健腎片中崩解劑與崩解時間及溶出度相關性研究

孫小芬， 劉漢清， 李 婧

(南京中醫藥大學藥學院，江蘇南京 210046)

健腎片由淫羊藿、黃芪、茯苓、青風藤等藥物組成，具有健脾益腎，補氣清利，祛風通絡的功效，為治療原發性慢性腎小球腎炎、脾腎氣虛的常用中藥制劑［1-2］。為提高藥品質量，進一步完善質量標準，本研究以健腎片中淫羊藿苷為溶出指標，考察崩解劑與崩解時間和溶出度間的相關性。

1 儀器和試藥

1.1 儀器 2695高效液相色譜儀(美國Waters公司);2998二極管陣列檢測器(美國Waters公司);Empower色譜工作站(美國Waters公司);ZRC-8C智能溶出儀(天津大學無線電廠);TDP-5型單沖壓片機(廣州廣萊機械廠);ZB-1C智能崩解儀(天津大學無線電廠);電子天平(BT125，賽多利斯科學儀器有限公司)。

1.2 試藥 健腎片提取浸膏粉(自制);淫羊藿苷對照品(批號110737-200413，中國藥品生物制品檢定所);微晶纖維素(MCC，臺灣明臺);羧甲基淀粉鈉DST(CMS-Na，臺灣永日);交聯聚維酮Kollidon(PVPP，德國BASF);低取代羥丙基纖維素(L-HPC，德國BASF);干燥淀粉(北京奧博星生物技術責任有限公司);硬脂酸鎂(上海化學試劑站分裝廠);胃蛋白酶(國藥集團化學試劑有限公司);乙腈(HPLC級，美國TEDIA公司)，超純水(娃哈哈純凈水)，其他試劑均為市購分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件 色譜柱Hedera ODS-2 C18(250 mm×4.6 mm，5 μm);流動相:乙腈-水(30 ∶70);體積流量:1.0 mL/min;檢測波長:270 nm;進樣量:20 μL;理論塔板數按淫羊藿苷計應不低于1 500。

2.2 健腎片的制備 健腎片浸膏粉碎，過100目篩，選用不同崩解劑不同用量(10%干燥淀粉、4%羧甲基淀粉鈉、10%微晶纖維素、3.5%低取代羥丙基纖維素、2%交聯聚乙烯吡咯烷酮)及不同加入方法(內加法、外加法)以70%乙醇制軟材，制顆粒，80℃風熱烘干，加0.5%硬脂酸鎂，壓片，每片0.35 g。

2.3 供試品溶液的制備 取健腎片浸膏0.35 g，置100 mL具塞錐形瓶中，精密加入甲醇100 mL，密塞，稱定質量，超聲處理30 min，放冷，再稱定質量，用甲醇補足減失的質量，搖勻，濾過，用0.45 μm微孔濾膜過濾，取續濾液即得。按照上述色譜條件測定，含淫羊藿苷不少于0.2 mg/片。

2.4 對照品溶液的制備 精密稱取淫羊藿苷對照品4.26 mg，置10 mL量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，作為對照品溶液貯備液(每1 mL含426 μg的溶液)。

2.5 方法學考察

2.5.1 線性關系 分別精密量取淫羊藿苷對照品溶液，用甲醇稀釋成一系列質量濃度為4.260、2.420、1.420、0.710、0.352、0.176 μg/mL，注入高效液相色譜儀，按2.1項下色譜條件測定，以淫羊藿苷質量濃度(μg/mL)為橫坐標(X)，峰面積為縱坐標(Y)，繪制標準曲線，得回歸方程Y=5.19×104X－2 790，R=0.999 9，表明淫羊藿苷在 0.176 ～4.260 μg/mL范圍內線性關系良好。

2.5.2 精密度實驗 精密吸取對照品溶液1 mL，置10 mL量瓶中，加甲醇稀釋并定容，精密吸取20 μL，連續進樣6針，按2.1項下色譜條件測定。計算淫羊藿苷峰面積的RSD為0.59%，結果表明精密度良好。

2.5.3 重復性實驗 取健腎片浸膏0.35 g，精密稱定，依2.3項下制備供試品溶液方法處理，平行操作6份，按2.1項下色譜條件測定。計算淫羊藿苷峰面積的RSD為2.96%，結果表明，該方法的重現性良好。

2.5.4 穩定性試驗 取健腎片浸膏0.35 g，精密稱定，依2.3項下制備供試品溶液方法處理，分別于0、4、8、12、24、48 h 進樣，按2.1 項下色譜條件測定，計算淫羊藿苷峰面積的RSD為1.86%，結果表明供試品溶液在48 h內穩定。

2.5.5 回收率試驗 精密稱取已知量的健腎片浸膏0.35 g，共6份，按等量樣品含量精密加入淫羊藿苷對照品0.2 mg(質量濃度為200 μg/mL的標準品溶液10 mL)，依2.3項下制備供試品溶液方法處理，按2.1項下色譜條件測定，計算淫羊藿苷回收率為100.6%，RSD 為0.49%，結果見表1。

表1 健腎片中淫羊藿苷回收率結果 (n=6)

2.6 崩解時間測定 按中國藥典2010年版一部(附錄ⅫA)方法測定［3］，結果見表2。

表2 不同樣品崩解時間

結果表明，10種樣品加擋板和不加擋板測定的崩解時間均符合規定，但健腎片中使用不同的崩解劑其崩解時間各不相同，以PVPP外加時崩解時間最短，可能因為PVPP具有很高的毛細管活性和水合能力［4］，迅速將水吸收到藥片中。崩解劑的加入方法也會影響片劑的崩解時間，外加法比內加法崩解速度較快。

