阿昔洛韋緩釋片在不同介質中的釋放研究

周衛，謝浩，嚴相平，丁逸梅，2（.南京工業大學江蘇省藥物研究所有限公司，南京市 20009；2.南京工業大學藥學院，南京市 20009）

阿昔洛韋，又名無環鳥苷（Aciclovir，簡稱ACV），為核苷類抗病毒藥，化學名為9-（2-羥乙氧甲基）鳥嘌呤。由于ACV體內半衰期較短，為2～3 h左右，常規使用時每日需服用5次，易產生漏服現象，且因此血藥濃度有較明顯的峰-谷現象，臨床表現為惡心、嘔吐等不良反應[1]。鑒于此，為了提高該藥的治療順應性，臨床上出現了ACV緩釋片，使每天多次服用縮減為每8 h服用1次，同時可降低血藥濃度的波動，減少峰值時的毒副作用，增強谷值時的療效，使藥物的安全性、有效性和順應性都有所提高[2]。

ACV的溶解具有pH依賴性[3]，在不同pH條件下，藥物的溶解度及控制藥物釋放行為的輔料的水化、溶脹、溶蝕速度都可能不同，因此，應該對其在不同pH值條件下的釋放行為進行考察，以為其建立合理可靠的體外釋放方法提供依據。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

ZRS-8G型智能溶出試驗儀（天津市天大天發科技有限公司）；UV-2450紫外分光光度計（日本島津公司）；ZDY-8壓片機（上海遠東制藥機械總廠）。

1.2 試藥

ACV（江蘇永大藥業有限公司，批號：060211，純度：99.6%）；ACV標準品（中國藥品生物制品檢定所，批號：630-200001，純度：99.9%）；ACV緩釋片（南京工業大學江蘇省藥物研究所有限公司，批號：060403，規格：每片200 mg）；其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 測定波長的選擇

取本品1片，研細，精密稱取細粉適量（約相當于ACV 10 mg），置于100 mL容量瓶中，加0.1 mol·L－1的鹽酸液（以下所用鹽酸液均為此濃度）50 mL，超聲1 min，加鹽酸液稀釋至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液。精密量取續濾液適量，加鹽酸液稀釋制成每1 mL中含10 μg的溶液，作為供試品溶液，進行紫外掃描，結果最大吸收波長為254 nm。另取ACV標準品以鹽酸液制成每1 mL約含ACV 10 μg的溶液及照處方比例制備不含主藥的空白輔料溶液，依法掃描，結果在254 nm波長處空白輔料無干擾，故選擇254 nm為測定波長。光譜詳見圖1。

2.2 標準曲線的制備

圖1 紫外分光光譜圖1.供試品；2.標準品；3.空白輔料Fig 1 UV spectrum1.test sample；2.reference substance；3.blank excipients

精密稱取ACV標準品適量，加鹽酸液溶解并稀釋制成每1 mL中含ACV 198.2 μg的溶液，作為貯備液。精密量取貯備液1、2、3、4、5、6 mL，置于100 mL容量瓶中，用鹽酸液稀釋至刻度，搖勻，在254 nm波長處測定吸光度，以濃度（c，μg·mL－1）為橫坐標，吸光度（A）為縱坐標，進行線性回歸。得回歸方程：A＝6.00×10－3+5.58×10－2c（r＝0.9994）。另，分別以pH6.8磷酸鹽緩沖液、蒸餾水替換介質鹽酸液進行相同操作，結果，ACV在3種介質中的檢測濃度線性范圍均為1.982～11.892 μg·mL－1。

2.3 回收率試驗

照處方比例制備空白輔料片，在溶出杯中精密加入標準品適量，約相當于標示量的20%、50%、120%，依法測定。結果，ACV的平均回收率為99.16%，RSD＝0.49%（n＝9），詳見表1。

表1 回收率試驗結果Tab 1 Results of recovery tests

2.4 溶液穩定性試驗

取“2.6”項下同一份釋放度測定液，分別于0、1、4、8 h測定其含量，結果RSD＝0.67%，結果表明釋放度測定液在8 h內穩定。

2.5 中間精密度試驗

取同一批樣品，由不同試驗者在不同時間分別測定含量，計算中間精密度。結果，含量的RSD＝0.48%，表明本方法中間精密度良好。

2.6 釋放度測定及釋放方程的擬合

按《中國藥典》（2010年版）溶出度測定法（轉籃法）有關規定[4]進行釋放度測定。取供試品，量取經超聲脫氣處理的3種不同的釋放介質（鹽酸液、pH6.8磷酸鹽緩沖液和蒸餾水）進行釋放度測定。取本品，以上述3種不同釋放介質900 mL為溶劑，轉速為100 r·min－1，依法操作，在規定時間點0.5、1、2、3、4、5、6、8、12 h分別取溶液3 mL，濾過，并立即在操作容器中補充釋放介質3 mL。分別精密量取各濾液0.5 mL，置于10 mL容量瓶中，以鹽酸液稀釋至刻度，搖勻。照分光光度法，在254 nm波長處測定吸光度；另取ACV標準品適量，精密稱定，用鹽酸液溶解并稀釋制成每1 mL含10 μg的溶液，同法測定，計算出每片在不同時間的累積釋放度。

