如何提升地級獸醫實驗室監測診斷技術水平

馬惠琴

（貴州畢節地區動物疫病預防控制中心，貴州畢節 551700）

獸醫實驗室作為動物疫病預防控制工作的重要技術支撐，在動物疫病預防控制，特別是重大動物疫情預防控制工作中發揮著重要作用。近年來，隨著國家動物疫病監測計劃的實施和地方動物疫病預防控制工作的科學化管理，地級獸醫實驗室發揮著越來越重要的作用。就我區而言，近年來地級獸醫實驗室承擔著農業部和省級動物疫情病原學監測和流行病學調查等各種樣品采集、動物疫病日常監測和集中監測、免疫抗體效果監測、疫病診斷、重大動物疫情的風險評估和預警預報以及所轄縣市級獸醫實驗室和疫情測報站的技術培訓和業務指導等重要任務。就如何才能有效提升地級獸醫實驗室監測診斷技術水平，筆者結合我區地級獸醫實驗室建設談幾點建議與讀者共勉。

1 我區地級獸醫實驗室基本情況

畢節地區動物疫病預防控制中心實驗室始建于上世紀80年代，屬地區獸醫防治站，以后隨著機構和體制改革以及動物防疫工作的不斷發展，歸屬畢節地區動物疫病預防控制中心，屬地級獸醫實驗室。現有PCR儀、酶標儀、超純水儀、紫外觀察儀等主要儀器設備。實驗室目前有技術人員5名，其中高級技術人員2名，中級技術人員2名，初級技術人員1名。目前能夠開展凝集試驗、沉淀試驗、瓊脂擴散等血清學試驗和進行酶標抗體檢測等現代免疫技術試驗；能進行部分細菌學檢測檢驗，開展動物疫病監測診斷工作；目前具備了分子生物學檢測檢驗能力，能開展動物疫病的分子生物學診斷工作。

2 我區獸醫實驗室建設措施

2.1 加強實驗室硬件設施建設

畢節地區地級獸醫實驗室自2000年以來，一是對實驗室用房進行了擴充和改造，新增了試驗面積；二是按照試驗要求整體規劃，合理布局，設立了血清監測室、病原檢測室、高溫洗滌室、精密儀器室等功能室；三是除項目采購儀器外，2003年以來購置了座式高壓滅菌器、酶標儀、冰箱、電子天平、臺式電動離心機、紫外觀察儀、恒溫箱、真空干燥箱、PCR儀、超純水儀等儀器設備滿足實驗工作需要；四是按照生物安全要求配備了白大褂、口罩、手套等個人防護用品。

2.2 強化實驗室內部管理

2.2.1 制定和完善實驗室管理制度和工作制度

2000年以來，實驗室制定和完善了《儀器設備使用管理制度》《實驗室檔案資料管理制度》《藥品試劑使用管理制度》《實驗室生物安全管理制度》《衛生安全制度》《樣品管理制度》《菌（毒）種管理制度》《實驗室廢棄物及污染物無害化處理制度》《血清檢測室工作制度》《病原檢測室工作制度》《高溫洗滌室工作制度》等20多種實驗室管理制度和工作制度。試驗活動嚴格按照各種制度進行，全面規范了實驗室管理工作。

2.2.2 規范工作程序

為了規范工作程序，提高工作質量，實驗室一是結合自身工作實際制定了《畢節地區動物疫控制中心實驗室質量管理手冊》和《畢節地區動物疫控制中心實驗室生物安全手冊》，將實驗室檢驗工作和生物安全管理制度化和規范化；二是統一編制了《病料采樣單》《送檢單》《樣品登記表》《監測記錄表》等10余種工作表，對實驗室工作進行嚴格記錄；三是所有儀器設備的使用嚴格按操作進行，對一些主要儀器要求制定操作規程，使用時進行登記，并填寫使用記錄。

2.2.3 嚴格實驗技術操作

為了確保實驗操作的準確性，一是實驗室新進的人員必須經過一段時間的培訓，操作熟練后才能正式上崗；二是實驗室檢測檢驗的原始記錄實行兩級審核制，即檢驗人員對檢測結果效驗簽字后，實驗室負責人還要對記錄結果進行審核簽字。對實驗室出具的報告、檢驗結果等在二級審核的基礎上實驗室分管領導還必須審核簽字，實行三級審核，確保實驗室檢驗結果的真實性和嚴肅性。

