慢性鋁中毒對大鼠肝臟功能及結(jié)構(gòu)的影響

周喜漢 許建國 黃贊松 馬迎教 曹聰

鋁中毒對神經(jīng)系統(tǒng)的毒性已經(jīng)被許多研究所證實(shí)[1-3]。但目前關(guān)于鋁中毒對肝臟結(jié)構(gòu)和功能影響的報(bào)道甚少，本試驗(yàn)通過連續(xù)腹腔注射三氯化鋁法，建立大鼠鋁中毒模型，通過對血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)和γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(GGT)的測定及肝臟組織學(xué)的觀察，旨在探討鋁中毒對大鼠肝臟結(jié)構(gòu)及功能的影響。

1 資料與方法

1.1 動物 由廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供20只活動能力相近、體重210～228 g的健康成年SD清潔級大鼠(實(shí)驗(yàn)動物許可證號:SCXK桂2003-0003)，將實(shí)驗(yàn)大鼠適應(yīng)喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為2組，即空白對照組、鋁中毒組。每組10只，雌雄各半，分籠飼養(yǎng)，自由進(jìn)食及飲水。

1.2 試劑 結(jié)晶氯化鋁分析純(AlCl3·6H2O，相對分子質(zhì)量241.43)，西安化學(xué)試劑廠產(chǎn)品，批號:010615。

1.3 動物模型的建立及給藥方法 參照文獻(xiàn)[4]的方法制作大鼠鋁中毒模型，即將AlCl3溶液用蒸餾水配制，濃度為10 g/L。AlCl3水溶液高壓滅菌后，以6 mg/(kg·d)的劑量給實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行腹腔注射，給空白對照組腹腔注射等量(0.4 ml/只)滅菌生理鹽水。連續(xù)注射3 d，間隔1 d再注射，全程共60 d。1.4 樣本采集及制備

1.4.1 肝臟功能相關(guān)指標(biāo)的檢測 分別于第4和8周末取尾靜脈血約1.5 ml，分離血清，測定丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)和 r-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(GGT)等肝功能指標(biāo)。測定試劑盒由南京建成生物工程研究所提供，測定嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.4.2 肝組織病理學(xué)觀察 取第8周末處死的大鼠肝組織標(biāo)本，用福爾馬林固定，4～5 μm石蠟切片，HE染色，用光學(xué)顯微鏡觀察病理學(xué)改變。

2 結(jié)果

2.1 鋁中毒對肝臟功能的影響 由表1可見第4、8周末染鋁組的ALT、AST均高于空白對照組，(P＜0.01);GGT在組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

2.2 鋁中毒大鼠肝組織病理學(xué)的影響 空白對照組:肝細(xì)胞圍繞中央靜脈呈索狀整齊排列。肝細(xì)胞大小一致，細(xì)胞界膜清楚，匯管區(qū)無炎細(xì)胞反應(yīng)(見插圖1);鋁中毒組:中央靜脈高度擴(kuò)張充血，細(xì)胞排列紊亂，細(xì)胞腫脹，胞漿疏松化及空泡變性，出現(xiàn)灶狀壞死，炎細(xì)胞浸潤明顯，有纖維組織增生(見插圖2)。

圖1 空白對照組肝組織病理檢查

圖2 鋁中毒組肝組織病理檢查

3 討論

生活環(huán)境中鋁的廣泛存在和在日常生活中人們接觸鋁的機(jī)會增多，導(dǎo)致過多的鋁進(jìn)入體內(nèi)會引起鋁中毒。鋁是一種慢性蓄積性毒性物質(zhì)，在體內(nèi)主要以Al(H2O)3+與轉(zhuǎn)鐵蛋白、白蛋白、枸椽酸離子相結(jié)合，對人體健康造成重大危害[5]。肝臟對來自體內(nèi)和體外的許多非營養(yǎng)性物質(zhì)如各種藥物、毒物以及體內(nèi)某些代謝產(chǎn)物，具有生物轉(zhuǎn)化作用。當(dāng)肝臟受到體外毒物及其他不良因素的侵害時(shí)，其結(jié)構(gòu)將受到不同程度的損害，進(jìn)而引起相應(yīng)的代謝紊亂。血清氨基轉(zhuǎn)移酶是肝細(xì)胞損傷的敏感指標(biāo)，肝臟是ALT和AST這兩種酶富含的組織，它們血清活性是肝臟疾病臨床評價(jià)最常用的指標(biāo)，正常情況下兩種血清氨基轉(zhuǎn)移酶的濃度很低，ALT和AST血清水平的升高與富含氨基轉(zhuǎn)移酶的組織細(xì)胞的損傷或者破潰，或者細(xì)胞膜通透性的變化使ALT和AST漏入血中有關(guān)。有研究表明，用AlCl3經(jīng)腹腔染毒雛雞8周后發(fā)現(xiàn)肝臟中鋁含量顯著增加，血清中ALT和AST活力顯著提高，同時(shí)肝細(xì)胞有病理改變[6]。本研究結(jié)果與上述報(bào)道一致，在鋁中毒大鼠肝臟結(jié)構(gòu)受損，肝細(xì)胞腫大、變性、壞死，肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整性遭到破壞，肝細(xì)胞內(nèi)的ALT和AST透過細(xì)胞膜進(jìn)入血液，使外周血中的ALT和AST含量升高，這種變化與肝臟病理組織學(xué)結(jié)構(gòu)變化的觀察結(jié)果一致。由此可見，鋁中毒對大鼠肝臟結(jié)構(gòu)及功能有一定的影響，對中央靜脈周圍的肝細(xì)胞損傷比較嚴(yán)重，應(yīng)該引起人們的密切關(guān)注。

[1]王繼芬，康朝勝，臧貴勇，等.慢性鋁中毒對大鼠海馬CA3區(qū)ChAT陽性神經(jīng)元的影響.貴陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2010，35(6):561-563.

[2]顧慶云，張立超，李心慰，等.亞慢性鋁中毒對雛雞大腦神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響.中國家禽，2010，32(2):12-14.

[3]孫巖，陳海.針刺對鋁中毒SD癡呆大鼠腦組織內(nèi)細(xì)胞凋亡及Bcl-2影響的實(shí)驗(yàn)研究.河南中醫(yī)，2010，30(8):752-754.

[4]李秋營，楊艷旭，張?zhí)珡?qiáng)，等.實(shí)驗(yàn)性大鼠鋁中毒模型建立.山西醫(yī)藥雜志，2002，31(2):113-115.

[5]劉萍.DFP的合成、排鋁作用及對慢性荷鋁動物的保護(hù)機(jī)制的研究.山東大學(xué)2007年博士學(xué)位論文.

[6]胡崇偉，王奔，李靜，等.亞慢性鋁暴露對雛雞肝臟結(jié)構(gòu)與功能的影響.中國獸醫(yī)雜志，2010，46(8):38-39.