磷霉素與9種抗菌藥物分別聯用對不動桿菌的體外抗菌活性研究

楊瑩瑩，王鎮山，薛 欣，聶大平，李玉中

(1.大連醫科大學 附屬第二醫院 呼吸科，遼寧 大連 116027；2.鳳城市中心醫院 內科，遼寧 丹東 118100；3.大連醫科大學 附屬第二醫院 檢驗科，遼寧 大連 116027)

近年來，隨著廣譜抗菌藥物的廣泛使用或濫用，出現了多重耐藥甚至是泛耐藥菌株，多重耐藥性不動桿菌感染的治療問題迫在眉睫。磷霉素化學結構特異，除了具有廣譜抗菌作用外，還具備良好的酶穩定性、無交叉耐藥性。國外有學者報道，磷霉素與其它抗菌藥物在體外聯合應用具有協同抗菌效應[1,2]。本文研究磷霉素與9種抗菌藥物體外聯合藥敏，為臨床聯合用藥提供實驗室依據。

1 材料和方法

1.1 材 料

1.1.1 菌株：收集自2008年2月～2009年10月大連醫科大學附屬第二醫院臨床患者的痰標本，經API 鑒定系統鑒定為不動桿菌47株。標準參考菌株為ATCC25922，由中國藥品生物制品檢定所提供。

1.1.2 培養基：MH(A)培養基及胰蛋白胨大豆肉湯均為北京奧博星生物技術有限責任公司產品，批號分別為20061125和20070202。

1.1.3 抗菌藥物：磷霉素(fosfomycin,FOM)為東北制藥總廠產品，每支2.0 g，批號為0907119；阿米卡星(amikacin,AMK)為上海禾豐制藥有限公司產品，每支0.2 g，批號為090702；頭孢他啶(ceftazidime,CAZ)為韓美藥品株式會社產品，批號為10G081209；頭孢哌酮/舒巴坦(cefoperazone/sulbactam)為輝瑞制藥有限公司產品，批號為95839074；頭孢吡肟(cefepime,FEP)為深圳信立泰藥股份有限公司產品，批號為20090508；亞胺培南/西司他丁(imipenem and cilastatin)為杭州默沙東制藥產品，批號為09277；左氧氟沙星(levofloxacin,LVLX,效價99.7%)、環丙沙星(ciprofloxacin,CPLX,效價84.2%)、美羅培南(meropenem,MEM,效價87.76%)、頭孢呋辛(cefuroxime,CXM,效價92%)為中國藥品生物制品檢定所產品。

1.2 方 法

1.2.1 測定單獨應用時的最低抑菌濃度(MIC)：瓊脂二倍稀釋法測定磷霉素與其它9種抗菌藥物的MIC。

1.2.2 測定聯合應用時的MIC：按1∶1的濃度比例，瓊脂二倍稀釋法測定磷霉素與9種抗菌藥物分別聯用的MIC。

1.2.3 計算部分抑菌濃度(FIC)指數：FIC指數=A藥聯合時的MIC/A藥單用時的MIC+B藥聯合時的MIC/B藥單用時的MIC。

1.2.4 判定標準：FIC指數≤0.5為協同作用；0.52為拮抗作用。

2 結 果

2.1 磷霉素和其它9種抗菌藥物單獨應用對47株不動桿菌的體外抗菌活性

如表1所示，根據CLSI制定的耐藥標準[3]，磷霉素、左氧氟沙星、環丙沙星、頭孢呋辛、頭孢他啶、頭孢哌酮/舒巴坦、頭孢吡肟、阿米卡星對不動桿菌的MIC50、MIC90均顯示耐藥，美羅培南、亞胺培南/西司他丁對不動桿菌的MIC50均顯示中介。

