寧心律康顆粒抗急性心肌缺血誘發心律失常的實驗研究

施 慧， 龍子江， 王 靚， 肖洪玲， 方海雁， 張敬楊

(安徽中醫學院，安徽合肥 230038)

心律失常在中醫理論里屬于“驚悸”、“怔忡”的范疇，本病為本虛標實證，其本為氣血不足，陰陽虧損，其標為氣滯、血瘀、痰火、水飲。寧心律康顆粒是由人參、麥冬、酸棗仁、丹參等組成的復方中藥制劑，具有益氣養陰、養血安神、定悸復脈的作用。本實驗通過復制冠狀動脈結扎誘發的心律失常模型來研究其抗心律失常作用，并探討其作用機制，為臨床應用提供實驗依據。

1 材料和方法

1.1 藥品及試劑 寧心律康顆粒，由合肥遠志醫藥科技有限公司提供，其中人參、丹參、麥冬、酸棗仁按照2:1:1:1配伍，人用量為90 g生藥/d;穩心顆粒:由山東步長制藥有限公司生產，國藥準字Z10950026，批號080545;水合氯醛:國藥集團化學試劑有限公司生產，批號:T20060331;SOD、MDA和NO試劑盒由南京建成生物工程研究所提供，批號:20080912。

1.2 試驗動物 Wistar大鼠，體質量180～220 g，雌雄各半，由南京醫科大學提供，合格證號:SCXK(蘇)2008-0007。

1.3 試驗儀器 Medlab生物信號采集處理系統:南京美易科技有限公司;754紫外-可見分光光度計，上海精密科學儀器有限公司生產。

1.4 試驗方法［1］取Wistar大鼠84只，隨機分成6組:假手術組(等容量蒸餾水)、模型組(等容量蒸餾水)、穩心顆粒組(4.86 g/kg，按體表面積計算相當于人用量的2倍)、寧心律康顆粒小(8.10 g生藥/kg)、中(16.20 g生藥/kg)、大劑量組(32.40 g生藥/kg)，按體表面積計算相當于臨床人日用量90 g生藥的1、2和4倍，1 mL/100 g體質量。每組14只，雌雄各半。大鼠按劑量連續給藥3 d，末次給藥后30 min，將各組大鼠用乙醚麻醉，先用Ⅱ導聯觀察各組大鼠正常心電圖，左胸常規消毒后，于左第4肋間開胸暴露心臟，打開心包膜，距左冠狀動脈起點2 mm～3 mm處，穿5個0號手術線結扎，閉胸，假手術組只開胸，暴露心臟穿線但不結扎冠狀動脈。每組取手術成功的大鼠10只，用Medlab生物信號采集處理系統監測結扎后30min內心電圖的變化。觀察各組大鼠出現早搏的時間，以及各組大鼠出現室速(VT)和室顫(VF)的百分率。并于手術后24h，每組取10只大鼠用10%的水合氯醛ip3.5 mL/kg體質量麻醉，然后腹主動脈取血，按說明書操作，用754紫外-可見分光光度計測SOD、MDA和NO量。

1.5 統計學分析 實驗數據用SPSS12.0 for Windows統計軟件處理，以±s表示。發生率組間比較采用χ2檢驗，其他指標組間比較均采用t檢驗。

2 結果

2.1 對冠脈結扎誘發的心律失常模型大鼠早搏出現時間、室速和室顫發生率的影響 結果見表1。

表1 對冠脈結扎誘發的心律失常模型大鼠早搏出現時間、室速和室顫發生率的影響 (±s，n=10)

表1 對冠脈結扎誘發的心律失常模型大鼠早搏出現時間、室速和室顫發生率的影響 (±s，n=10)

注:與模型組比 *P＜0.05 ，＊＊P ＜0.01。

發生率/%組別 劑量/(g/kg)早搏出現時間/s 早搏 室速 室顫假手術組 —— 374.0±11.3 30＊＊ 0＊＊ 0＊＊模型組 —— 348.3±34.6 100 100 70穩心顆粒組 4.86 388.8 ±28.6*100 60* 50寧心律康顆粒小劑量組 8.10 386.5 ±32.6 100 80 60中劑量組 16.20 395.2 ±30.2*100 60* 40*大劑量組 32.40 410.0 ±25.0＊＊100 30＊＊ 20＊＊

