紅毛七化學成分的研究

但飛君， 蔡正軍， 田 瑛， 郭志勇， 褚立軍

(1.三峽大學天然產物研究與利用湖北省重點實驗室湖北宜昌 443002;2.軍事醫學科學院放射與輻射醫學研究所北京 100085)

紅毛七Caulophyllum robustumMaxim.為小檗科紅毛七屬植物類葉牡丹的根及根莖［1－2］。《中藥大辭典》中記載其性溫，味苦辛，具有理氣止痛、祛風活血的功效，在民間主要用于風濕疼痛、胃腹疼痛、跌打損傷、月經不調等病的治療［2－5］。近年研究表明，紅毛七具有抑菌、抗炎、鎮痛、抗腫瘤、抗真菌、利尿降壓、抗病毒、抗心肌缺血、抗動脈粥樣硬化、驅蟲、殺軟體動物、止癢、抗誘變、抗糖尿病、止痙攣、抗雄激素等作用。臨床主要用于風濕性關節炎、跌打損傷、月經不調、痛經、腹痛、引產、胃腹疼痛、胃病、軟組織損傷、痛風等的治療［6－8］。作者對其化學成分進行研究，分離得到7個化合物，經鑒定其結構分別為:刺囊酸－α-L－吡喃阿拉伯糖苷(1)、常春藤皂苷元－3－O-α-L－阿拉伯吡喃糖苷(2)、葳嚴仙皂苷元－3－O-α-L－阿拉伯吡喃糖苷(3)、常春藤皂苷元－3－O-β-D－葡萄吡喃－(1→2)－α-L－阿拉伯吡喃糖苷(4)、β－豆甾醇(5)、羽扇豆醇(6)、膽甾醇(7)。化合物1為首次從本屬植物中分離得到，化合物5，6，7為首次從紅毛七中分離得到。

1 材料

Bruker AVANCE 400 MHz核磁共振波譜儀;Finnigin電噴霧質譜儀;低溫冷凍干燥儀(LABCONCO);X－4數字顯示顯微熔點儀(溫度未校正)(北京泰克儀器有限公司);AL204電子天平(METTLWR TOLEDO);柱層析硅膠、薄層層析硅膠(青島海洋化工廠);凝膠 Sephadex LH－20(北京歐亞新技術公司)。

藥材紅毛七于2007年7月采自湖北宜昌市長陽土家族自治縣，經三峽大學生物技術研究中心王玉兵老師鑒定為小檗科紅毛七屬植物紅毛七Caulophyllum robustumMaxim.的根，植物標本保存于三峽大學天然產物研究與利用湖北省重點實驗室。

2 提取分離

紅毛七干燥粉末3.6 kg，95%乙醇回流提取3次，每次2 h，減壓濃縮得浸膏1 347.8 g。浸膏以1∶1懸浮于水中，依次用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，減壓回收溶劑，得石油醚萃取物50.3 g、三氯甲烷萃取物 29.8 g、乙酸乙酯萃取物33.2 g、正丁醇萃取物 489.4 g、水溶液浸膏 350.2 g。正丁醇萃取物(225 g)經硅膠柱層析，三氯甲烷－甲醇(10 ∶1→5 ∶1)，三氯甲烷－甲醇－水(4 ∶1 ∶0.1→1 ∶1 ∶0.3)梯度洗脫，合并含有化合物 1、2、3、4的流分。經反復硅膠柱層析和Sephadex LH－20柱層析得到化合物1(752.1 mg)、化合物2(152.1 mg)、化合物3(269.3 mg)、化合物 4(1586.1 mg)。乙酸乙酯萃取物(29.8 g)經硅膠柱層析，石油醚－乙酸乙酯(50∶1→1∶1)，三氯甲烷－甲醇(20∶1→1∶2)，合并含有化合物5、6、7的流分。經反復硅膠柱層析和重結晶，得化合物5(65.4 mg)、化合物6(57.6 mg)、化合物7(583.9 mg)。

3 結構鑒定

化合物1 白色粉末，Liebermann－burchard和Molish反應均呈陽性，經薄層酸水解，僅檢出L－阿拉伯糖，可能為三萜皂苷。正性ESI－MS在m/z627.3可見［M+Na］+離子峰，負性 ESI－MS 在m/z603.2可見［M－H］+離子峰，確定相對分子質量為604。綜合1H－NMR、13C－NMR、ESI－MS 等數據推斷化合物的分子式為 C35H56O8。1H－NMR(MeOD)δ:5.33(1H，s，H－12)，5.23(1H，s，H－16)，4.94(1H，d，J=5.6 Hz，H－1′)，3.61(1H，dd，J1=4.4Hz，J2=13.7Hz，H－18)，1.82(3H，s，H－27)，1.19(3H，s，H－23)，1.17(3H，s，H－30)，1.05(3H，s，H－29)，1.02(3H，s，H－24)，1.00(3H，s，H－26)，0.86(3H，s，H－25);13CNMR(MeOH)δ:38.9(C－1)，26.5(C－2)，88.5(C－3)，39.6(C－4)，55.6(C－5)，18.5(C－6)，33.5(C－7)，39.9(C－8)，47.2(C－9)，37.0(C－10)，23.8(C－11)，125.1(C－12)，146.7(C－13)，42.1(C－14)，36.3(C－15)，75.1(C－16)，48.0(C－17)，41.3(C－18)，47.9(C－19)，31.8(C－20)，36.3(C－21)，32.9(C－22)，28.2(C－23)，17.9(C－24)，18.7(C－25)，19.4(C－26)，27.3(C－27)，182.8(C－28)，33.4(C－29)，24.6(C－30)，108.9(C－1′)，73.9(C－2′)，74.5(C－3′)，68.2(C－4′)，64.2(C－5′)。以上數據經與文獻［9］報道的刺囊酸－α－L－吡喃阿拉伯糖苷波譜數據比較一致，故鑒定化合物1為刺囊酸－α－L－吡喃阿拉伯糖苷。

