厚樸有效成分最優提取方案的建立

楊杰

厚樸為木蘭科植物厚樸或凹葉厚樸的干燥干皮、根皮及枝皮。文獻報道，主要化學成分厚樸酚與和厚樸酚中樞松弛和光譜抗菌作用［1］。本實驗運用反相高效液相色譜法測定厚樸提取液中厚樸酚與和厚樸酚的含量［1］，為最大程度提取厚樸中的有效成分提供了實驗依據。

1 實驗材料與方法

1.1 儀器與藥品 1100型高效液相色譜儀(美國Agilent);紫外檢測器;電子天平(上海方瑞儀器有限公司);JP300G型超聲提取儀(武漢嘉鵬電子有限公司)。厚樸酚(對照品，中國藥品生物制品檢定所，批號:0729-200107)、和厚樸酚(對照品，中國藥品生物制品檢定所，批號:0730-9204)，甲醇(色譜純，天津市西華特種試劑廠)。

1.2 實驗方法

1.2.1 提取條件:①提取溶劑:取同一批號樣品4.0 g，分別用超聲提取和熱浸回流法提取相同的時間，提取液用高效液相色譜法測定峰面積。分別用純水、30%甲醇、50%甲醇、70%甲醇和100%甲醇用最佳提取方式提取相同時間，提取液用液相法測定峰面積，確定出最佳提取溶劑濃度。②提取時間:取同一批號樣品4.0 g，用最佳提取方式和最佳提取溶劑分別提取30、40、50、60 min，提取液用液相法測定峰面積，確定出最佳提取時間。

1.2.2 線性關系:精密稱取對照品厚樸酚及和厚樸酚各4.8、4.0 mg，分別置10 m l量瓶中，甲醇溶解并補至刻度線混勻，分別吸取此溶液 0.125、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0 ml置10 ml量瓶中，甲醇溶解并補至刻度線混勻，分別精密吸取原液及稀釋液各10μl，用液相法測定峰面積。以峰面積積分值為縱坐標，濃度為橫坐標，進行回歸。

1.2.3 精密度:精密吸取厚樸酚、和厚樸酚對照品溶液(濃度分別為35.84、34.36μg/m l)10.0μl，重復進樣6次，按上述色譜條件測定厚樸酚、和厚樸酚峰面積。厚樸酚RSD=1.34%，和厚樸酚RSD=1.24%。

1.2.4 穩定性:精密稱取同一批號下的樣品4.0 g，置50 ml容量瓶中，加入甲醇，超聲處理50 min，放冷，定容，搖勻，過濾，即得。每隔2 h進樣1次。

1.2.5 回收率:取同一批樣品6份，分為2組，按高、低2種劑量，分別加入50 ml不同濃度的厚樸酚及和厚樸酚對照品甲醇溶液，按照樣本制備方法制備待測液，測定并計算回收率。

2 結果

2.1 提取條件的選擇 最佳提取方式為超聲提取，溶劑為100%甲醇，時間50 min。

2.2 線性關系 厚樸酚:回歸方程為Y=8 109.6X+16 033，r=0.9998，和厚樸酚:Y=9412.1X-11 900，r=0.9990。厚樸酚在6.000～480μg/ml，和厚樸酚在5.00～400μg/ml與峰面積呈良好線性關系。

2.3 精密度和穩定性 厚樸酚RSD=1.34%，和厚樸酚RSD=1.24%，精密度較好，方法可行。和厚樸酚與厚樸酚峰面積RSD分別為1.45%和1.06%，表明提取物測定液中厚樸酚、和厚樸酚在12 h內穩定，重復性好。

2.4 加樣回收率 厚樸酚平均回收率為100.2%，RSD=1.93%(n=6);和厚樸酚平均回收率為98.8%，RSD=1.87%(n=6)。見表1。

表1 回收率實驗測得結果 n=6

3 討論

本文采用高效液相色譜法，對提取厚樸中厚樸酚、和厚樸酚的提取條件作了篩選，分別考察精密度、重現性、穩定性和加樣回收率，得到了較好的結果，證明此法能最大程度提取厚樸中有效成分。

1 胡旭佳，郭毅新，何紅.HPLC測定順氣胃康膠囊中和厚樸酚與厚樸酚的含量.中國中藥雜志，2002，27:467-469.