表1 磷霉素與其它9種抗菌藥物單獨應用對47株不動桿菌的體外抗菌活性

2.2 磷霉素與其它9種抗菌藥物分別聯用對47株不動桿菌的體外抗菌活性

如表2所示，磷霉素與這9種抗菌藥物分別按1∶1聯用對47株不動桿菌的MIC50值均有所下降，其中除左氧氟沙星及頭孢哌酮/舒巴坦MIC50值下降至原值1/2外，其余均降至原值的1/4或1/4以下。

表2 磷霉素與其它9種抗菌藥物分別聯合應用對47株不動桿菌的體外抗菌活性

藥物聯合比例為1∶1

2.3 磷霉素與其它9種抗菌藥物分別聯用的體外相互作用所占比例

如表3所示，磷霉素與9種抗菌藥物分別按1∶1聯用后協同/相加作用的比例大于無關作用的比例，未見拮抗作用，尤其是磷霉素與阿米卡星聯用后，使后者由耐藥變成敏感。

表3 磷霉素與9種抗菌藥物分別聯用的體外相互作用所占比例

3 討 論

近年來隨著廣譜抗菌藥物的廣泛使用或濫用，細菌耐藥率呈逐漸上升趨勢，常呈現多重耐藥性甚至泛耐藥性[4]。有報道磷霉素與其它抗菌藥物聯合應用可增加后者的抗菌活性。

本研究結果顯示，磷霉素與其它9種抗菌藥物雖然對不動桿菌的MIC值較高，僅美羅培南、亞胺培南/西司他丁顯示中介，其余均顯示耐藥；但磷霉素與這9種抗菌藥物分別聯合應用后，各自的MIC值均有所降低，以協同或相加作用為主，增強了后者的抗菌活性。尤其是磷霉素與阿米卡星聯用后，使后者由耐藥變成敏感，可能與近年來阿米卡星使用較少有關。

磷霉素屬于細菌繁殖期快速殺菌劑，抗菌譜廣，對革蘭陽性球菌及革蘭陰性桿菌均有殺滅作用；其化學結構簡單而獨特，不易被細菌轉化為菌體內有用的物質，與其它抗菌藥物無交叉耐藥性；分子小，滲透性強，細菌改變膜通透性對其作用影響不大；磷霉素作用于細菌細胞壁合成的第一步，因其化學結構與細菌細胞壁粘肽合成初期的烯醇式丙酮酸轉移酶(EP轉移酶)的底物磷酸烯醇丙酮酸(PEP)相似，競爭性抑制使該轉移酶失活，阻抑了粘肽合成的第一步，從而抑制細菌細胞壁的早期合成，破壞其完整性，有利于其它抗菌藥物進入細菌體內，通過不同的作用機制而殺滅細菌；能夠破壞細菌生物被膜或抑制其形成[5,6]。本研究為磷霉素與其它抗菌藥物聯合應用提供了理論依據。

參考文獻:

[1] Grif K，Dierich MP，Pfaller K，et al.In vitro activity of fosfomycin in combination with various antistaphyloccal substances[J].J Antimicrob Chemother,2001,48(2):209-217.

[2] Kastoris AC，Rafailidis PI,Vouloumanou EK，et al.Synergy of fosfomycin with other antibiotics for Gram-positive and Gram-negative bacteria[J].Eur J Clin Pharmacol,2010,66(4):359-368.

[3] Clinical and Laboratory Standards Instiute (CLSI)/NCCLS[S].Performence stcmdards for antimicrobial susceptibility testing stamdards:nighteenth informational supplement,2009.M100-S19.

[4] 梁慶華.鮑曼不動桿菌的臨床分布特征及耐藥趨勢分析[J].實驗與檢驗醫學,2009,27(2):185-186.

[5] 黃祥,王建民,李勇.磷霉素的藥動學藥效學特性與臨床應用[J].中國醫院藥學雜志,2005,25(2):156-158.

[6] 連家建,唐青云.磷霉素鈉與其他抗菌藥聯用的協同作用及其臨床應用[J].國外醫藥(抗生素分冊)，2003,24(1):44-46.