火龍果的組培快繁研究

劉 穎，劉艷軍，黃俊軒，王丹丹

（1.天津市北辰區(qū)種植業(yè)發(fā)展服務(wù)中心，天津 300400；2.天津農(nóng)學(xué)院園藝系，天津 300384）

火龍果（Hylocereus undatus）又稱紅龍果、芝麻果、仙蜜果、青龍果等，為仙人掌科量天尺屬的果用栽培種。該植物原產(chǎn)于中美洲熱帶地區(qū)，20世紀(jì)80年代末90年代初由美洲引種到臺(tái)灣，經(jīng)臺(tái)灣改良引進(jìn)海南省及大陸南部廣西、廣東等地栽培[1-2]。花與果均可食用，是當(dāng)?shù)貍鹘y(tǒng)的食物和重要的經(jīng)濟(jì)作物。火龍果外觀獨(dú)特，色澤艷麗，果肉鮮美脆甜，富含維生素 B1、B2、B3、C、葡萄糖、礦物質(zhì)及多種微量元素，具有低脂肪、高纖維素、低熱量等特點(diǎn)，深受人們的歡迎[3-5]。近年來(lái)，華南地區(qū)相繼引種，種植面積不斷擴(kuò)大。目前生產(chǎn)上大多采用扦插或嫁接繁殖[6-7]，發(fā)展速度相對(duì)較慢，且易產(chǎn)生變異。采用離體培養(yǎng)快速繁殖種苗已在多數(shù)園藝植物上得到廣泛應(yīng)用，而有關(guān)火龍果離體培養(yǎng)技術(shù)研究的報(bào)道尚少[8]。筆者以火龍果帶剌座的幼嫩莖段為外植體，進(jìn)行了增殖快繁技術(shù)研究，旨在建立火龍果快繁體系，為其栽培繁殖奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

供試火龍果品種由天津農(nóng)學(xué)院園林植物實(shí)驗(yàn)室提供。

1.2 方法

1.2.1 外植體的制備。從生長(zhǎng)健壯的火龍果植株上切取幼嫩的肉質(zhì)莖，用手術(shù)刀將其切成2～3 cm的莖段，每個(gè)莖段上帶4～5個(gè)刺座。先用70%酒精將外植體打濕，用0.1%的升汞消毒10 min后，用無(wú)菌水反復(fù)沖洗5次，每次沖洗15 min。將沖洗后的火龍果外植體放在1/2MS培養(yǎng)基上預(yù)培養(yǎng)7 d。

1.2.2 增殖培養(yǎng)。增殖培養(yǎng)基配方：MS+KT 0.50 mg/L+IAA 0.50 mg/L （M1），MS+KT 1.00 mg/L+IAA 0.50 mg/L（M2），MS+KT 1.50 mg/L+IAA 0.50 mg/L（M3），MS+6-BA 1.00 mg/L+IAA 0.50 mg/L（M4），MS+6-BA 3.00 mg/L+IAA 0.50 mg/L （M5），MS+6-BA 5.00 mg/L+IAA 0.50 mg/L（M6）。每個(gè)培養(yǎng)基添加3.0%蔗糖和0.7%瓊脂，并調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH至5.8。將預(yù)培養(yǎng)的火龍果外植體接種到增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度（25±2）℃，12 h光照，光照強(qiáng)度2 000 Lx。培養(yǎng)30 d后隨機(jī)對(duì)每60個(gè)剌座再生芽進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，計(jì)算平均每個(gè)剌座的增殖系數(shù)。

1.2.3 火龍果的伸長(zhǎng)培養(yǎng)。伸長(zhǎng)培養(yǎng)基配方：MS+6-BA 0.25 mg/L+IAA 0.25 mg/L（S1），MS+6-BA 0.50 mg/L+IAA 0.50 mg/L（S2），MS+6-BA 1.00 mg/L+IAA 1.00 mg/L（S3），MS+6-BA 1.50 mg/L+IAA 0.50 mg/L（S4），MS+6-BA 2.00 mg/L+IAA 1.00 mg/L（S5），MS+6-BA 2.50 mg/L+IAA 1.50 mg/L（S6），各培養(yǎng)基添加3.0%蔗糖和0.7%瓊脂，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH至5.8。從火龍果外植體上隨機(jī)切取60個(gè)增殖培養(yǎng)出的再生小芽，分別接種到伸長(zhǎng)培養(yǎng)基上進(jìn)行伸長(zhǎng)培養(yǎng)。培養(yǎng)溫度（25±2）℃，12 h光照，光照強(qiáng)度2 000 Lx。培養(yǎng)30 d后統(tǒng)計(jì)再生芽的生長(zhǎng)情況，計(jì)算平均每個(gè)芽的生長(zhǎng)高度及健壯程度。

