尿糖對(duì)白細(xì)胞干化學(xué)法檢測(cè)結(jié)果的影響

關(guān) 濤 （長(zhǎng)江大學(xué)荊州臨床醫(yī)學(xué)院 荊州市中心醫(yī)院臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)部，湖北 荊州434020）

為探討尿糖對(duì)尿液分析儀白細(xì)胞干化學(xué)檢測(cè)結(jié)果的影響，我們分析了我院門診干化學(xué)檢測(cè)尿糖陽(yáng)性且鏡檢白細(xì)胞陽(yáng)性的患者尿液標(biāo)本200例的尿檢資料，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 臨床資料

1．1 設(shè)備與試劑

本實(shí)驗(yàn)室所用儀器為GEB-600自動(dòng)尿液分析儀 （廣州市花都高爾寶生物技術(shù)有限公司），及配套的試紙條GEB-11（100人份／筒）；尿液質(zhì)控品 （上海伊華醫(yī)學(xué)科技有限公司生產(chǎn)）；鏡檢用雙目顯微鏡（日本產(chǎn)奧林巴斯公司）；10ml定量吸管；牛鮑氏計(jì)數(shù)板；低速自動(dòng)平衡離心機(jī) （4000r／min）。

1．2 標(biāo)本來(lái)源

隨機(jī)選取我院門診干化學(xué)尿糖≥2．8mmol／L為陽(yáng)性的尿液標(biāo)本200例，其中男50例，女150例，年齡18～65歲。

1．3 檢測(cè)方法及結(jié)果

1．3．1 尿液分析儀檢測(cè)尿糖 用定量吸管吸取混勻的10ml新鮮尿液于玻璃試管中，將尿試紙條浸入1s后取出，試紙帶由藍(lán)色→棕色的顏色變化來(lái)指示，藍(lán)色為無(wú)尿糖，用 “-”表示，棕色越深，“＋”越多，尿糖越高。結(jié)果報(bào)告為±、＋、2＋、3＋、4＋。檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 尿液檢測(cè)結(jié)果

1．3．2 鏡檢 取尿液10ml于試管中，以2000r／min離心5min，棄去上清液，留沉淀0．2ml。充分混勻后，取出約20μl滴于載玻片上，加蓋玻片，然后用較弱的光線先以低倍鏡觀察全貌，再用高倍鏡辨認(rèn)細(xì)胞。為避免尿液中有形成分的破壞，所有檢測(cè)均在取樣后1h內(nèi)完成。尿液干化學(xué)質(zhì)控參照叢玉隆［1］報(bào)道的方法。尿沉渣鏡檢判讀標(biāo)準(zhǔn)：以白細(xì)胞≥14×106個(gè)／L為陽(yáng)性［2］。

2 討 論

尿液干化學(xué)分析儀是測(cè)定尿中某些化學(xué)及有形成分的自動(dòng)化儀器，它無(wú)論是在哪一級(jí)醫(yī)院里都是非常普通但又是非常重要的自動(dòng)化檢測(cè)設(shè)備，這種儀器具有體積小、操作簡(jiǎn)單、快速等優(yōu)點(diǎn)。但是在使用中有許多因素都有可能影響該儀器檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，不僅會(huì)引起實(shí)驗(yàn)結(jié)果的偏差，而且耽誤了臨床醫(yī)生的診斷。因此，除了要求操作者熟練掌握尿液分析儀的原理、使用方法、注意事項(xiàng)及影響因素等方面之外，還要定期對(duì)其進(jìn)行保養(yǎng) （如日、周、月、年保養(yǎng)等），這樣才能確保尿液分析儀處在一個(gè)最佳狀態(tài)，從而讓它所檢測(cè)的結(jié)果更準(zhǔn)確。

