吡蟲啉在金銀花及土壤中的殘留動(dòng)態(tài)研究

劉清浩, 劉新濤, 倪云霞, 劉紅彥*, 張玉軍

(1.河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所,鄭州 450002; 2.中北大學(xué),太原 030051;3.河南工業(yè)大學(xué),鄭州 450052)

金銀花為忍冬科植物忍冬(Lonicera japonica Thunb.)的干燥花蕾,性寒、味甘,具清熱解毒、廣譜抗菌、通經(jīng)活絡(luò)之功效,系名貴中藥材[1-2]。在金銀花生產(chǎn)中,蚜蟲為害葉片,造成畸形卷縮,嚴(yán)重危害金銀花的產(chǎn)量及品質(zhì)。吡蟲啉(imidacloprid)具有高效、廣譜、內(nèi)吸作用,是防治金銀花蚜蟲的常用藥劑[3],目前尚無吡蟲啉在金銀花中殘留動(dòng)態(tài)的研究報(bào)道。本試驗(yàn)采用高效液相色譜法,對10%吡蟲啉可濕性粉劑在金銀花和土壤上的殘留消解動(dòng)態(tài)和最終殘留量進(jìn)行了研究,為評價(jià)吡蟲啉在金銀花上的安全性和制訂吡蟲啉的安全使用標(biāo)準(zhǔn)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)時(shí)間與地點(diǎn)

田間試驗(yàn)于2004年在河南省新密市,2004年和2005年在河南省封丘縣進(jìn)行。

1.2 試驗(yàn)材料與方法

1.2.1 供試作物

1.2.2 供試藥劑

10%吡蟲啉可濕性粉劑由江蘇長青農(nóng)化股份有限公司生產(chǎn)。

1.2.3 消解動(dòng)態(tài)試驗(yàn)

高濃度施藥劑量：10%吡蟲啉可濕性粉劑600 g/hm2(有效成分60 g/hm2)。

試驗(yàn)方法：采用1次施藥多次取樣方式進(jìn)行,用背負(fù)式噴霧器,均勻噴灑金銀花灌木和附近地表。待噴藥霧滴揮干后,分別在 0、1、3、5 、7 、14、28 d 的間隔期,隨機(jī)采集花蕾,樣品總重不少于500 g,烘干儲(chǔ)存于-20℃冰箱,備用待測;土壤采用5點(diǎn)法采樣,采樣深度為0～ 15 cm,最終取樣不少于1 kg,用連續(xù)四分法取100 g,陰干后過333 μ m(40目)標(biāo)準(zhǔn)篩,儲(chǔ)存于-20℃冰箱,備用待測。空白對照同期取樣。

1.2.4 最終殘留試驗(yàn)

施藥劑量：10%吡蟲啉可濕性粉劑高濃度施藥量為600 g/hm2(有效成分60 g/hm2),低濃度施藥量為300 g/hm2(有效成分30 g/hm2)。

試驗(yàn)方法：按上述劑量配藥,同消解動(dòng)態(tài)的施藥方式。施藥次數(shù)為1次和2次。先在施藥2次小區(qū)施藥1次,間隔7 d后,再于各施藥小區(qū)一同施藥1次。第1次施藥后 3、7、14 d,第 2次施藥后 3、7、14 d采樣。采樣與樣品處理方式見消解動(dòng)態(tài)試驗(yàn)。

廣佛“候鳥”是指在佛山居住、廣州就業(yè)；廣州居住、佛山就業(yè). 根據(jù)對廣佛兩市連續(xù)22 d的數(shù)據(jù)監(jiān)測，廣佛“候鳥”居住地、工作地沿廣佛邊界分布，呈現(xiàn)“一心多點(diǎn)”等級集聚，同城化特征顯著. 在廣州工作、佛山居住的廣佛“候鳥”人數(shù)較多，約是佛山工作、廣州居住“候鳥”的1.5倍. 其中廣佛“候鳥”居住地主要集中在南海區(qū)的大瀝鎮(zhèn)(占比53.3%)，工作地則相對較為分散；佛廣“候鳥”工作地集中在大瀝鎮(zhèn)、桂城街道，分別占比26.3%、20.9%，居住地較為分散，其中居住在南沙區(qū)的大崗鎮(zhèn)的“候鳥”最多，占比11.8%.

