楊向方 李燕廣 譚麗麗 陳建賓 丁雪梅 姬宏宇
妊娠期高血壓疾病是妊娠期特有的疾病,其病理生理變化是全身小動脈痙攣和水鈉潴留,以高血壓、蛋白尿為主要臨床表現的疾病,可造成多臟器功能損傷。嚴重影響母嬰健康[1-3]。本研究采用原位雜交法檢測Bax/Bcl-2 mRNA表達,探討甲狀腺功能減退癥(甲減)合并子癇前期胎盤Bax/Bcl-2 mRNA比值的表達趨勢。
1.1 一般資料 隨機選取正常產婦6例(正常妊娠組)、子癇前期產婦6例(子癇前期組)、甲減合并子癇前期產婦6例(甲減合并子癇前期組),3組選取年齡(27.5±2.1)歲,孕周(38±4)周;甲減的診斷及分類標準按照文獻[4]的分類標準進行確定;妊娠期高血壓疾病的診斷及分類標準按照文獻[5]的分類標準進行確定。甲減合并子癇前期產婦系孕期內檢測甲狀腺激素水平測定時查出患甲減,內分泌科給予優甲樂治療。
1.2 取材及方法 胎盤娩出后,直視下迅速取母面中央(避開鈣化灶、機化灶、出血灶)約1.0 cm ×1.0 cm×1.0 cm 小塊胎盤組織,4%多聚甲醛固定,常規石蠟包埋,4 μm厚度連續切片,每例切取相鄰2個切片,原位雜交法分別檢測Bax mRNA和Bcl-2 mRNA表達,原位雜交試劑盒購自武漢博士德生物工程有限公司。
1.3 結果判定 10×40倍光鏡觀察,Bax mRNA、Bcl-2 mRNA陽性表達呈棕黃色顆粒,主要位于胞漿內,各隨機選取10個視野計數并取平均數,計算二者平均陽性細胞數的比值。
1.4 統計學分析 應用SPSS 16.0軟件統計,采用單因素方差分析,P<0.05為差異有統計學意義。
3組Bax/Bcl-2mRNA表達水平差異有統計學意義(P<0.01)。見表 1。
表1 Bax/Bcl-2 mRNA表達水平比較n=6,
注:與正常妊娠組比較,*P<0.01;與子癇前期組比較,#P<0.01
Bax/Bcl-2 mRNA正常妊娠組組別1.227±0.049子癇前期組 1.505±0.023*甲減合并子癇前期組 1.957±0.415*#
據報道,妊娠期高血壓疾病病變核心是胎盤局部缺血缺氧,導致胎盤循環障礙,誘導細胞凋亡,最終導致妊娠期高血壓疾病[6,7]。子癇前期導致孕產婦出現嚴重并發癥的同時,對圍產兒也有嚴重的影響。因營養物質供應減少,使羊水生成減少,新生兒早產率增高[8]。有研究顯示,妊娠期高血壓疾病胎盤組織與正常妊娠者胎盤組織凋亡基因表達表達存在差異[9]。調控細胞凋亡的相關基因分為兩類:分別促進和抑制細胞凋亡。這兩類基因相互作用的結果決定了細胞的生存[10,11]。患有甲減的孕婦,其胎兒的生長、發育存在一定的影響。
Bcl-2基因家族在調控缺血缺氧誘導的胎盤細胞凋亡過程中發揮重要作用。細胞受刺激后Bax/Bcl-2 mRNA的比值越高,促使Bax-Bcl-2同源二聚體形成,促進細胞凋亡。在抗凋亡機制中,Bax/Bcl-2 mRNA比值決定著細胞在受到凋亡刺激信號后是凋亡還是生存[12]。
本研究采用原位雜交檢測方法對胎盤組織中Bcl-2 mRNA和Bax mRNA的表達進行了觀察。結果顯示,甲減合并子癇前期組胎盤組織中Bax/Bcl-2 mRNA表達增高,高于子癇前期組及正常孕婦組,差異有統計學意義(P<0.01)。妊娠期高血壓疾病的發生可能涉及了細胞凋亡基因分子機制,妊娠期高血壓疾病胎盤組織中Bax mRNA、Bcl-2 mRNA表達水平處于失衡狀態,表明Bax/Bcl-2 mRNA比值與甲減合并妊娠期高血壓期有密切關聯。
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