由表1可見，各組大鼠行冠狀動脈結扎術后，均出現早搏，部分出現室速甚至室顫。而寧心律康顆粒各劑量組能夠顯著延長冠脈結扎大鼠出現早搏的時間，并且降低室速及室顫的發生率，其中大、中劑量組與模型組比有顯著性差異(P＜0.01，P＜0.05)，說明寧心律康顆粒能夠顯著延長冠狀動脈結扎誘發的大鼠出現早搏的時間，減少室速及室顫的發生，有效地對抗急性心肌缺血誘發的心律失常。

2.2 對冠脈結扎誘發的心律失常模型大鼠血清SOD、MDA和NO量的影響 結果見表2。

表2 冠脈結扎誘發的心律失常模型大鼠血清SOD、MDA和NO量的影響( ±s，n=10)

表2 冠脈結扎誘發的心律失常模型大鼠血清SOD、MDA和NO量的影響( ±s，n=10)

注:與模型組比 *P ＜0.05，＊＊P ＜0.01。

組別 劑量/(g/kg) MDA/(nmol/mL) SOD/(U/mL) NO/(μmol/L)假手術組 —— 1.575 ±0.386＊＊ 96.262±20.049＊＊ 9.373±1.094*模型組 —— 2.288 ±0.572 69.667±15.480 7.350±1.101穩心顆粒組 4.86 1.729 ±0.463* 88.221 ±16.869* 8.421 ±0.945*寧心律康顆粒小劑量組 8.10 2.021 ±0.675 84.029 ±19.791 8.014 ±1.028中劑量組 16.20 1.758 ±0.433* 88.579 ±19.055* 8.668 ±1.221*大劑量組 32.40 1.613 ±0.328＊＊ 93.588±16.715＊＊ 8.906±1.221*

由表2可見，冠狀動脈結扎后，各組大鼠SOD、NO量明顯降低，MDA量明顯增高，其中模型組與假手術組比有顯著性差異(P＜0.01);而寧心律康顆粒各劑量組SOD、NO量明顯增高，MDA量明顯降低，其中大、中劑量組與模型組比有顯著性差異(P＜0.01，P＜0.05)，說明寧心律康顆粒能夠顯著抑制氧自由基損傷，調節NO水平，有效地對抗急性心肌缺血誘發的心律失常。

3 討論

冠狀動脈左前降支結扎造成心肌缺血誘發心律失常是由于傳導障礙而產生單向傳導阻滯和興奮折返的結果，該模型與臨床急性心肌梗死的病人產生的心律失常很相似［2］。心肌缺血誘發心律失常的發生機制是多個因素共同作用的結果，主要與心肌細胞電生理改變，鈣超載，自由基損傷等有關，可誘發室性早搏和室性心動過速，也可發生室顫。

心肌細胞缺血、缺氧時氧自由基生成系統潛在活性增強，氧自由基生成增多，同時缺血組織細胞內自由基清除物質生成漸漸減少，而消耗增多，結果使氧自由基在缺血的組織中蓄積，從而造成心肌缺血損傷，進而誘發致死性心律失常。氧自由基導致心律失常的機制還不清楚，可能是由于氧自由基造成心肌細胞細胞膜上的不飽和脂肪酸發生脂質過氧化反應，破壞細胞膜的完整性，從而使心肌細胞膜離子通道功能異常有關，如:① 細胞內鉀離子外流，胞外鉀不能被泵入細胞內，細胞內外離子分布不平衡，造成跨膜靜息電位增加，導致心肌膜電活動不穩定性增加;②鈣離子持續內流增加使心肌細胞的自律性加強，誘發后除極;③部分去極化的鈉通道使內向電流增加，造成單個或一組細胞的潛在自動去極化傾向，細胞自律性加強［3-5］。

NO是在心血管系統具有十分重要作用氣體信號分子。它不僅來源于血管內皮細胞和平滑肌細胞，而且亦來源于非腎上腺素能和非膽堿能神經末梢。NO具有擴張冠脈血管，增加心肌細胞灌流量;降低心肌收縮力，減少心肌耗氧量的作用能夠減輕心律失常發作的嚴重程度。同時NO激活鳥苷酸環化酶(GC)，調節心肌細胞內cGMP、cAMP水平，通過cGMP依賴的蛋白激酶減少緩慢內向鈣電流，阻滯通過肌纖維膜上L型鈣通道(CaL)的鈣離子內流，抑制房室結上異丙腎上腺素激活的鈣通道(ICa)活性，減少心肌缺血誘發的鈣超載，抑制心律失常的發生［6-8］。

本實驗研究表明寧心律康顆粒能夠顯著抑制氧自由基損傷，調節NO水平，從而有效地對抗急性心肌缺血誘發的心律失常。但其對具體離子通道的影響還要進一步深入研究。

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