嗎替麥考酚酯對(duì)重型顱腦損傷兔血清ABAb水平的影響

李志濤,閆 華,薛 靜,劉 暌,只達(dá)石

(天津市環(huán)湖醫(yī)院,天津 300060)

研究證明,顱腦損傷后免疫功能會(huì)受到不同程度的影響[1,2]。抗腦抗體(ABAb)是由免疫系統(tǒng)針對(duì)腦組織抗原產(chǎn)生的自身抗體。2009年 11月 ～2010年 5月,我們觀察了嗎替麥考酚酯(MMF)對(duì)重型顱腦損傷大白兔血清ABAb水平的影響,并探討其意義。

1 材料與方法

1.1 材料 健康、成年新西蘭大白兔16只,雌雄不限,體質(zhì)量(2.5±0.1)kg;20%氨基甲酸乙酯, MMF,兔ABAb試劑盒,動(dòng)物立體定位頭架(DY-1型),電動(dòng)磨鉆,液壓沖擊裝置。

1.2 造模與分組 經(jīng)耳緣靜脈注入超濾的 20%氨基甲酸乙酯生理鹽水溶液 15～20 ml,動(dòng)物麻醉后,俯臥位固定于動(dòng)物立體定位頭架,保持頂骨左右位水平、前后位切線水平,采用液壓打擊法建立重癥顱腦損傷模型[3]。造模成功后隨即分為觀察組和對(duì)照組,各 8只。觀察組經(jīng)胃管注入嗎替麥考酚酯 1 mg/kg、1次/d,連用3周;對(duì)照組經(jīng)胃管注入等量生理鹽水,待其復(fù)蘇后放回籠內(nèi)飼養(yǎng)。

1.3 兔血清ABAb檢測(cè)方法 兩組分別于造模前2 d及造模后3、7、14、21、28 d耳緣靜脈取血 4 ml,分離血清,-20℃保存。采用ELISA法檢測(cè)血清中的ABAb,按試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS11.5軟件。組間比較采用t檢驗(yàn)。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

兩組大白兔各時(shí)點(diǎn)血清ABAb水平比較見(jiàn)表1。觀察組造模后7 d達(dá)峰值(9.1 ng/ml),對(duì)照組造模后3 d達(dá)峰值(13.6 ng/ml)。兩組比較,P＜0.05。

表1 兩組大白兔各時(shí)點(diǎn)血清中ABAb水平比較(±s)

表1 兩組大白兔各時(shí)點(diǎn)血清中ABAb水平比較(±s)

注:與傷前2 d比較,＊P＜0.05;與對(duì)照組比較,#P＜0.05

組別ABAb(ng/ml)前2 d傷后3 d 7 d 14 d 21 d 28 d觀察組 10.0±3.2 7.1±1.8＊# 9.1±2.9＊# 5.5±1.4＊# 4.6±0.3＊# 4.2±0.5＊#對(duì)照組 10.0±3.2 13.6±0.2＊ 13.4±1.5＊ 12.1±0.3＊ 11.8±0.7＊ 11.5±1.5＊

3 討論

正常人血清ABAb濃度較低,機(jī)體不出現(xiàn)異常改變。ABAB的產(chǎn)生有以下途徑:①各種中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病使腦組織及血腦屏障遭到破壞,腦組織抗原進(jìn)入血循環(huán),暴露于機(jī)體免疫系統(tǒng),即可成為異常抗原而啟動(dòng)免疫反應(yīng),產(chǎn)生 ABAb[4]。②呼吸道及消化道黏膜表面sIgA缺陷,使機(jī)體局部抗體的屏障作用減弱或消失,外界大量的異種蛋白有可能未經(jīng)處理而進(jìn)入機(jī)體,此時(shí)導(dǎo)致機(jī)體的自身免疫反應(yīng)啟動(dòng),產(chǎn)生ABAb[5]。③A組 β溶血性鏈球菌感染導(dǎo)致機(jī)體自身免疫反應(yīng)啟動(dòng),產(chǎn)生ABAb[6]。

