五項診斷指標聯合檢測對糖尿病腎病的應用價值評價

張曉坤 李勰璘 古雅玨

（廣州醫學院荔灣醫院檢驗科，廣東廣州 510140）

糖尿病腎病（diabetics nephropathy，DN）是指與糖代謝異常有關的腎小球硬化癥，是糖尿病常見的嚴重微血管并發癥，是糖尿病患者死亡的重要原因之一，糖尿病腎病早期腎損傷具有可逆性，因此，及早發現糖尿病早期腎損傷，對于糖尿病腎病的預防、及時治療及改善預后十分重要。目前腎臟病的實驗室診斷多以尿蛋白，尿素氮，肌酐等作為主要檢測指標，難以及早發現早期腎損傷。近年來國外研究表明糖尿病微血管病變與高同型半胱氨酸（HCY）有關，血清胱抑素C（Cys-C）與α1-微球蛋白（α1-MG）均為評價腎小球濾過率的內源性標志物[1]，可溶性血栓調節蛋白（sTM）是反應血管內皮細胞損傷的敏感指標之一[2]，而C反應蛋白（CRP）水平與糖尿病腎病病情密切相關。本研究通過對糖尿病患者血清中HCY、Cys-C、α1-MG、sTM及CRP等五項指標的檢測，以探討聯合檢測對DN的早期診斷價值及臨床應用，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取筆者所在醫院住院的2型糖尿病患者292例，病程4～20年，診斷符合1999年WHO糖尿病診斷標準，并根據患者3個月2次24h尿蛋白排泄率（UAER）的平均水平將DN患者分為3組：（1）單純糖尿病組（SDM組，UAER＜30mg/d）95例，男56例，女39例，年齡35～72歲，平均（48.2±12.9）歲，未包括DNⅠ、Ⅱ期患者；（2）早期糖尿病腎病（早期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期）患者（EDN組，UAER 30～300mg/d）98例，男57例，女41例：年齡36～73歲，平均（49.1±13.1）歲；（3）臨床糖尿病組（CDN組，UAER＞300mg/d）99例，男52例，女47例，年齡35～74歲，平均(49.4±14.5)歲。另設健康對照組102例，男58例，女44例，年齡32～74歲，平均（45.2±15.8）歲。以上受測者均排除心血管、肝臟疾病及其他原因引起的腎臟疾病，各組在年齡、性別方面差異無統計學意義（P＞0.05），組間均衡性好，具有可比性。

1.2 標本收集

所有受試者2周前停用抗凝血、抗血小板藥物，禁食12h后采清晨空腹靜脈血3mL，同時留取24h尿（晨起8時～次日8時內）。

1.3 檢測方法

采用免疫透射比濁法測定尿微量白蛋白總量，計算UAER；采用酶轉換法檢測HCY，試劑盒由上海復星長征醫學科學有限公司提供；采用乳膠增強免疫比濁法測定Cys-C、α1-MG及CRP，試劑盒由北京利德曼生化技術有限公司提供；采用ELISA法檢測sTM，試劑盒由American diagn-ostic提供。

1.4 統計學處理

2 結果

2.1 DM患者UAER、HCY、Cys-C、α1-MG、sTM及CRP的水平變化

DM組各項指標水平明顯高于健康對照組，差異有統計學意義（P＜0.01）。見表1。

表1 DM患者五項檢測指標的變化（±s）

表1 DM患者五項檢測指標的變化（±s）

注：**P ＜0.01

檢測指標 對照組（102例） DM組（292例）UAER（mg/d） 6.32±3.13 302.42±121.69** HCY（μmol/L） 9.23±5.21 21.23±7.21** α1-MG（mg/L） 6.95±4.12 8.65±3.65** sTM （ng/mL） 4.11±0.45 7.95±1.08** Cys-C（mg/L） 0.97±0.12 23.65±1.40** CRP（mg/L） 2.13±0.82 18.32±3.12**

2.2 DN各組間血清各項指標水平變化

單因素方差分析表明，患者血清五項指標水平組間存在顯著差異（P＜0.01）。見表2。

表2 DN各組間五項檢測指標的水平變化（±s）

表2 DN各組間五項檢測指標的水平變化（±s）

注：與SDM組比較，**P＜0.01；與EDN組比較，▲P＜0.01

檢測指標 SDM組（95例） EDN組（98例） CDN組（99例）UAER（mg/d） 31.23±7.13 198.32±52.69** 412.54±102.69▲HCY（μmol/L） 12.12±4.12 21.51±6.14** 32.85±7.56▲α1-MG（mg/L） 7.25±2.97 11.12±5.68** 16.41±6.11▲sTM （ng/mL） 5.75±0.85 7.16±1.02** 9.56±1.32▲Cys-C（mg/L） 2.01±0.32 22.41±1.25** 45.58±1.42▲CRP（mg/L） 9.21±0.92 15.85±1.52** 28.42±2.65▲

2.3 五項檢測指標水平變化與UAER相關性分析

在DM組中，以五項檢測指標為應變量，以UAER為自變量，分別與UAER水平間進行相關分析，經直線相關分析顯示，血清HCY、Cys-C、α1-MG、sTM、CRP水平分別與UAER呈正相關性（r＝0.56，0.77，0.61，0.58，0.69；P＜0.05）。

2.4 糖尿病各組間五項指標

陽性率分別以HCY＞20.0μmol/L，Cys-C＞1.55mg/L，α1-MG＞7.5mg/L，sTM＞3.5ng/mL，CRP＞5.0mg/L，UAER＞8.5mg/d為陽性，各指標陽性率見表3。表3說明在DM患者的病情發展過程中，HCY、Cys-C、α1-MG、sTM、CRP最早出項，可為疾病的早期診斷提供數據，UAER異常也出項較早但陽性率低于HCY、Cys-C、α1-MG、sTM、CRP。見表3。