1.2.4 火龍果的生根培養(yǎng)。生根培養(yǎng)基配方：1/2 MS+IAA 0.50 mg/L （R1），1/2MS+IAA 1.00 mg/L（R2），1/2MS+IAA 1.50 mg/L（R3），1/2MS+NAA 0.25 mg/L（R4），1/2MS+NAA 0.50 mg/L（R5），1/2MS+NAA 1.00 mg/L（R6），各培養(yǎng)基添加1.5%蔗糖和0.7%瓊脂，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH至5.8。切取在伸長(zhǎng)培養(yǎng)基上長(zhǎng)到4～5 cm高的健壯幼苗接種到生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，各取40株，培養(yǎng)溫度（25±2）℃，光照12 h，光照強(qiáng)度2 000 Lx。培養(yǎng)30 d后統(tǒng)計(jì)幼苗的生根數(shù)量和質(zhì)量。

2 結(jié)果與分析

2.1 植物激素種類和濃度對(duì)火龍果再生芽增殖的影響

由表1可知，M1、M4和M5均能使火龍果再生芽正常生長(zhǎng)，其中，M4、M5、M6芽的生長(zhǎng)情況明顯好于M1、M2、M3，且 M4、M5、M6的增殖系數(shù)高于 M1、M2和M3。表明植物激素6-BA較KT更有利于火龍果的增殖，不但再生芽的數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于KT所誘導(dǎo)的結(jié)果，而且再生芽的質(zhì)量也比KT誘導(dǎo)的再生芽更健壯，這可能是由于火龍果對(duì)不同分裂素的反應(yīng)不同所致，因此選擇6-BA用于誘導(dǎo)火龍果增殖比較理想。

較低或較高濃度的6-BA都不能獲得較高的增殖系數(shù)，當(dāng)其濃度在3.00 mg/L時(shí)再生效果最好，增殖系數(shù)達(dá)3.2，由于該試驗(yàn)所用IAA的濃度沒(méi)有變化，因此并不能確定此配方是火龍果增殖的最好配方，由于火龍果為肉質(zhì)莖，生長(zhǎng)較緩慢，如果增殖系數(shù)過(guò)高勢(shì)必導(dǎo)致培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，從而降低繁殖率，因此一般增殖系數(shù)在3.0左右就能保證其有效地進(jìn)行工廠化繁殖。

2.2 植物激素種類和濃度對(duì)火龍果再生芽伸長(zhǎng)的影響

由表2可知，隨著6-BA濃度的增大，火龍果再生苗的生長(zhǎng)速度呈先增長(zhǎng)后降低的趨勢(shì)，再生芽的質(zhì)量逐漸降低，說(shuō)明適當(dāng)?shù)?-BA濃度有利于火龍果的伸長(zhǎng)培養(yǎng)；當(dāng)6-BA與IAA的濃度比為1∶1時(shí)更有利于火龍果再生芽的伸長(zhǎng)培養(yǎng)，一般在進(jìn)行再生或增殖培養(yǎng)時(shí)，6-BA與IAA的濃度比偏高有利于分化，相反則利于生長(zhǎng)，在該試驗(yàn)中其適合比例為1∶1。

表2 不同伸長(zhǎng)培養(yǎng)基配方對(duì)火龍果再生芽伸長(zhǎng)生長(zhǎng)的影響

表3 不同生根培養(yǎng)基對(duì)火龍果小苗生根的影響

2.3 植物激素種類和濃度對(duì)火龍果小苗生根的影響

由表3可知，不同生長(zhǎng)素的種類和濃度對(duì)火龍果小苗生根的影響不同。R1、R2和R3的生根數(shù)量明顯高于R4、R5和R6，且根的生長(zhǎng)情況優(yōu)于R4、R5和R6，表明使用IAA的效果明顯好于NAA，這可能是由于火龍果對(duì)IAA的敏感程度要好于NAA，一般在草本植物中這一現(xiàn)象較為普遍。

隨著IAA濃度的增大，生根數(shù)量也逐漸增加，但根的質(zhì)量逐漸下降。R3培養(yǎng)基上的小苗生根數(shù)量最多，但生出的根細(xì)弱，明顯較R2培養(yǎng)基中的根質(zhì)量差。因此，從移栽成活角度來(lái)看，應(yīng)選擇易于成活的IAA 1.00 mg/L的培養(yǎng)基。

3 結(jié)論與討論

火龍果是一種重要的熱帶水果，利用組培技術(shù)對(duì)其進(jìn)行快繁及研究有非常重要的意義。組培快繁的技術(shù)關(guān)鍵是培養(yǎng)基配方，該試驗(yàn)通過(guò)對(duì)火龍果的增殖、伸長(zhǎng)及生根的培養(yǎng)基篩選，獲得了適于其組培快繁的最佳培養(yǎng)基配方。適宜增殖培養(yǎng)的培養(yǎng)基為MS+6-BA 3.00 mg/L+IAA 0.50 mg/L；適宜伸長(zhǎng)培養(yǎng)的培養(yǎng)基為MS+6-BA 0.50 mg/L+IAA 0.50 mg/L；適宜生根培養(yǎng)的培養(yǎng)基為1/2MS+IAA 1.00 mg/L。

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