2.3 強化技術培訓

為了提高實驗室人員的技術水平，我中心先后多次派出人員到青島、上海、貴陽以及省級動物疫病預防控制中心和貴州大學動科院學習。與此同時，還邀請省級有關專家到單位進行現場培訓指導。

2.4 全面開展實驗活動，有效提升監測診斷水平

2.4.1按時完成上級下達的各項監測任務和指標

2.4.1.1 免疫抗體監測 免疫抗體監測技術是利用血清學實驗方法對疫苗免疫注射后的動物進行血清抗體效價的測定，從而掌握疫苗免疫效果和質量，以便制定科學合理的免疫程序和采取有力防控措施。在我區動物疫病監測工作中，國家實行強制免疫的口蹄疫、豬瘟、禽流感、雞新城疫四種重點動物疫病的監測工作主要以免疫抗體監測為主。近年來，為了加大監測力度，控制重大動物疫情的發生，對四種動物疫病實行日常監測和集中監測相結合，日常監測每月一次，集中監測每年春秋兩季進行。2006年以來，實驗室共進行高致病性禽流感（H5）、口蹄疫（O型、亞I型）、豬瘟、新城疫等疫病免疫抗體監測共62604份次，其中進行高致病性禽流感（H5）免疫抗體監測38456分次，進行口蹄疫免疫抗體監測15780分次，進行豬瘟免疫抗體監測4344分次，進行雞新城疫免疫抗體監測4024分次。

2.4.1.2 病原學和陽性病例監測 病原學監測是采用現代先進診斷技術（如RT-PCR技術）對樣品進行病原學檢測，是一種準確快速的診斷方法，如口蹄疫、禽流感病原學監測。而陽性病例監測則可能采用血清學診斷技術進行，如布魯氏菌病、馬傳貧、炭疽、雞馬立克氏等疫病的陽性病例監測。我區監測工作是以四大動物疫病免疫抗體監測為重點，保證動物機體免疫能力的同時，豬雞鼻腔氣管拭子、禽類糞便、牛腦、羊腦等病原學監測樣品送省動物疫病預防控制中心進行病原學檢測，另一方面利用平板凝集試驗、瓊脂擴散試驗、結核菌素皮內注射變態反應試驗、鼻疽菌素點眼、滴鼻變態反應試驗等技術對布魯氏菌病、馬傳貧、炭疽、雞馬立克氏、奶牛結核、馬鼻疽等10余種疫病進行的陽性病例監測。2006年以來，實驗室共完成各種高致病性豬藍耳病、瘋牛病等病原學樣品采樣1255份，完成牛結核、布病等陽性病例監測5200份次。

2.4.2 對重點區域進行免疫效果抽樣調查

為了掌握全區春秋集中免疫工作效果，實驗室結合我區實際，配合春秋防督察，每年春秋兩季對規模場、養殖小區和重點區域的散養戶牲畜的進行口蹄疫、禽流感、豬瘟和新城疫等四種動物疫病免疫效果抽樣調查。2010年我中心在9個縣（市、區）32個鄉鎮隨機抽取了養殖場和散養戶畜禽血清樣品共609份，進行了禽流感、口蹄疫、豬瘟和新城疫免疫抗體監測共1108份次。

2.4.3 開展規模養殖場動物疫病定點監測和流行病學調查

為了準確掌握動物疫病流行態勢，控制動物疫病的發生和流行，近年來，實驗室在一些規模養殖場開展了動物疫病定點監測。同時開展轄區內流行病學調查，進行實驗室檢測檢驗。

2.4.4 開展部分動物疫病的診斷工作

在完成以上血清學監測工作的同時，實驗室根據生產需要，利用現有實驗條件，結合流行病學調查、臨床診斷和病理剖解診斷開展部分動物疫病的實驗室診斷服務，為生產實際解決技術難題。

3 我區獸醫實驗室工作取得的成效

近年來，通過實驗室工作的開展，一是有力促進了我區動物強免工作，確保了免疫密度和免疫效果，提高了動物的免疫力，保障了我區動物疫情的有效防控，控制了疫情的發生。二是通過疫病監測對我區重大動物疫情進行風險評估和預警預報，掌握疫情主動權，提高了對重大動物疫情的應急反應和處置能力。三是疫病監測和診斷工作為我區養殖項目和養殖場戶提供技術支持，在一定程度上解決了生產實際中的技術難題。四是作為地級獸醫實驗室為縣級實驗室培訓了人才，發揮了技術指導和帶動作用，使地縣實驗室工作都上了新臺階。2011年6月，我區地級獸醫實驗室將首批迎接全省地縣級獸醫系統實驗室考核認證工作。

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