大腸癌組織中CD25、CD28的表達變化及意義

鄭興斌,楊偉明,趙洪遠,劉 宙,王超宇

(遵義醫學院附屬醫院,貴州遵義 563003)

免疫系統在腫瘤的發生發展過程中起著十分重要的作用,腫瘤浸潤的免疫細胞主要有 T淋巴細胞、NK細胞、B淋巴細胞及巨噬細胞,這些細胞通過參與宿主的免疫反應與腫瘤抗原相作用,以消除腫瘤細胞或控制腫瘤生長。腫瘤浸潤淋巴細胞(TIL)與各種原發腫瘤的預后密切相關[1],CD25、CD28即是重要的TIL亞群。1990年6月～2006年 6月,我們觀察大腸癌組織中 CD25、CD28的表達變化,并探討其意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 大腸癌60例,男 31例,女 29例;年齡26～78歲,中位年齡52歲;Dukes分期A+B期31例,C+D期29例;伴有淋巴結轉移 46例,無淋巴結轉移14例;生存期≥5a者30例,≤3a者30例。患者術前均未接受其他任何治療,術中留取癌組織及癌旁正常組織標本。

1.2 CD25、CD28檢測方法 采用免疫組化Envision法。將石蠟塊切片至 4μm厚,切片脫蠟至水,雙氧水孵育10min以去除過氧化物酶,至PBS液漂洗, pH6.0檸檬酸溶液微波修復10min,PBS沖洗5 min×3次,加一抗后4℃冰箱過夜,PBS沖洗5min ×3次,滴加二抗至37℃孵育30min,PBS沖洗5 min×3次,DAB顯色,蘇木素復染,脫水,透明,最后封片。以PBS代替一抗作陰性對照,扁桃體病理切片作陽性對照。結果判定：CD25定位于細胞質和細胞膜,呈棕褐色,形成環狀,彌漫分布;CD28定位于細胞質和細胞核,呈棕褐色,形成條狀,彌漫分布。利用多功能病理圖像采集儀,400倍光鏡下觀察,選取陽性細胞表達最高的 5個視野,計算陽性細胞百分數,＜10%為陰性,＞10%為陽性。

1.3 統計學方法 采用SPSS13.0統計軟件。率的比較采用 χ2檢驗。P≤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

大腸癌組織中 CD25、CD28陽性率分別為25.0%、36.7%,癌旁正常組織分別為 55.0%、76.7%,兩者比較,P＜0.05。CD25、CD28表達與大腸癌臨床病理參數的關系見表 1。由表可見,CD25、CD28表達與大腸癌Dukes分期、淋巴結轉移及患者存活期有關(P均＜0.05)。

表 1 大腸癌浸潤淋巴細胞CD25、CD28與其臨床參數的關系

3 討論

CD25是白介素2受體(IL-2R)的α鏈,主要分布在活化 T細胞、B細胞和巨噬細胞。T細胞通過抗原提呈細胞(APC)遞呈的抗原產生活性,在T細胞膜表面表達CD25即IL-2R,并分泌產生IL-2。因此,CD25可反映活化T細胞的增殖,被認為是激活T淋巴細胞的標志[2]。T細胞的完全活化不僅需要APC表面的MHC-抗原態復合物與T細胞受體(TCR)結合并相互作用,即第一信號作用,該信號確保了免疫應答的特異性;同時,免疫應答的產生還需APC表面的共刺激分子與 T細胞相應配體結合,使T細胞具有免疫活性。其中最重要的共刺激分子為APC表面的B7-1和B7-2,他們與T細胞表面的同質二聚體 CD28分子結合[3,4],進行細胞的免疫應答,包括促進IL-2和初始T細胞分化為效應T細胞和記憶 T細胞。CD28細胞在大腸癌患者早期存在表達,但隨著腫瘤的進展,CD28的表達逐漸降低,T細胞處于無應答狀態,腫瘤抗原逃避自身免疫監視,進而產生免疫耐受使腫瘤不斷生長與轉移。

本研究發現,CD25和CD28在癌組織內的表達明顯低于癌旁正常組織,表明大腸癌組織中 CD25和CD28細胞減少,其原因可能為大腸癌中缺乏引起TIL表達的細胞因子或腫瘤細胞抗原性弱對免疫因子低表達。同時活性低下TIL不能進一步接受APC上的MHCⅡ類分子與抗原肽共刺激分子雙重信號,阻止 T細胞的活化及多種細胞因子的釋放,使抗腫瘤效應的T細胞減弱,從而不能有效地發揮抗腫瘤免疫。趙潔敏等[4,5]研究發現,隨著大腸癌 Dukes分期的增高及淋巴結轉移的發生,CD25及CD28表達相對減少;這可能是隨著腫瘤浸潤程度的加重,腫瘤局部免疫功能處于明顯抑制狀態,這對腫瘤的生長、浸潤乃至轉移有著明顯的影響。這說明 CD25和CD28細胞在防止腫瘤進展方面起著重要作用,因此,如何提高CD25和CD28在腫瘤組織中表達率有待進一步研究。

[1]MarkétaT,BohuslavM,IvaSedlákováI.PrognosticSignificanceof CD3+tumor-infiltratinglymphocytesinovariancarcinoma[J].Gynecol Oncol,2008,108(2)：415-420.

[2]OnishiS,SaibakaT,FujikawaM,etal.Adoptiveimmunotherapy withlymphokine-activatedkillercellsplusrecombinantinterleukin2 inpatientswithunresectablehepatocellularcarcinoma[J].Hepatology,1989,10(3)：349-353.

[3]MichelF,Attal-BonnefoyG,ManginoG,etal.CD28asamolecular amplifierextendingTCRligationandsignalingcapabilities[J].Immunity,2001,15(6)：935-945.

[4]傅冷西,張聲,陳思增.T細胞其刺激分子及其亞群在胃癌和大腸癌組織中表達的意義[J].中國普外基礎與臨床雜志,2008, 15(1)：51-55.

[4]趙潔敏,吳昌平.胃癌腫瘤浸潤淋巴細胞CD8+CD28+的表達及其意義[J].蘇州大學學報(醫學版),2007,27(6)：898-900.