1.3 儀器與試劑

1.3.1 儀器

美國Agilent 1100型高效液相色譜儀(G1315B DAD,Agilent化學(xué)工作站)、石英亞沸高純水蒸餾器、隔膜真空泵、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器、超聲波清洗器、移動(dòng)電子天平、精密電子天平、循環(huán)水真空泵、箱式電阻爐、微型高速萬能試樣粉碎機(jī)、40/60目標(biāo)準(zhǔn)分樣篩等。

1.3.2 試劑

甲醇、二氯甲烷、石油醚(沸點(diǎn)60～90 ℃)、丙酮(均為A R級,所用溶劑全部經(jīng)過全玻璃蒸餾裝置重蒸餾)。

氯化鈉、無水硫酸鈉、鹽酸、經(jīng)酸性處理過的活性炭[4]、裝柱用無水硫酸鈉(700℃灼燒5 h)(均為A R級)、5%蒸餾水脫活的弗羅里硅土(60～100目,650℃灼燒5 h,用前于130℃烘5 h,在干燥器中冷卻至室溫,加5%水脫活,備用)。

色譜純乙腈,二次蒸餾水。

標(biāo)樣：吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)品(99.8%,由國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心提供)。

1.4 樣品的提取和凈化

按照文獻(xiàn)[5]的方法進(jìn)行。

1.5 液相色譜條件

色譜柱：美國HP ZORBAX SB-C18柱(4.6×150 mm 5 μ m);柱溫 ：室溫 ;檢測波長 ：270 nm;流動(dòng)相 ：V(乙腈)∶V(水)=30∶70(流動(dòng)相經(jīng)過 0.45 μ m的微孔濾膜過濾和超聲波脫氣處理);流速：0.8 mL/min;進(jìn)樣量 ：8 μ L;保留時(shí)間 ：約 4.2 min;最低檢出量：0.021 2×10-9g。

采用外標(biāo)法-標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量,峰面積(y)與進(jìn)樣量(x)在標(biāo)準(zhǔn)溶液系列濃度0.106～10.6 mg/L范圍內(nèi)呈線性關(guān)系,回歸方程為：y=5.591 7x+0.406 2,R=0.999 85。

2 結(jié)果與分析

2.1 回收率測定

在一定量對照樣品(花蕾5.0 g、土壤10.0 g)中,添加0.1、0.5、5 mg/kg水平的吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)品,按照上述步驟進(jìn)行試驗(yàn),計(jì)算回收率和變異系數(shù)。花蕾的平均回收率為：82.5%～84.6%,變異系數(shù)為8.88%～18.15%;土壤的平均回收率為：80.9%～81.4%,變異系數(shù)為7.74%～14.94%。

2.2 吡蟲啉在金銀花中的消解動(dòng)態(tài)

2004年封丘試驗(yàn)結(jié)果表明：吡蟲啉在花蕾中的原始附著量為7.792 8 mg/kg,C=7.792 8e-0.1496t,半衰期T1/2=4.65 d,R值為-0.987 1,14 d后已消解87.80%,28 d后已檢測不出吡蟲啉。2004年新密試驗(yàn)結(jié)果表明：吡蟲啉在花蕾中的原始附著量為8.939 7 mg/kg,C=8.939 7e-0.4567t,半衰期 T1/2=1.52 d,R值為-0.979 7,14 d后已消解99.88%,28 d后已檢測不出吡蟲啉。2005年封丘試驗(yàn)結(jié)果表明：吡蟲啉在花蕾中的原始附著量為10.031 2 mg/kg,C=10.031 2e-0.2331t,半衰期T1/2=2.97 d,R值為-0.989 8,28 d后已消解99.79%。吡蟲啉在花蕾中的消解曲線見圖1。