本實(shí)驗(yàn)證實(shí),顱腦損傷后大白兔血清中ABAb水平明顯升高,增高的ABAb可通過(guò)已經(jīng)破壞的血腦屏障攻擊腦組織,從而形成顱腦損傷后的自身免疫病。其可能的損傷機(jī)制有以下幾點(diǎn):①腦脊液和血液中的ABAb可能與腦組織細(xì)胞上的自身抗原結(jié)合,形成免疫復(fù)合物后激活補(bǔ)體。補(bǔ)體活性片段可引起炎癥細(xì)胞趨化、血管通透性增高、及局部充血、水腫[7]。②ABAb可能參與腦組織的自身免疫過(guò)程,并使腦組織受到免疫性損傷;從而導(dǎo)致神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞或神經(jīng)元釋放S100b蛋白增加,刺激自身和小膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生大量致炎因子和 NO,導(dǎo)致神經(jīng)元功能障礙或死亡[7]。③ABAb可能參與腦組織的自身免疫過(guò)程,并使腦組織外傷后炎性反應(yīng)加重,產(chǎn)生大量炎癥因子,其中的TNF、IL-2、IL-6可促進(jìn)腦細(xì)胞凋亡。④ABAb可刺激小膠質(zhì)細(xì)胞過(guò)表達(dá)IL-1。IL-1可促進(jìn)谷氨酸(興奮性神經(jīng)遞質(zhì))表達(dá),同時(shí)抑制γ-氨基丁酸(抑制性神經(jīng)遞質(zhì))表達(dá),從而誘發(fā)癲癇。

MMF是一種選擇性抑制T、B淋巴細(xì)胞增生的新型免疫抑制劑,具有較獨(dú)特的免疫抑制效應(yīng),是次黃嘌呤單核苷酸脫氧酶非競(jìng)爭(zhēng)性、選擇性和可逆性的抑制劑,在體內(nèi)代謝成霉酚酸(MPA)。MPA抑制鳥(niǎo)嘌呤從頭合成途徑的限速酶次黃嘌呤單核苷酸脫氫酶(IMP-DH)的活性,阻斷鳥(niǎo)嘌呤核苷酸的從頭合成,使鳥(niǎo)嘌呤核苷酸耗竭,進(jìn)而阻斷DNA合成[8]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,免疫抑制治療MMF能有效延緩顱腦損傷后大白兔血清中ABAb升高的時(shí)間,并能有效降低血清中ABAb水平。其可能機(jī)制為:①M(fèi)MF不但可以抑制T、B淋巴細(xì)胞因受有絲分裂原和同種異體抗原刺激所引起的增生,而且可抑制淋巴細(xì)胞活化抗原的表達(dá),誘導(dǎo)其凋亡;還通過(guò)消耗鳥(niǎo)嘌呤核苷,抑制糖基化作用和一些黏附分子的表達(dá),減少淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞的再循環(huán)[9],可抑制 B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體,從而在一定程度上抑制ABAb的產(chǎn)生。②體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明,MMF除顯著減少細(xì)胞浸潤(rùn)及免疫復(fù)合物沉積外,還能強(qiáng)烈抑制細(xì)胞黏附分子的合成、表達(dá),具有較強(qiáng)的抗炎作用。傷后給予MMF治療,可完全抑制腦組織傷灶中炎癥介質(zhì)IL-6的產(chǎn)生,減少自由基生成,從而減輕凋亡腦細(xì)胞對(duì)腦組織及免疫系統(tǒng)的刺激,最終減少ABAb產(chǎn)生。

綜上所述,在顱腦損傷的早期應(yīng)用免疫抑制治療,可減少ABAb的產(chǎn)生,從而減輕其對(duì)自身腦組織的攻擊作用,延緩病情惡化,為臨床救治重型顱腦損傷患者爭(zhēng)取時(shí)間。

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