保健食品中未知濫用藥物快速篩查與鑒定

譚和平 ， 鄒 燕 ， 譚福元 ， 王彧婕 ， 徐文平 ， 劉明東

（1.中國測試技術研究院，四川 成都 610021；2.國家防災減災分析測試中心（成都），四川 成都 610021）

0 引 言

近年來，隨著人民生活水平的不斷提高，我國保健食品市場獲得了空前的發展。但是也存在一些不法商家為了謀取暴利，在保健食品中肆意添加有治療作用的化學藥品來提高其“保健作用”，欺騙消費者。如在壯陽、補腎、抗疲勞類保健食品中添加西地那非、伐地那非、他達拉非等壯陽藥，在降糖類保健食品中添加羅格列酮、苯乙雙胍、瑞格列奈等化學降糖藥，減肥類保健食品中添加芬氟拉明、利尿劑等藥品等[1-3]。長期服用這類保健食品，不僅將對人體造成極大的危害，而且影響了我國保健食品的聲譽，也阻礙了其產業的健康可持續發展。

化學藥品種類繁多、數量巨大，而當前我國現行標準及檢測方法多為預設的“目標分析”，這就意味著不法分子完全還可以尋找其他替代品以逃避法律的監管，這也是當前食品、藥品安全事故屢禁不止的關鍵原因之一。隨著現代分析儀器的發展，飛行時間質譜儀（TOF/MS）已有能力獲得小于1×10-6精確質量的全掃描質譜圖，且具有較高的選擇性和靈敏度，這使得分析工作者可以通過精確質量數的檢索匹配，快速且方便地對未知化合物實現快速篩查與鑒定。

該文在自建藥物數據庫的基礎上，采用LCDAD-TOF/MS對某品牌黑糯米壯陽保健酒中的未知成分進行了定性篩查，從中發現并確認了伐地那非的大量存在。這為保健食品中非法添加化學藥品等未知有害物質的篩查與鑒定提供了快速、可靠、經濟的檢測方法，為食品藥品安全監管提供了強有力的技術支持。

1 試驗部分

1.1 主要儀器與試劑

1200 HPLC-6210 TOF/MS（美國 Agilent）；超純水機（美國 Millipore）；乙腈（色譜純，Sigma-Aldrich）；甲酸（分析純，成都市科龍化工試劑廠）；樣品為某品牌的保健酒（客戶送檢樣品）。

1.2 試驗條件

1.2.1 色譜條件

色譜柱為Agilent Zorbax Eclipse XDB C18（2.1mm×50mm，1.8μm）；流動相A為體積分數0.1%的甲酸水溶液，流動相B為乙腈；梯度洗脫為0 min時5%的流動相B，5 min時5%的流動相B，20 min時99%的流動相B，保持5 min；流速0.3 mL/min；柱溫30℃；進樣體積10μL。

1.2.2 質譜條件

電噴霧離子源（ESI），正離子模式，離子源溫度350℃，干燥氣流速9L/min,霧化器壓力40psi,碎裂電壓分別為175V和400V，掃描方式為全掃描。

1.3 樣品的前處理

吸取適量樣品，經0.2μm針頭過濾器過濾后直接進樣分析。

2 結果與討論

2.1 樣品檢測結果

圖1和圖2分別為樣品二極管陣列色譜圖（DAD）和總離子流質譜圖（TIC）。從色譜圖上可以看出，在保留時間13.92 min時，出現了一個峰面積加合百分比大于80%的色譜峰，對應的TIC保留時間為14.20min。結合DAD與TIC響應值分析，初步可以認定該色譜峰代表的化合物在樣品中有較高的含量，而其他組分在樣品中的含量較低。

2.2 未知化合物精確分子量分析

應用MassHunter Qualitative Analysis軟件對質譜圖進行分子特征提取（MFE）分析，該色譜峰所代表的化合物的準分子離子峰 [M+H]+精確分子量為489.22767，其質譜圖如圖3所示。用分子式生成器（MFG）計算得對應的分子式為C23H33N6O4S+，通過在自建的專業藥物數據庫（收集了目前文獻、臨床中使用的各種藥物信息）中進行檢索，精確分子量誤差及同位素得分均表明該化合物可能為伐地那非（vardenafil）（表1）。此藥具有用量小、見效快等特點，據報道伐地那非經常被非法添加到壯陽補腎類保健品中，這也引起了分析人員的關注[4-6]。

2.3 未知化合物碎片與質譜裂解方式分析

圖3為碎裂電壓為175 V時的化合物準分子離子峰，為了得到更豐富的子離子碎片信息，將質譜的碎裂電壓升高至400 V，得到含有準分子離子峰[M+H]+m/z 489.227 84及其特征子離子碎片m/z 312.15829，m/z 151.08607的質譜圖（圖 4），經 MFG計算得碎片m/z 312.158 29和m/z 151.086 07可能的離子分子式分別為C17H20N4O2+和C8H11N2O+（表1）。

根據特征子離子碎片信息質譜圖（圖4），推斷出了伐地那非的質譜碎裂方式（+ESI）如圖5所示。由圖5可以看出，在該碎裂方式下得到了離子碎片分子式與表1中MFG計算所得離子分子式一致，因此進一步確認了該保健酒中添加有濃度較高的伐地那非。

表1 化合物檢索結果

3 結束語

該文采用LC-DAD-TOF/MS對某保健酒中的未知異常成分進行了篩查與確認，方法簡單、快速，不需要標準品或對照品即可得到準確可靠的結論。該方法為“非目標”檢測分析，篩查范圍廣，尤其適合于食品、藥品中未知有害有機物的快速篩查與確認，是目前打擊保健食品中非法添加化學物質的利器。若能得到廣泛應用，必將對食品、藥品安全違法分子起到較大的震懾作用，對預防食品安全事件的發生起到重要作用。

圖5 伐地那非質譜碎裂方式示意圖

[1]肖樹雄，李楊杰.由降糖中成藥和保健食品檢驗情況探索非法添加化學成分的系統快篩思路[J].藥物分析雜志，2011（31）：418-422.

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[4] 張建麗，王小兵.LC/MS和LC-MS/MS定性檢測保健品中非法添加的伐地那非[J].質譜學報，2009（20）：219-222.

[5] 沈志武，唐宏兵，李群，等.高效液相色譜法測定保健食品中他達拉非、西地那非、伐地那非違禁藥物含量[J].理化檢驗-化學分冊，2008（44）：540-542.

[6] 劉暢，夏晶，胡青，等.LC/MS（n）法檢測補腎壯陽類中成藥和保健食品中非法添加5種性功能類化學藥品[J].中成藥，2009（31）：1371-1374.