另，前期以鹽酸液為釋放介質、后期以pH6.8磷酸鹽緩沖液為釋放介質組成替換介質，考察ACV緩釋片在其中的體外釋放過程。取本品，以鹽酸溶液（9→1000 mL）900 mL為溶劑，轉速為100 r·min－1，依法操作；2 h后，立即將轉籃升出液面，隨即將轉籃浸入預熱至（37±0.5）℃的磷酸鹽緩沖液（pH6.8）900 mL釋放介質中，轉速不變，繼續依法操作，計算出每片在不同時間的累積釋放度。以累積釋放度為縱坐標，時間為橫坐標，繪制釋放曲線，見圖2。

圖2 ACV緩釋片在不同介質中的釋放曲線Fig 2 Drug release curves of Aciclovir sustained-release tablets in different media

由圖2可見，ACV緩釋片在鹽酸液中的釋放速度最快，但12 h時4種介質中ACV皆釋放完全。另，在替換介質中，ACV緩釋片前2 h在鹽酸液中釋放約50%，可以較快地達到起效濃度，進入腸道后相對于胃中釋放速率減慢，但在12 h時也幾乎達到了完全釋放。

根據累積釋放度和時間數據，選用不同的方程對釋放行為進行擬合，結果見表2。

表2 ACV緩釋片在不同介質中的釋放方程的擬合Tab 2 Fitting results for drug release equation of Aciclovir sustained-release tablets in different media

由表2可見，在4種釋放介質中，ACV緩釋片的釋放動力學特征均以Higuchi方程及Peppas方程擬合較好[5]。Peppas方程（lnQ＝nlnt+k）常用來表征緩釋片的釋放機制，方程中的n為釋放參數，其大小表征釋放機制。對于圓柱形制劑（如片劑）而言，當n＜0.45時，該片劑中的藥物釋放為Fickian擴散；當0.45＜n＜0.89時，藥物釋放為混合型，即藥物擴散和骨架溶蝕協同作用；當n＞0.89時，藥物釋放為骨架溶蝕機制。本品在不同介質中釋放曲線經Peppas方程擬合n均＜0.45，說明ACV緩釋片主要為擴散釋藥機制[6]。

3 討論

經比較ACV緩釋片在鹽酸液、pH6.8磷酸鹽緩沖液和蒸餾水中的釋放行為，可以看出其在鹽酸中的釋放速度最快，與在pH6.8磷酸鹽緩沖液中釋放速度相差較大。由于人胃的排空速率一般為0.5～2 h，該緩釋片有相當長時間是在腸道中釋放，因此為了結合人體正常生理情況，采用了前期以人工胃液（鹽酸）為釋放介質、后期以人工腸液（磷酸鹽緩沖液（pH6.8））為釋放介質的方式（模擬人體胃腸道的轉運及pH變化）考察其體外釋放過程。結果，ACV緩釋片在前2 h可以較快地達到起效濃度，進入腸道后相對于胃中釋放速率減慢，但在12 h時也達到了完全釋放。

ACV緩釋片的國家標準[7]規定的釋放度測定方法為：取各規定時間點的樣品0.5 mL置于10 mL容量瓶中，加入磷酸鹽緩沖液（pH6.8）2 mL，以水稀釋至刻度，搖勻，在252 nm波長處測定吸光度，按阿昔洛韋分子式C8H11N5O3的吸收系數（）為622進行計算。經筆者研究發現，上述測定方法結果不準確：2 mL的磷酸鹽緩沖液（pH6.8）的緩沖容量不夠，不足以緩沖0.5 mL的鹽酸，因此最終溶液的pH值偏酸，經測定最終樣品pH為3.5。舉例如下：稱取ACV標準品19.82 mg至100 mL容量瓶中，加鹽酸液溶解并稀釋至刻度；取該溶液0.5 mL，置于10 mL容量瓶中，加入磷酸鹽緩沖液（pH6.8）2 mL，以水稀釋至刻度，搖勻，在252 nm波長處測定，吸光度為0.581，而如按照吸收系數計算吸光度應為0.616，可見若按照吸收系數法計算結果會偏低。因此筆者參照《中國藥典》（2010年版）的ACV片溶出度測定的方法[4]，采用對照品法測定，樣品以鹽酸液稀釋。

綜上所述，阿昔洛韋緩釋片在不同介質中均具有緩釋性，釋放機制主要為擴散釋藥。

[1]林山鷹，李 東.阿昔洛韋——一種廣譜高效的抗病毒藥[J].深圳醫學信息，1994，6：11.

[2]呂竹芬，歐有權.阿昔洛韋緩釋片的制備及體外釋藥的研究[J].廣東藥學院學報，2002，18（4）：263.

[3]丁 立，趙 駿，張鈞壽.阿昔洛韋處方前研究[J].山東醫藥工業，1997，16（6）：1.

[4]國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典（二部）[S].2010年版.北京：中國醫藥科技出版社，2010：391、附錄85.

[5]陸 彬.藥物新劑型與新技術[M].第1版.北京：人民衛生出版社，1998：311-314.

[6]陳日來，李玉珍，李 東，等.法莫替丁生物黏附緩釋片釋放機制研究[J].中國藥業，2008，17（13）：11.

[7]WS1-（X-304）-2003Z，阿昔洛韋緩釋片[S].2004.