化合物2 白色粉末，Liebermann－burchard和Molish反應均為陽性，經薄層酸水解，檢出L－阿拉伯糖和D－葡萄糖，可能為三萜皂苷。正性ESI－MS在m/z789.4 可見［M+Na］+離子峰，負性 ESI－MS 在m/z765.3可見［M－H］+離子峰，確定相對分子質量為766。綜合1H－NMR、13C－NMR 等數據可推斷出化合物的分子式為 C41H66O13。1H－NMR(MeOD)δ:5.38(1H，s，H－12)，5.21(1H，d，J=7.2Hz，H－1′′)，5.19(1H，d，J=5.6Hz，H－1′)，3.30(1H，dd，J1=3.6 Hz，J2=13.2Hz，H－18)，1.12(3H，s，H－27)，0.92(3H，s，H－26)，0.88(3H，s，H－30)，0.85(3H，s，H－29)，0.76(3H，s，H－25)，0.66(3H，s，H－24);13CNMR(MeOH)δ:38.7(C－1)，26.1(C－2)，82.2(C－3)，43.5(C－4)，47.9(C－5)，18.5(C－6)，33.2(C－7)，39.8(C－8)，48.5(C－9)，36.9(C－10)，23.8(C－11)，122.9(C－12)，144.8(C－13)，42.2(C－14)，28.4(C－15)，23.6(C－16)，46.6(C－17)，41.9(C－18)，46.4(C－19)，30.9(C－20)，34.2(C－21)，32.9(C－22)，64.9(C－23)，13.4(C－24)，16.1(C－25)，17.4(C－26)，26.1(C－27)，180.2(C－28)，33.2(C－29)，23.7(C－30)，105.2(C－1′)，74.5(C－2′)，73.7(C－3′)，68.3(C－4′)，65.1(C－5′)，106.0(C－1′′)，76.3(C－2′′)，78.3(C－3′′)，71.4(C－4′′)，78.2(C－5′′)，62.5(C－6′′)。以上數據經與文獻［10］報道的常春藤皂苷元－3－O-β-D－葡萄吡喃－(1→2)－α-L－阿拉伯吡喃糖苷波譜數據比較，故鑒定化合物2為常春藤皂苷元－3－O-β-D－葡萄吡喃－(1→2)－α-L－阿拉伯吡喃糖苷。

化合物3 白色粉末，Liebermann－burchard和Molish反應均呈陽性，經薄層酸水解，僅檢出L－阿拉伯糖，可能為三萜皂苷。正性ESI－MS在m/z627.3可見［M+Na］+離子峰，負性 ESI－MS 在m/z603.2可見［M－H］+離子峰，確定相對分子質量為604。綜合1H－NMR、13C－NMR和 DEPT 等數據推斷出化合物的分子式為 C35H56O8。1H－NMR(MeOD)δ:5.42(1H，s，H－12)，4.99(1H，d，J=7.2Hz，H－1′)，3.28(1H，dd，J1=3.6Hz，J2=13.2Hz，H－18)，1.24(3H，s，H－27)，1.03(3H，s，H－26)，1.01(3H，s，H－30)，0.95(3H，s，H－25)，0.94(3H，s，H－29)，0.93(3H，s，H－24);13C－NMR(MeOH)δ:39.0(C－1)，26.4(C－2)，83.2(C－3)，43.7(C－4)，47.8(C－5)，18.4(C－6)，33.1(C－7)，39.9(C－8)，48.4(C－9)，37.2(C－10)，24.1(C－11)，123.5(C－12)，145.3(C－13)，42.4(C－14)，28.6(C－15)，23.9(C－16)，46.8(C－17)，42.2(C－18)，46.6(C－19)，31.2(C－20)，34.4(C－21)，33.1(C－22)，64.7(C－23)，13.4(C－24)，16.4(C－25)，17.8(C－26)，26.4(C－27)，182.1(C－28)，33.5(C－29)，24.0(C－30)，106.3(C－1′)，72.9(C－2′)，74.5(C－3′)，69.7(C－4′)，66.8(C－5′)。以上數據經與文獻［11］報道的常春藤皂苷元－3－O－α-L－阿拉伯吡喃糖苷波譜數據比較一致，故鑒定化合物3為常春藤皂苷元－3－O－α-L－阿拉伯吡喃糖苷。

