野菊花注射液玻璃體內注射對兔缺血再灌注損傷視網膜中SOD、MDA水平的影響

張永利,張鐵華,馮桂玲

(1唐山市協和醫院,河北唐山 063000;2玉田縣人民醫院;3唐山市職業技術學院)

視網膜缺血再灌注損傷在臨床上廣泛存在,而有效治療措施很少[1～5]。野菊花具有良好的抗氧化作用。2009年 1～9月,我們觀察了野菊花注射液對兔缺血再灌注損傷視網膜中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平的影響,旨在探討其對缺血再灌注損傷視網膜的保護作用。

1 材料與方法

1.1 材料 純種大耳白兔54只,健康雄性,體質量(3.0±0.2)kg;野菊花注射液;超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)檢測試劑盒;722S分光光度計,可調高速勻漿機,高速冷凍離心機等。

1.2 分組與造模 將54只兔隨機分為A組6只及B、C組各 24只,A組不予處理,B、C組通過升高眼內壓造成視網膜缺血后,再恢復正常眼內壓制作成兔視網膜缺血再灌注損傷動物模型[1],B、C組分別于玻璃體內注射平衡鹽溶液和野菊花注射液各 0.1 m l。

1.3 視網膜中SOD、MDA檢測方法 分別于治療后 1、6、24、72 h處死動物,取出視網膜,制成勻漿,采用生化法檢測SOD活性及MDA水平,嚴格按試劑盒說明書操作。

1.4 統計學方法 采用SPSS13.0軟件。所得數據以±s表示,組間比較采用t檢驗,同組不同時間點數據比較采用方差分析。P≤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

各組兔視網膜中SOD活性及MDA水平比較,見表 1。由表 1可見,與 A組比較,B組視網膜中MDA升高,隨后逐漸下降;SOD活性降低,隨后逐漸增強,到72 h均恢復至正常范圍。C組SOD活性及MDA水平變化趨勢同B組,但與B組比較,P均＜0.05。

表1 各組各時點視網膜中SOD活性、M DA水平比較(μmol/m g prot,±s)

表1 各組各時點視網膜中SOD活性、M DA水平比較(μmol/m g prot,±s)

注:與A組比較,＊P＜0.05;與B組比較,#P＜0.05

組別 MDA 1 h 6 h 24 h 72 h SOD 1 h 6 h 24 h 72 h A組 6.51±1.05 — — — 222.06±15.79 — — —B組 15.10±1.33＊ 12.32±1.52＊ 9.61±1.53＊ 7.29±1.19＊ 164.58±12.76＊ 285.16±4.15＊ 240.75±17.19＊ 218.45±19.10 C組 13.13±1.22＊# 9.82±1.41＊# 8.11±1.10＊# 6.70±1.20 241.75±19.82＊#333.77±19.52＊#289.16±15.97＊#229.33±12.52

3 討論

Oz等[6～9]在實驗中發現,僅 5～10 min的缺血后再灌注即可造成視網膜細胞層的明顯凋亡。大量研究表明,缺血組織再灌注時可產生較多的氧自由基,引發生物膜中脂質過氧化,從而使生物膜遭到破壞。因此,清除氧自由基、抑制脂質過氧化反應,可消除炎癥、減輕組織缺血再灌注損傷。

水溶性野菊花,是一種良好的氧自由基清除劑,可消除缺血再灌注過程中產生的自由基,減少自由基的形成,起到保護細胞、減輕缺血再灌注對細胞的損害作用。實驗研究證明[10,11],野菊花水提液對大鼠心、腦、肝、腎體外脂質過氧化均有不同程度的抑制作用,并呈量效關系,在缺血再灌注中具有保護作用。

本實驗中,MDA是脂類過氧化反應的最終產物之一,是脂類過氧化反應的標志;SOD是機體清除超氧陰離子自由基的一種重要酶,其活性的高低間接反映了機體清除氧自由基的能力。而 MDA的高低又間接反映了機體細胞受自由基攻擊的嚴重程度。本研究結果顯示,治療組各時點 MDA水平均較損傷組低,而 SOD活性均較損傷組高,提示野菊花注射液能明顯降低脂質過氧化物的產生,提高超氧化物歧化酶的活性。野菊花注射液對視網膜缺血再灌注損傷的保護機制復雜,可能與其主要成分刺槐素和其他黃酮有關[12],具體作用有待進一步探討。

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