檢測(cè)慢性乙型病毒性肝炎患者血清硝基酪氨酸的意義

孟連柱 高 愛(ài)武 韓 麗娟 邊 劍飛 楊勝芬

病毒性肝炎的發(fā)病機(jī)制至今尚未完全明了，很多研究證明氧化應(yīng)激(oxidative stress，OS)是很重要的影響因素，病毒性肝炎患者體內(nèi)存在嚴(yán)重的氧化/抗氧化失衡狀態(tài)［1］。硝基酪氨酸(NT)常在病理狀態(tài)下伴隨活性氧和活性氮的增加而產(chǎn)生，NT作為一種蛋白質(zhì)翻譯后修飾，可反映蛋白質(zhì)硝基化程度。本研究通過(guò)檢測(cè)慢性乙型病毒性肝炎不同程度肝損害患者血清NT水平，探討慢性乙型病毒性肝炎病情進(jìn)展中的氧化損傷。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇慢性乙型病毒性肝炎患者40例，其中男27例，女13例，符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)及中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì)2000年聯(lián)合制定的《慢性乙型肝炎防治指南》［2］的診斷標(biāo)準(zhǔn)。其中病毒性肝炎乙型慢性重度組(慢重肝)20例，男15例，女5例;年齡13～45歲，平均年齡(30±10)歲。病毒性肝炎乙型慢性輕度組(慢輕肝)20例，男16例，女4例;年齡15～46歲，平均年齡(26±10)歲，無(wú)其他因素導(dǎo)致肝損害因素。正常對(duì)照組20例，男13例，女7例;年齡14～44歲，平均年齡(27±10)歲。所有患者均除外甲肝病毒(HAV)、丙肝病毒(HCV)、丁肝病毒(HDV)及戊肝病毒(HEV)的混合或重疊感染及免疫性疾病，入選前半年內(nèi)未使用過(guò)抗病毒藥物及免疫抑制劑，健康對(duì)照組HAV、HCV、HDV及HEV檢測(cè)均為陰性。3組年齡等一般資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

1.2 標(biāo)本采集及測(cè)定 所有研究對(duì)象均于晨醒5 min內(nèi)抽取肘靜脈血3 ml，混勻，4℃，3 000 r/min離心15 min，分離血清－70℃保存待測(cè)血清NT。所有標(biāo)本一批次由同一人、同一時(shí)間檢測(cè)。NT應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定，試劑盒由上海西唐生物科技有限公司提供。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用SAS 8.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以±s表示，采用因素與差分析，兩兩比較采用q檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

正常對(duì)照組、慢重肝、慢輕肝患者血清NT水平分別為(2.3±1.5)、(3.8 ±2.6)和(5.4 ±3.3)ng/ml，慢輕肝患者與對(duì)照組相比，慢重肝與慢輕肝患者組相比血清NT濃度均升高(P＜0.05)，慢重肝與對(duì)照組比升高更顯著(P ＜0.01)。

3 討論

蛋白質(zhì)硝基化一般是指蛋白質(zhì)中的酪氨酸硝化成NT。NT的產(chǎn)生可引起細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)及酶變性、DNA損害，最后導(dǎo)致細(xì)胞死亡或凋亡。常在病理狀態(tài)下伴隨活性氧和活性氮的增加而產(chǎn)生，在氧化應(yīng)激存在條件下，明顯升高［3，4］，并且隨著病情的加重而升高，通過(guò)檢測(cè)血清NT水平可以預(yù)測(cè)肝損傷的程度，從而間接反映OS的程度［5］。林亞杰等［6］對(duì)慢乙肝氧化損傷研究指標(biāo)丙二醛(MDA)結(jié)果提示隨著病情的加重，MDA是增高的，重癥患者氧化損傷重于輕癥患者。

本研究將研究對(duì)象分為3組，即正常對(duì)照組、慢輕肝及慢重肝，3組平均年齡差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，除外其他致NT升高的疾病，除外吸煙、飲酒、藥物等諸多因素的干擾，結(jié)果發(fā)現(xiàn)血清NT水平在慢輕肝患者組比正常對(duì)照組明顯升高，慢重肝患者組進(jìn)一步升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。表明慢輕肝患者有著較高水平的蛋白質(zhì)硝基化標(biāo)志物產(chǎn)生，提示慢輕肝患者存在OS，慢重肝患者比慢輕肝患者有著更高水平NT，表明慢重肝患者存在更強(qiáng)的OS，我們的研究顯示無(wú)論是病毒性肝炎乙型慢性輕度組(慢輕肝)患者還是病毒性肝炎乙型慢性輕度組(慢重肝)患者機(jī)體內(nèi)均存在氧化損傷改變。這與馬邵等［5］研究結(jié)果亦有相似之處。

1 吳娜，蔡光明，何群.氧化應(yīng)激與肝臟損傷.世界華人消化雜志，2008，16:3310-3315.

2 中華醫(yī)學(xué)會(huì)傳染病與寄生蟲(chóng)學(xué)分會(huì)/肝病學(xué)分會(huì).病毒性肝炎防治方案.中華肝臟病雜志，2000，8:324-329.

3 Pacher P，Beckman JS，Liaudet M，et al.Nitric oxide and peroxynitrite in health and disease.Physiol Rev，2007，87:315-424.

4 池泉，黃開(kāi)勛.蛋白質(zhì)酪氨酸硝化研究.化學(xué)進(jìn)展，2006，18:315-424.

5 馬邵，葉青，郭帥.檢測(cè)肝損傷患者的血清3-硝基酪氨酸的臨床意義.新醫(yī)學(xué)，2009，40:381-382.

6 林亞杰，肖偉玲.慢性乙型肝炎患者氧化損傷的檢測(cè)及臨床意義.山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)，2006，44:706-709.