河南省宮頸病變人乳頭瘤病毒感染分布及基因分型

夏慶欣 魏 冰 盧紅梅 馮 穩 (鄭州大學附屬腫瘤醫院 河南省腫瘤醫院病理科，河南 鄭州 45004)

人乳頭瘤病毒(human pap illomavirus，HPV)是定向感染人體皮膚及黏膜復層鱗狀上皮細胞的一類乳頭瘤病毒。根據HPV基因序列不同，目前已分離出120多種亞型，約40種涉及生殖道感染，20種與腫瘤有關。HPV根據生物學特征、致癌潛能可分為高危型和低危型。HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68 屬于高危型，高危型與子宮頸癌上皮內高度病變及惡性變的發生相關〔1〕;HPV6、11、42、43、44 屬于低危型，低危型不整合于細胞基因組中，主要引起疣的發生。HPV的感染具有很強的地域性，世界范圍內不同國家或地區HPV的感染率及基因分型分布均存在差異。因此明確HPV在特定地區及不同病變宮頸組織的感染率及基因分型分布差異，及早發現高危型HPV感染和及早治療宮頸上皮內瘤樣病變(CIN)患者以阻斷宮頸癌的發生，對HPV所致疾病的預防和HPV疫苗開發應用有著重要的指導意義。

1 材料與方法

1.1 研究對象 2009年3月至2010年10月河南省腫瘤醫院婦科門診、體檢中心及婦科病房接受婦科檢查及治療的女性2 273人，年齡18～82歲，所有患者均經宮頸活檢行病理組織學檢查證實。

1.2 標本采集 采用統一標準收集宮頸細胞，放入加有CytoRich轉移液的小瓶內，以待檢測HPV DNA和HPV分型。

1.3 方法 DNA提取、PCR擴增、HPV分型檢測采用核酸分子導流雜交系統(凱普生物科技有限公司，廣州)對21種常見的HPV基因型進行分型檢測，操作過程嚴格按說明書進行。

1.4 統計學方法 采用SPSS15.0軟件統計進行χ2檢驗。

2 結果

2 273例研究樣本中，951例(41.84%)感染不同型別的HPV，其中CIN病變201例(21.14%，201/951)、宮頸鱗癌512例(53.84%，512/951)、非腫瘤性病變238例(25.03%，238/951)。1 322例(58.16%)未感染 HPV，其中 CIN病變94例(7.11%，94/1 322)、宮頸鱗癌354 例(26.78%，354/1 322)、其他非腫瘤性病變874例(66.12%，874/1 322)。本組HPV感染模式為清晰地單峰分布。總感染高峰從25歲開始，逐漸上升，持續到45歲開始下降，高危型及低危型感染率與年齡峰值接近。見圖1。年齡組間的差異無統計學意義(P=0.318)。

圖1 HPV感染亞型在各年齡組間分布

本組951例感染中，雙重感染77%;有189例呈多重HPV亞型感染，占總感染率的17.87%，其中三重感染，四重感染2%，五重感染2%。

本組HPV 16的感染率29.17%，位于第1位;其后依次是HPV 18(4.58%)、HPV 58(3.17%)、HPV 52(2.64%)、HPV 31(1.72%)等。1 112例呈炎性反應改變的婦女中，238例(21.22%)檢測到HPV感染，其中87例感染高/可能高風險的HPV病毒類型，151例感染低/未知風險的病毒類型。

3 討論

HPV 亞型的檢測，在臨床處理中具有重要的分流管理作用。當高危型HPV陽性時，須進一步行陰道鏡檢查，再根據陰道鏡結果做相應處理;若高危型HPV陰性，可重復行細胞學檢查，根據細胞學結果給予相應處理，避免延誤診治。因此，HPV亞型檢測使目前的宮頸防癌篩查具備了更嚴謹的科學性及準確性。HPV感染是宮頸癌發生的主要因素，故采用HPV疫苗是防治宮頸癌的最根本方法。2006年6月，美國食品與藥品管理局(FDA)正式批準Gardasil宮頸癌預防性疫苗上市，標志著宮頸癌防治已進入了一級預防，國外宮頸癌以HPV16和18型感染為主〔3〕，因此世界上第一個二價腫瘤疫苗，也主要針對HPV16、18型。然而HPV感染亞型分布在全球存在明顯的地區差異，在我國尚缺乏系統的、全面的、科學的HPV型別地區分布情況數據，能否直接使用成品二價疫苗及預防感染的有效性需要進一步評估。

張東紅〔4〕的研究表明，HPV的型別分布在我國存在一定地區性，總體上以高危型 HPV16、HPV58、HPV18、HPV52 和HPV33為主。高危型HPV16是我國最為常見的感染型別，在所有HPV感染型別中占33.54%，且在南、北方地區均位居所有型別的第 1 位〔5～8〕;其他常見型別依次是 HPV58、HPV18、HPV52和HPV33等。在長江以北，HPV58、HPV52型分別占第2、3位，而HPV18占第4位。長江以南，HPV18、HPV58分別占第2、3位，而 HPV52型位于第 4位，其他型別如 HPV33、HPV53、HPV31、HPV66型與北方差異不大。本組研究顯示HPV16的感染率29.17%，位于第1位，和國內其他研究組的結果基本吻合，并隨著宮頸病變的危險度呈正比例增加，說明在宮頸疾病的發展過程中HPV16的感染起到積極地促進作用;其后 依 次 是 HPV18(4.58%)、HPV58(3.17%)、HPV52(2.64%)、HPV31(1.72%)等;本研究結果顯示在河南省人群中以HPV16、18、58分布為主，其次為HPV52、HPV31等。對于HPV亞型的多重感染是否增加或促進宮頸癌變的發生一直是學者們關注的問題，本研究顯示多重感染率并未隨病變危險度的增加而變化，故認為在河南省HPV亞型的多重感染可能與本省宮頸癌的發生率無直接相關性，但本文觀察到在本組多重感染的189個病例中，同時合并HPV16型感染的有48例(25.4%)，是否存在由于機體免疫機能的缺陷而致多重感染，進一步導致高危亞型的感染機會增加或清除能力下降有待進一步研究。在一般人口中不同年齡組HPV感染的流行數據對設計疫苗接種和宮頸癌篩查策略尤為重要。全球范圍內的研究已經觀察到四種HPV感染的特定年齡流行曲線模式。第1種模式是單峰曲線，發生在年輕女性，與其他性傳播感染峰相同〔9～11〕;第2種模式是雙峰U型曲線，第1峰位主峰，位于年輕婦女，第 2 峰低些，位于中老年婦女〔9，12～14〕;第 3 種模式是所有成年年齡組都呈高峰，在印度、尼日利亞的調查中均觀察到〔6〕;而第4種模式是所有年齡組的患病率都呈低峰〔6〕。本研究顯示河南婦女HPV感染模式為清晰地單峰曲線分布，總感染高峰從25歲開始，逐漸上升，持續到45歲開始下降，高危組及低危組感染的年齡峰值類似。說明在性生活活躍期感染幾率增加，因此對于已婚婦女進行HPV的常規檢查應成為宮頸癌防治中的重要內容，而預防HPV的感染和計劃接種疫苗應提前在青少年期進行。

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