴. 新制易黃丸對(duì)大鼠子宮內(nèi)膜炎血液流變學(xué)的實(shí)驗(yàn)研究［J］.河北中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，1999，1(2):1－4.

［21］谷風(fēng).利濕化瘀法對(duì)慢性盆腔炎大鼠血清SOD、MDA 影響的實(shí)驗(yàn)研究［J］.陜西中醫(yī)，2010，31(4):496－497.

［22］沈碧瓊，司徒儀，區(qū)勇全. 盆炎清膠囊主要藥效學(xué)研究［J］.廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2001，18(2):159－162.

［23］盧如玲.許麗綿，操紅纓，等.盆炎康合劑對(duì)慢性盆腔炎大鼠盆腔粘連及病理形態(tài)學(xué)的影響［J］. 新中醫(yī)，2010，42(1):102－104.

［24］向海燕，侯連兵，黃嗣航，等.金剛藤分散片對(duì)大鼠慢性盆腔炎的藥效學(xué)研究［J］. 中藥材，2007，30(4):449－452.