尿液干化學(xué)分析儀各測(cè)試項(xiàng)目的主要檢測(cè)原理是依據(jù)多聯(lián)試紙帶上各自對(duì)應(yīng)模塊化學(xué)反應(yīng)后顏色變化的深淺來(lái)確定尿液中的含量，其測(cè)試原理的本質(zhì)是光的吸收和反射，試劑塊顏色的深淺對(duì)光的吸收、反射是不一樣的，光值量越小，反射光量值越大，反射率也越大。換言之，特定試劑塊顏色的深淺與尿液中特定化學(xué)成分濃度成正比，因此任何外源性物質(zhì)或人為因素對(duì)尿液標(biāo)本對(duì)多聯(lián)試紙帶模塊的干擾，均可引起檢測(cè)結(jié)果的誤差。我科采用的與儀器配套的GEB11型尿試紙條檢測(cè)白細(xì)胞模塊的原理則是白細(xì)胞酯酶法，因?yàn)閱魏思?xì)胞、淋巴細(xì)胞無(wú)這種酯酶，只有中性粒細(xì)胞內(nèi)含有酯酶，這種酶能水解一種3-羥基吲哚酚酯類底物，釋放出酚從而與重氮試劑反應(yīng)生成紫紅色化合物，所以干化學(xué)法白細(xì)胞檢測(cè)方法只對(duì)粒細(xì)胞敏感。另外，如果白細(xì)胞被破壞后，酯酶釋放到尿液中，其干化學(xué)結(jié)果為陽(yáng)性，而沉渣結(jié)果為陰性，在實(shí)際操作中應(yīng)注意。尿糖測(cè)定的原理則是基于葡萄糖氧化酶的酶促反應(yīng)，只與葡萄糖發(fā)生反應(yīng)，當(dāng)葡萄糖氧化酶特異性氧化β-D-葡萄糖醛縮合過(guò)氧化氫，過(guò)氧化氫在過(guò)氧化物酶的作用下，使指示劑氧化而呈現(xiàn)出棕色，試紙后一步反應(yīng)為氧化還原反應(yīng)，當(dāng)尿液中含有比色素還原能力更強(qiáng)的物質(zhì)時(shí)，可使尿糖結(jié)果偏低，甚至可以出現(xiàn)假陰性；如尿液中含有維生素C，可使尿糖結(jié)果偏低，可出現(xiàn)假陰性［3］，當(dāng)尿糖陽(yáng)性即尿糖≥2．8mmol／L時(shí)，干化學(xué)法檢測(cè)白細(xì)胞的結(jié)果的假陰性率達(dá)35%～85%，尿糖對(duì)于化學(xué)法測(cè)定白細(xì)胞的干擾程度隨著尿糖含量的增加而升高。

3 體 會(huì)

①尿干化學(xué)分析須使用新鮮尿液標(biāo)本，標(biāo)本量應(yīng)該在10ml以上。②在使用任何一種尿試紙前，首先應(yīng)該認(rèn)真閱讀使用說(shuō)明書(shū)，并嚴(yán)格按照它的要求和操作方法執(zhí)行。試紙應(yīng)該在有效期內(nèi)使用，禁止用手觸摸試紙上的試劑反應(yīng)區(qū)。每次取出試帶后應(yīng)立即蓋緊蓋子，將余下的試帶儲(chǔ)藏在避光、干燥的試帶瓶?jī)?nèi)，室溫條件下保存。③各廠家生產(chǎn)的尿試紙，其反應(yīng)原理和項(xiàng)目排列方式都有不同，反應(yīng)時(shí)間、顏色變化、靈敏度等各有不同，選用的測(cè)定單位也不一致，因此，不能混合使用或用不同的比色板比色。④試紙浸入尿液的時(shí)間不要太長(zhǎng)，嚴(yán)格掌握比色時(shí)間，在規(guī)定時(shí)間時(shí)完成比色。某些反應(yīng)如葡萄糖、酮體、潛血試驗(yàn)等會(huì)因比色時(shí)間延長(zhǎng)而使得結(jié)果偏高。⑤由于干化學(xué)法是依靠顏色變化來(lái)反映檢測(cè)結(jié)果的，因此人眼睛對(duì)顏色的識(shí)別和判斷非常重要。但是目測(cè)法因人與人之間對(duì)顏色的辨別能力不同，會(huì)出現(xiàn)判別誤差，因此在有條件的情況下盡量使用半自動(dòng)或全自動(dòng)尿液分析儀。⑥干化學(xué)儀器法檢查白細(xì)胞只能作為一種篩選試驗(yàn)，絕不能代替顯微鏡檢查。

［1］叢玉隆 ．尿液常規(guī)分析質(zhì)量控制及臨床應(yīng)用體會(huì) ［J］．臨床檢驗(yàn)雜志，2001，19（4）：241-243．

［2］李小龍，郭仁勇，陳曉東．Diasys尿沉渣測(cè)定方法的參考值確定 ［J］．臨床檢驗(yàn)雜志，2003，21（1）：46-47．

［3］葉應(yīng)嫵，王毓三，申子喻 ．全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程 ［M］．3版 ．南京：東南大學(xué)出版社，2006：284-285．