2.7 溶出度測定 按中國藥典2010年版二部(附錄XC)溶出度測定項下操作。采用轉籃法，以200 mL人工胃液為溶出介質，溫度(37.0±0.5)℃，調節轉速為100 r/min，每種片劑取6片分別置于轉籃中，分別于 30、60、90、120、150、180 min 時取樣 10 mL，隨即補充同溫度的介質 10 mL，用 0.45 μm 微孔濾膜濾過，分別精密吸取續濾液20 μL樣，按2.1項下色譜條件測定。另取不同樣品各10片，精密稱定，求其平均片重，研細，精密稱取適量(相當于平均片重)，置200 mL瓶中，用人工胃液超聲30 min溶解稀釋并定容，搖勻，過濾，精密吸取續濾液20 μL，按2.1項下色譜條件測定，以前者峰面積與后者峰面積比值計算溶出度，求每種片劑平均溶出度。計算不同樣品在不同時間點的相對累積溶出百分率，結果見表3及圖1。

表3 不同崩解劑的相對累積溶出率/% (n=6)

圖1 不同樣品平均溶出度-時間曲線

結果表明，健胃片中使用不同的崩解劑其溶出速率各不相同，在溶出過程中，前90 min差別較明顯。

2.8 數據處理

2.8.1 提取溶出參數 根據威布爾函數分布用Excel程序擬合直線［5］，得出尺度參數T0和形狀參數 M，并求出T50、Td，結果見表 4。

表4 不同樣品溶出參數 (n=6)

2.8.2 方差分析 結果見表5。由表顯示，各溶出參數之間存在顯著性差異，不同崩解劑影響藥物溶出。因此，片劑在處方設計過程中，有必要對崩解劑進行篩選。

表5 溶出參數方差分析

2.8.3 崩解時間與T50相關性檢驗 結果見表6。由表顯示，片劑在加擋板和不加擋板時測得的崩解時間與T50相關性均不顯著，說明只做崩解時限檢查不能反映本品在體內的溶出情況。

表6 崩解時間與溶出度相關性檢驗

3 討論

3.1 實驗前期考察了常用的幾種崩解劑的類型(淀粉類、纖維素類、PVP類)、種類及用量(干燥淀粉:5%、10%、15%、20%;CMS-Na:2%、4%、6%、8%;MCC:5%、10%、15%、20%;L-HPC:2%、3.5%、5%、8%;PVPP:2%、3.5%、5%、7%)對健腎片崩解時間的影響，結果表明崩解劑用量影響片劑的崩解時間，以10%干燥淀粉、4%CMS-Na、10%MCC、3.5%L-HPC、2%PVPP 時崩解較快，故本實驗選用此5種崩解劑制備片劑考察溶出度。

3.2 溶出度測定時，通過預實驗比較了轉籃法與漿法，得出前者較好。采用轉籃法，分別選用蒸餾水、人工胃液及人工腸液為溶出介質，結果顯示人工胃液為溶出介質的溶出度遠遠大于其他兩種介質，由于健腎片中淫羊藿苷含量較低，選用小杯法，故本實驗溶出度測定采用轉籃法，以200 mL人工胃液為溶出介質。

3.3 固體口服制劑的崩解與溶出速度在很多情況下并不具有相關性［6-8］，特別是難溶性藥物。因此，藥物溶出度測定逐漸取代崩解時限檢查作為質量控制手段。本實驗采用高效液相法對健腎片中使用不同崩解劑時體外溶出性能進行了考察。該法精確，穩定，重現性好，可作為該制劑溶出度的檢查方法。

3.4 本實驗比較了健腎片中使用不同崩解劑時體外溶出參數T50、Td、M，經方差分析，存在顯著性差異(P＜0.01)，提示片劑制備過程中崩解劑(包括種類、用量及加入方法)影響藥物的溶出度。因此，在片劑生產過程中，有必要對崩解劑進行考察，以提高產品質量。

3.5T50與崩解時間相關性檢驗表明，崩解時限與溶出度不一定存在相關性，片劑崩解快溶出未必就好。因此，應增加健腎片的溶出度檢查，以控制其質量。

［1］王 迅，李 輝，陳方超.健腎片Ⅱ號中黃芪甲苷含量測定的影響因素［J］.中國藥師，2009，12(8):1155-1157.

［2］朱 霞，姚 毅.健腎片的制備及質量標準研究［J］.遼寧中醫雜志，2000，12(3):136.

［3］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:2010年版一部［S］.北京:中國醫藥科技出版社，2010:71.

［4］白慧東，蔣玉鳳，曹麗蒙.幾種分散片崩解劑的性能與應用現狀［J］.新疆醫學，2007，37(6):162-165.

［5］方崇波.運用Excel程序快速計算片劑的溶出度參數［J］.制劑技術，2006，15(18):41.

［6］蔣 曄，田書霞.中藥溶出度的研究進展［J］.中成藥，2006，28(3):417-419.

［7］沈春鳴.感冒通片溶出速率考察［J］.海峽藥學，2002，14(6):51-52.

［8］盧文勝，盧俊麗，廖 藝，等.天麻片的體外溶出度研究［J］.中成藥，2007，29(10):1517-1518.