2.3 吡蟲啉在土壤中的消解動(dòng)態(tài)

2004年封丘試驗(yàn)結(jié)果表明：吡蟲啉在土壤中的原始附著量為0.045 94 mg/kg,C=0.045 94e-0.0626t,半衰期T1/2=11.07 d,R值為-0.877 8,吡蟲啉在土壤2005年封丘的試驗(yàn)結(jié)果表明：吡蟲啉在土壤中的原始附著量為0.166 8 mg/kg,C=0.166 8e-0.0364t,半衰期T1/2=19.09 d,R值為-0.946 7,28 d后才消解69.32%。吡蟲啉在土壤中的消解曲線見圖2。

圖1 吡蟲啉在金銀花中的消解曲線

2.4 吡蟲啉在金銀花與土壤中的最終殘留量

施藥量30 g/hm2和60 g/hm2,施用1次和2次,施藥后7 d吡蟲啉在金銀花中的最終殘留量為0.376～3.200 mg/kg,施藥后14 d最終殘留量為未檢出至-0.856 mg/kg(見表1)。

同樣的處理,吡蟲啉在土壤中的殘留時(shí)間較長,但殘留量很低。施藥后3 d和7 d,殘留量分別為0.023～0.291 mg/kg和0.013～0.237 mg/kg。中的消解比在花蕾中慢,28 d后才消解87.69%。2004年密縣試驗(yàn)結(jié)果表明：吡蟲啉在土壤中的原始附著量為0.062 45 mg/kg,C=0.062 45e-0.0473t,半衰期 T1/2=14.65 d,R值為-0.965 5,28 d后才消解74.01%。

表1 吡蟲啉在金銀花中的最終殘留量

圖2 吡蟲啉在土壤中的消解曲線

3 結(jié)論

吡蟲啉是防治農(nóng)作物蚜蟲的常用農(nóng)藥,關(guān)于吡蟲啉的最大殘留限量(MRL),澳大利亞暫定草藥中MRL為5 mg/kg,韓國規(guī)定萵苣和球莖甘藍(lán)中MRL為3.5 mg/kg。目前國內(nèi)外尚沒有制訂金銀花中吡蟲啉的殘留限量標(biāo)準(zhǔn)。吡蟲啉ADI值為0.057 mg/kg,根據(jù)金銀花的入藥特點(diǎn),按照每人每天用量11 g,計(jì)算得出吡蟲啉的理論MRL為3.02 mg/kg。因此建議金銀花中吡蟲啉的MRL為3.0 mg/kg。根據(jù)2004-2005年在河南省封丘和新密的殘留試驗(yàn)結(jié)果,提出吡蟲啉在金銀花上的安全使用建議標(biāo)準(zhǔn)：10%吡蟲啉可濕性粉劑防治金銀花上的蚜蟲,用藥量為30 g/hm2(有效成分用量),采用噴霧的施藥方法,在每茬花中最多施藥2次,安全施藥間隔期為7 d。

[1]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典(2005年版一部)[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社,2005：152-153.

[2]任應(yīng)黨,劉玉霞,申效誠,等.金銀花主要害蟲及防治[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué),2004(9)：66-68.

[3]農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所.新編農(nóng)藥手冊[M].續(xù)集.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社,1998：52-54.

[4]中華人民共和國國家進(jìn)出口商品檢驗(yàn)局《食品分析大全》編寫組.食品分析大全[M].第1卷.北京：高等教育出版社,1997：15-16.

[5]劉清浩,劉紅彥,郭金春,等.金銀花中吡蟲啉殘留量的HPLC測定方法[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué),2006(1)：57-63.