化合物4 白色粉末，Liebermann－burchard和Molish反應均呈陽性，經薄層酸水解，僅檢出L－阿拉伯糖，可能為三萜皂苷。正性ESI－MS在m/z643.4可見［M+Na］+離子峰，負性 ESI－MS 在m/z619.2可見［M－H］+離子峰，確定相對分子質量為620。綜合1H－NMR、13C－NMR和DEPT等數據推斷化合物的分子式為 C35H56O9。1H－NMR(MeOD)δ:5.45(1H，s，H－12)，5.24(1H，s，H－16)，4.79(1H，d，J=6.8 Hz，H－1′)，3.62(1H，dd，J1=3.2Hz，J2=10.4Hz，H－18)，1.33(3H，s，H－27)，0.95(3H，s，H－30)，0.92(3H，s，H－29)，0.81(3H，s，H－26)，0.73(3H，s，H－25)，0.65(3H，s，H－24)，13C－NMR(MeOH)δ:38.8(C－1)，26.1(C－2)，83.3(C－3)，43.4(C－4)，47.6(C－5)，18.2(C－6)，33.1(C－7)，39.9(C－8)，47.2(C－9)，36.9(C－10)，24.9(C－11)，123.3(C－12)，145.1(C－13)，42.1(C－14)，36.2(C－15)，75.2(C－16)，48.7(C－17)，41.3(C－18)，47.5(C－19)，30.9(C－20)，36.2(C－21)，32.6(C－22)，64.9(C－23)，13.4(C－24)，16.5(C－25)，17.8(C－26)，27.6(C－27)，181.1(C－28)，33.2(C－29)，24.4(C－30)，106.3(C－1′)，72.6(C－2′)，74.9(C－3′)，69.4(C－4′)，65.9(C－5′)。以上數據經與文獻［12］報道的葳嚴仙皂苷元－3－O－α-L－阿拉伯吡喃糖苷波譜數據比較，故鑒定化合物 4 為葳嚴仙皂苷元－3－O－α－L－阿拉伯吡喃糖苷。

化合物5 白色晶體，熔點147～149℃，Liehermann－Burcharcl反應呈陽性，Molish反應呈陰性，可能為三萜或甾體類化合物。EI－MS在m/z386可見分子離子峰［M］+，綜合1H－NMR、13C－NMR 等數據推斷出化合物的分子式為C27H46O。1H－NMR譜中，在 δ 0.68，0.83，0.87，0.95 和1.03 處出現5 個甲基信號峰，同時在δ5.33處有一個三重峰的烯質子信號，δ3.51處有1個連氧的次甲基氫質子信號。將化合物的氫譜、碳譜數據與文獻［14］中膽甾醇的波譜數據進行比較，發現兩者基本一致。進行薄層色譜對照，發現Rf值一致，故確定該化合物為膽甾醇。

化合物6 白色針狀晶體，熔點133～136℃，Liehermann－Burcharcl反應呈陽性，Molish 反應呈陰性，可能為三萜或甾體類化合物。綜合1H－NMR、13C－NMR、質譜等數據推斷出化合物的分子式為C29H48O。1H－NMR 中，在 δ 0.55，0.80，0.80，0.82，0.85和1.03處出現6個甲基信號峰，其中兩組單峰，三組兩重峰和一組三重峰，同時在δ5.03處可見一個三重峰的烯質子信號，在δ5.18(1H，dd，J=8.2)和δ 5.16(1H，dd，J=8.2)處有一對烯氫質子，δ 3.62處有1個連氧的次甲基氫質子信號。14CNMR 中，δ 117.4 和 139.5，129.4 和 138.1 處也出現兩對烯碳信號。將化合物的氫譜、碳譜數據與文獻［14］中β－豆甾醇的波譜數據進行比較，發現兩者基本一致。進行薄層色譜對照，發現Rf值一致，故確定該化合物為β－豆甾醇。

化合物7 白色針狀晶體，熔點176～178℃，Liehermann－Burcharcl反應呈陽性，Molish 反應呈陰性，可能為三萜或甾體類化合物。綜合1H－NMR、13C－NMR、質譜等數據可推斷出化合物的分子式為C30H50O。1H－NMR 中，在 δ 0.73，0.79，0.83，0.95，097，1.03和1.68處出現7個甲基單峰信號峰，同時在 δ 4.57，4.69 處可見有一對的烯質子信號，δ 3.17處有1個連氧的次甲基氫質子信號。13C－NMR中，δ 109.6和150.9處也出現一對烯碳信號。將化合物的氫譜、碳譜數據與文獻［15］中羽扇豆醇的波譜數據進行比較，發現兩者基本一致。進行薄層色譜對照，發現Rf值一致，故確定該化合物為羽扇豆醇。

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