表3 DN各組檢測指標的陽性率[n（%）]

3 討論

DN是DM患者死亡的主要原因，據報道，DM合并腎臟病者為糖尿病主要合并癥群，并且隨著DM病程的延長，DN的發病率不斷增加，DM病史5～10年者，DN發生率為7%～10%；DM病史10～20年者，DN發生率為20%～35%；DM病史20年以上者，DN發生率幾乎達到100%[3]。若在DM并發DN早期給予積極治療，這時腎臟病尚處于可逆階段，對改善DM患者的臨床癥狀意義重大，故DN的早期診斷極其重要。

HCY是一種含硫基的氨基酸，是胱硫醚和蛋氨酸轉硫化或甲基化代謝旁路中形成的中間產物。近年來認為，高HCY血癥是DN的一個獨立危險因素[4]。HCY在血漿中能自我氧化，形成半胱氨酸混合二硫物，其與LDL發生聚集，產生活性氧（包括超氧化物、過氧化物等），促進泡沫細胞形成；與此同時活性氧，尤其是過氧化氫與自由基一起促進LDL氧化，促進血管平滑肌細胞增殖和引起血管內皮細胞損傷，最終導致微血管粥樣硬化和血栓的形成，高HCY血癥可能通過上述機制影響腎小球基底膜細胞功能，使濾過膜電荷選擇性和孔徑發生改變，導致蛋白尿，是早期腎功能受損的標志物之一[5]。

Cys-C是半胱氨酸蛋白酶抑制物超家族的成員之一，由有核細胞產生，在組織中產生的速度恒定，由于分子量小，在生理PH環境中帶正電荷，因此循環中的Cys-C可經腎小球自由濾過，并且在近曲小管中被重吸收并降解，腎臟是清除循環中Cys-C的唯一器官，所以血清Cys-C由GFR決定，受影響因素非常小，是一種理想的反映GFR變化理想的內源性標志物[6]，與α1-MG一樣能夠反映早期腎功能損害。而血栓調節蛋白（TM）是位于血管內皮細胞表面的一種蛋白多糖，其中sTM在內皮細胞受損時可釋放到血液中，是目前反映血管內皮損傷的敏感指標之一。

本研究表明，DM患者UAER、HCY、CYS-C、α1-MG、sTM及CRP等各項指標水平明顯高于健康對照組，有顯著差異（P＜0.01）；并且DN各組間血清各項指標水平變化存在顯著差異（P＜0.01），隨著DN病情的進展，血清五項指標含量明顯增高（P＜0.01），其中以CDN組患者含量最高；相關性分析發現，血清五項指標水平分別與UAER成正相關，說明各項指標與DN發生、發展密切相關；由表1、2可知，糖尿病各組間HCY水平隨腎臟損傷程度的加重而升高，DM患者血清sTM水平明顯高于正常對照組，并且隨HCY水平增加而增加，提示HCY是一種血管損傷性氨基酸，它可能通過血管內皮損傷導致糖尿病腎臟病變；表3說明在DM患者的病情發展過程中，HCY、Cys-C、α1-MG、sTM、CRP最早出項，可為疾病的早期診斷提供數據，UAER異常也出項較早但陽性率低于HCY、Cys-C、α1-MG、sTM、CRP；血清CRP水平與對照組相比明顯升高，而且其水平隨著UAER的升高而升高，與病情呈顯著正相關（P＜0.01），可作為DN患者病情檢測的新指標。

綜上所述，血清HCY、Cys-C、α1-MG水平可作為DN患者早期腎損傷的反映腎小球濾過功能的敏感指標；sTM反映高HCY水平的DN患者的微血管損傷程度；CRP與DN患者病情正相關，可作為DN患者病情檢測新指標，五者之間及與DN之間關系密切，與DN的發生、發展密切相關，聯合檢測可提高檢出敏感性及陽性率，對DN發病機制的研究及病情的判斷、監測有十分重要的意義，可從不同角度、更全面協助DN腎損傷的早期診斷及病情監測，由于上述檢測方法均能實現常規化，建議在常規糖尿病診斷及治療過程中定期聯合檢測，及早發現、及時治療，實時監測糖尿病早期腎損傷的發生、發展，對于糖尿病腎病的預防、延緩、治療和減慢疾病的進程具有重要意義。

[1] 趙英，林成芬，楊勁. 胱抑素C及α1-微球蛋白檢測對糖尿病腎病患者診斷價值的比較分析[J]. 國際檢驗醫學雜志，2010，31（9）：935-939.

[2] 智喜梅，梁奕銓，肖亦斌. 同型半胱氨酸與2型糖尿病合并腎病的關系[J].中國糖尿病雜志.2002，10（1）：18-21.

[3] 梁靜，多來提. 糖尿病腎病患者轉鐵蛋白與β-2微球蛋白和微量清蛋白的關系[J]. 檢驗醫學與臨床，2008，5（16）：971-973.

[4] 邵耀明，吳國榮，倪芳穎. 血清高半胱氨酸水平、尿微量白蛋白聯合檢測在糖尿病腎病中的臨床意義[J]. 中國血液流變學雜志，2008，18（2）：277.

[5] 陳微，胡漢寧，呂民. 血胱氨酸蛋白酶抑制劑C、同型半胱氨酸聯合檢測對2型糖尿病腎病診斷的應用價值探討[J].國際檢驗醫學雜志，2010，31（9）：913-917.

[6] 涂水良，詹愛霞. 糖尿病腎病患者血清胱抑素C及同型半胱氨酸的變化及相關性研究[J]. 實用醫學雜志，2009，25（8）：1262-1263.