膠質瘤組織中NLK蛋白的表達變化及意義

李 震,于志華,崔 崗

(蘇州大學附屬第一醫院,江蘇蘇州 215006)

神經白細胞素(NLK)是一種促分裂原活化蛋白激酶類似性的激酶,其對神經的形成和維持起重要作用[1,2]。2000年 1月 ～2009年 12月,我們觀察了觀察膠質瘤組織中NLK蛋白的表達變化,并探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 膠質瘤70例,男 39例,女 31例;年齡 17～79歲,平均 40.3歲;腫瘤位于額葉26例,頂葉 6例,枕葉 3例,顳葉 15例,不確定 20例;腫瘤直徑＜4 cm 36例,≥4 cm 34例;腫瘤組織分級(WHO,2007年)Ⅱ級34例,Ⅲ級24例,Ⅳ級12例;患者術前均未行放化療,于 2000年 1月 ～2006年12月行手術切除,并留取膠質瘤組織。術后隨訪 3～60個月,末次隨訪時間為 2009年 12月,其間死亡28例。

1.2 NLK蛋白檢測方法 采用免疫組化SP法,實驗步驟按說明書進行。NLK陽性細胞為細胞質或細胞核中含有棕黃色顆粒的腫瘤細胞。高倍鏡下對每張切片隨機選擇 5個視野,計算每張切片陽性細胞百分比,取均值;陽性細胞≥10%為陽性。將陽性細胞數≥30.2%判為高表達,＜30.2%判為低表達。

1.3 統計學方法 采用SPSS13.0統計軟件。率的比較采用Fisher檢驗,生存分析采用Kaplan-Meier方法。P≤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

本組中65例NLK蛋白表達陽性,其中高表達39例,低表達 26例。NLK蛋白高表達與膠質瘤臨床病理參數的關系見表1,由表可見,NLK蛋白高表達與膠質瘤組織分級有關(P＜0.01)。

表1 NLK蛋白表達與膠質瘤臨床病理參數的關系

3 討論

NLK是人們在研究紅鰭東水魨神經纖維瘤病1型(NF1)基因時,在其5′非編碼區發現的一個新基因,因為其與 Nemo基因類似而命名的[3]。由于NLK與促分裂原活化蛋白激酶(MAPKs)和細胞周期依賴激酶(CDKs)都有一定的同源性[4],人們對NLK在腫瘤形成中的作用在分子和細胞水平進行了大量的研究。在分子水平的研究發現,NLK能夠通過上調TAK1-NLK而對經典的Wnt/β-catenin信號通路起到抑制作用,而Wnt/β-catenin信號通路被認為在人的腫瘤形成中起到重要作用,這就說明NLK可能是一種抑癌分子。在乳腺癌和結腸癌細胞株中的研究表明其能夠通過誘導腫瘤細胞的凋亡而起到抗腫瘤作用。另有研究表明,NLK在乳腺癌組織中是抑癌基因,可以通過抑制Wnt/β-catenin信號通路,發揮抑制腫瘤發生發展的作用[5]。

惡性膠質瘤是一種高侵襲性、生長迅速的腫瘤,其預后很差[6]。研究表明,對低級別的惡性膠質瘤患者經過正規的手術及放化療,能夠明顯改善預后[7]。因此,在膠質瘤的治療中,尋找能一種夠預測患者預后的指標十分重要[8]。我們采用免疫組化法檢測了70例膠質瘤組織中的NLK。結果顯示,本組陽性率為92.9%;而且,NLK蛋白高表達與膠質瘤組織分級有關(P＜0.01),與年齡、性別、KPS評分、腫瘤位置、腫瘤直徑、壞死等都無明顯相關性,提示NLK和膠質瘤的惡性程度相關,有可能作為預測惡性膠質瘤患者預后的一個新的指標。然而,惡性膠質瘤的形成過程十分復雜,但我們可以肯定NLK在這一過程中起到了重要作用,但具體機制尚有待進一步研究。

[1]Harada H,Yoshida S,Nobe Y.Genom ic structure of the human NLK (nemo-like kinase)geneand analysis of its promoter region[J]. Gene,2002,285(1-2):175-182.

[2]Ishitani T,Ishitani S.Nemo-Like kinase is involved in NGF-induced neurite outgrowth via phosphorylating MAP1B and paxillin[J].J Neurochem,2009,10(5):1471-4159.

[3]Thorpe CJ,Moon RT.Nemo-like kinase isan essential coactivator of Wnt signaling during early zebrafish development[J].Development, 2004,131(12):2899-2909.

[4]Ishitani T,Ninom iya-Tsuji J,Nagai SM.The TAK 1-NLK-MAPK-related pathway antagonizes signalling between beta-catenin and transcription factor TCF[J].Nature,1999,399(6738):798-802.

[5]Ishitani T,Kishida S,Hyodo-Miura J.The TAK 1-NLK mitogen-activated protein kinase cascade functions in theWnt-5a/Ca2+pathway to antagonizeWnt/beta-catenin signaling[J].Cell Biol,2003,23 (1):131-139.

[6]Kirla RM,Haapasalo HK,Kalimo H.Low expression of p27 indicates a poor prognosis in patients with high-grade astrocytomas[J]. Cancer,2003,97(3):644-648.

[7]劉泰福.腫瘤放射治療學[M].上海:復旦大學出版社,2001:475.

[8]BerensME,RiefMD,Loo MA.The roleofextracellularmatrix in human astrocytoma m igration and proliferation studied in a microliter scale assay[J].Metastasis,1994,12(6):405-415.