兩種方法檢測健康人餐后GLP-1分泌情況的比較

史視明，劉亞輝，馬 亮，吳麗麗

(1.唐山市協和醫院 內分泌科，河北 唐山 063000; 2. 唐山市協和醫院 檢驗科，河北 唐山 063000)

經典糖尿病病理生理學的研究顯示糖尿病的發生與胰島β細胞功能衰退及胰島素抵抗相關。根據此基礎，目前國際、國內采用1996年WHO標準—75 g口服葡萄糖耐量試驗(OGTT)，來診斷糖尿病和了解胰島β細胞功能。

研究發現，在口服葡萄糖耐量試驗中，腸促胰素(incretin)促使的餐后胰島素釋放量約占整個胰島素分泌總量的50%[1]。腸促胰素包括葡萄糖依賴性促胰島素分泌多肽(Glucose dependent insulinotropic polypeptide， GIP) 和胰升糖素樣肽-1(Glucagon-like peptide-1，GLP-1)。腸促胰素是一類在食物營養物質刺激下，由腸道內分泌細胞合成分泌的激素，可通過促進β細胞的胰島素分泌、抑制α細胞不適當的胰升糖素分泌、延緩胃排空及抑制食欲等多個途徑參與機體血糖穩態調節。大量研究表明，以腸促胰索為基礎的治療方案，包括GLP-1類似物和二肽基肽酶4(DPP-4)抑制劑將為2型糖尿病的治療開辟一條新的途徑[2]。臨床需要對糖尿病患者的GLP-1分泌情況深入研究，以便更好地指導治療。本研究旨在觀察健康人在100 g饅頭餐試驗和75 g OGTT時，胰島素和GLP-1的分泌情況。

1 資料與方法

1.1 研究對象

2011年1月在唐山市協和醫院職工中選擇10名健康志愿者，男性5例，女性5例。年齡30～40歲，體重指數<28 kg/m2。空腹靜脈血糖<5.6 mmo/L、餐后2 h靜脈血糖<7.8 mmol/L，糖化血紅蛋白<5.4%，肝功能、腎功能、血脂、電解質、血常規、尿常規正常。血壓正常。無糖尿病家族史，未使用任何藥物。所有受試者在接到口頭與書面通知后均同意參加。

1.2 研究方法

受試者過夜空腹8～10 h，第1天早上8:00時，行75 g OGTT，將75 g葡萄糖稀釋成25%濃度液體，并在10 min內服用完畢；第7天，受試者過夜空腹8～10 h，早上8:00空腹開始進行100 g標準粉饅頭餐試驗。均于空腹、餐后30、60、120 和180 min靜脈取血測定血糖、血漿胰島素和GLP-1(7-36)。血糖采用葡萄糖氧化酶法，胰島素測定用電化學發光免疫分析法。GLP-1(7-36)應用含EDTA的預冷試管并置于冰浴中，采用酶聯免疫吸附法測定，采血后立即離心，血漿保存于-20℃，直至分析。

計算血糖、胰島素、GLP-1的曲線下面積(AUC)[曲線下面積=1/2(空腹值+3 h值)+30 min值+1 h值+2 h值]。

1.3 統計學方法

2 結 果

10名正常人群中，OGTT試驗和饅頭餐試驗過程中各點的血糖水平未見明顯差異(P>0.05), OGTT試驗時血糖30 min達峰，100 g饅頭餐試驗時血糖60 min達峰。見表1、圖1。

表1 OGTT和100 g饅頭餐試驗中血糖水平比較

圖1 OGTT試驗和100 g饅頭餐試驗中血糖水平比較

10名正常人群中，OGTT試驗和饅頭餐試驗過程中各點的胰島素水平，OGTT試驗30 min時胰島素達峰，100 g饅頭餐試驗時胰島素60 min達峰，與血糖達峰時間相同；100 g饅頭餐試驗時胰島素曲線下面積大于OGTT試驗時胰島素曲線下面積(P<0.05)。見表2、圖2。

10名正常人群中，饅頭餐試驗中60 min后的餐后GLP-1升高幅度和曲線下面積大于OGTT試驗中相應數值(P均<0.05)。見表3、圖3。

表2 OGTT試驗和100 g饅頭餐試驗中胰島素水平比較

表3 OGTT試驗和100g饅頭餐試驗中GLP-1水平比較

圖2 OGTT試驗和100 g饅頭餐試驗中胰島素水平比較

圖3 OGTT試驗和100g饅頭餐試驗中胰升糖素樣肽-1水平比較

3 討 論

胰島素是由胰島β細胞受內源性物質胰升糖素、腸促胰素等激素或外源性物質如葡萄糖、乳糖等刺激而分泌的。

有研究發現，盡管靜脈注射葡萄糖可達到比口服葡萄糖更高的血糖水平，但口服葡萄糖卻能引起更強的胰島素分泌反應，證實了口服葡萄糖可以引起腸道釋放“腸促胰素”，促進胰島素分泌，調節血糖水平。GLP-1和GIP是兩種主要的腸促胰島激素，以葡萄糖依賴的方式調節β細胞的胰島素分泌和α細胞的胰升糖素分泌，從而維持血糖的穩定。GIP和GLP-1引起的胰島素分泌反應稱為腸促胰素效應，至少占口服葡萄糖后引起的胰島素分泌總量的50%[1]。

進餐后GLP-1分泌呈雙相性。第一時相，攝食后數分鐘，通過神經內分泌機制介導，觸發GLP-1分泌；第二時相,腸道中的營養性物質(葡萄糖、脂肪、蛋白質)直接激活，遠端回腸和升結腸內的L細胞，分泌GLP-1[3-4]。

Bagger JI等[5]研究表明，健康人隨著葡萄糖負荷量的增加，GLP-1分泌增加；Vollmer K等[6]研究表明， 75 g葡萄糖負荷與混合餐負荷后GLP-1增加的量不同。2型糖尿病患者GLP-1分泌增加的幅度較低，導致餐后血糖過度升高。

OGTT試驗中的75 g葡萄糖和饅頭餐試驗中100 g面粉熱卡含量相同，均為300千卡[6]。兩種試驗后血糖數值相仿，因此兩種試驗在臨床工作中均廣泛應用，以評價糖代謝情況和胰島β細胞功能[7]。

本研究表明，在健康人群中，與OGTT試驗比較，饅頭餐試驗時血糖的峰值較低， GLP-1升高幅度大，胰島素曲線下面積大。

葡萄糖為單糖，大部分在胃、近端空回腸吸收，餐后血糖達峰快，到達遠端回腸、結腸部分比較少，對L細胞刺激作用弱，腸道細胞分泌GLP-1少。

血糖和GLP-1兩者共同促進胰島素分泌，在饅頭餐試驗中，雖然血糖相對低，但GLP-1、胰島素分泌總量高，表明饅頭餐試驗中GLP-1對胰島β細胞刺激作用大于OGTT中的作用。

OGTT試驗中，病人服用的葡萄糖為單糖，可直接由近端小腸吸收，對L細胞刺激作用弱，腸道細胞分泌GLP-1相對少。饅頭餐試驗中病人服用的面粉為多糖，需要經過小腸的消化分解為單糖或雙糖進行吸收，在遠端回腸、結腸的吸收量相對較多，對腸促胰素GLP-1的刺激作用增強，因此饅頭餐試驗中餐后GLP-1升高幅度大于OGTT試驗中相應數值。

本研究結果提示，饅頭餐試驗中餐后GLP-1水平可以更真實地反應生理性餐后GLP-1水平和胰島素水平。在臨床工作中，在常規檢查OGTT試驗、胰島素釋放試驗的同時，還可以常規檢查GLP-1應答水平，以深入了解糖尿病患者的病因和指導臨床治療。

參考文獻：

[1] Toft-Nielsen, Damholt, Madsbad， et al. Determinants of the Impaired Secretion of Glucagon Like Peptide-1 in Type 2 Diabetic Patients[J]. Clin Endocrinol Metab, 2001, 86(8): 3717-3723.

[2] 寧光. 腸促胰素在血糖穩態調節和2型糖尿病治療中的作用[J].中華內分泌代謝雜志，2010,26：增錄9b-1-增錄9b-4.

[3] 李小英.從腸促胰素分泌機制看胰高糖素樣肽1在2型糖尿病治療中的作用[J]. 中華內分泌代謝雜志，2011,27：增錄4a-1-增錄4a -4.

[4] Nauck MA, Vardarli I, Deacon CF,et al. Secretion of glucagon-like peptide-1 (GLP-1) in type 2 diabetes: what is up, what is down? [J]. Diabetologia, 2011, 54(1):10-18.

[5] Bagger JI, Knop FK, Lund A, et al. Impaired regulation of the incretin effect in patients with type 2 diabetes[J]. J Clin Endocrinol Metab,2011, 96(3): 737-745.

[6] Vollmer K, Holst JJ, Baller B, et al. Predictors of incretin concentrations in subjects with normal, impaired, and diabetic glucose tolerance[J]. Diabetes,2008, 57(3):678-687.

[7] 張紅杰，紀立農. 口服葡萄糖耐量試驗與饅頭餐試驗對2型糖尿病病人血糖代謝及酮癥發生的影響[J].中國糖尿病雜志, 2003, 11: 275-277.

[8] 胰島B細胞功能協作組.正常人饅頭餐試驗過程中血糖、胰島素、C肽的觀察[J].中華醫學雜志, 1982, 62(11): 643-647.