微生態制劑對產蛋后期蛋雞飼料營養物質消化率的影響

中國農業大學動物科學技術學院 李笑櫻 范 彧 馬秋剛＊ 計 成動物營養國家重點實驗室

北 京 市 畜 牧 獸 醫 總 站 陳 余 賈亞雄

首都師范大學 王曉霞

微生態制劑因其能改善畜禽胃腸道微生態平衡，提高畜禽對飼料養分的利用，增強機體免疫功能，且自身無毒、無抗藥性、無殘留、成本低，在一定程度上代替抗生素的使用已得到廣泛驗證和認同（辛娜等，2010）。其中，飼用芽孢桿菌和糞腸球菌，是國家允許使用的微生物飼料添加劑品種，已經被廣泛應用 （Cutting，2011；張民和刁其玉，2003）。本研究擬選用產蛋后期蛋雞作為試驗動物，以添加不同種類的微生態制劑作為試驗因子，結合飼養試驗，探明微生態制劑對產蛋后期雞飼料營養物質消化率的影響，為芽孢桿菌和糞腸球菌微生態制劑在產蛋雞生產養殖中的實際應用提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 糞腸球菌微生態制劑，由動物營養國家重點實驗室研制，每克中糞腸球菌含量大于 1×1010個。

芽孢桿菌微生態制劑，由動物營養國家重點實驗室研制，每克中地衣芽孢桿菌內生芽孢大于1×1010個，枯草芽孢桿菌大于 1×1010個。

復合微生態制劑，由動物營養國家重點實驗室研制，每克中地衣芽孢桿菌內生芽孢大于1×1010個，枯草芽孢桿菌大于1×1010個，糞腸球菌含量大于 1×1010個。

1.2 試驗動物與設計 將96只50周齡左右且個體差異不顯著的健康海蘭褐產蛋后期蛋雞隨機分為成4個處理，每個處理8個重復，每個重復3只。其中，對照組飼喂基礎日糧（玉米-豆粕-棉籽粕型日糧），不添加任何抗菌藥物或微生態制劑；其他3個試驗組在基礎日糧基礎上分別添加0.01%糞腸球菌微生態制劑、0.02%芽孢桿菌微生態制劑、0.03%復合微生態制劑。試驗預試期為30 d，預試期結束時，在雞只充分適應日糧營養和表現最佳生產性能的基礎上，進行代謝試驗，用以測定各處理飼料能量、粗蛋白質、干物質、鈣、磷及氨基酸的利用效率。試雞自由采食和飲水。

1.3 試驗日糧組成及營養水平 對照組為玉米-豆粕-棉籽粕型基礎日糧，其日糧組成及營養水平見表1。

1.4 樣品采集 采用4 mol/L鹽酸不溶灰分指示劑法，以重復為單位，連續3 d收集試雞的糞尿排泄物，去除毛、皮屑和雜物，每天的排泄物滴加4 mol/L鹽酸混勻，收好后立即置于-20℃下保存。將糞樣倒入平皿中在65℃烘箱干燥至恒重，置室內回潮24 h，稱重、記錄，作為風干糞重；粉碎、過40目篩；再將排泄物混合均勻，裝瓶封存并立即取樣，在100～105℃下測定其絕干糞重。

1.5 測定指標

1.5.1 飼料和糞尿排泄物的總能 能量由中國農業大學動物營養國家重點實驗室分析測試中心用全自動氧彈測熱儀測定（國產）。

表1 試驗日糧組成及營養水平

1.5.2 飼料和糞尿排泄物中粗蛋白質含量 粗蛋白質根據GB/T 6432-1994方法用凱氏定氮儀進行測定。

1.5.3 飼料和糞尿排泄物酸不溶灰分和水分含量酸不溶灰分含量測定：樣品灰化后加入2 mol/L鹽酸煮沸，無灰濾紙過濾，熱水反復沖洗至無酸，試紙檢驗，將殘渣和濾紙一并轉移到已知重量的坩堝中，再灰化稱重。水分采用GB/T 6435-2006方法測定。

1.5.4 鈣磷測定 鈣用GB/T 6436-2002中的乙胺四乙酸二鈉絡合滴定測定；磷用GB/T 6437-2002鉬黃分光光度法測定。

1.5.5 氨基酸測定 樣品經過酸水解（6 mol/L鹽酸在110℃水解24 h）和氧化水解（蛋氨酸使用過氧甲酸進行氧化）處理，使用氨基酸自動分析儀（美國，HP）測定排泄物氨基酸 （色氨酸除外）含量。

以重復為單位計算微生態制劑芽孢桿菌和糞腸球菌對產蛋后期雞飼料表觀代謝能、干物質表觀消化率、蛋白質、鈣、磷及氨基酸的利用效率。各養分消化率計算公式如下：

養 分 表 觀 消 化 率/%＝100-（糞中養分含量×飼料中指示劑含量）/飼料中養分含量×糞中指示劑含量×100。

1.6 數據分析 運用SAS 8.0軟件中GLM過程進行方差分析，以P＜0.05為顯著水平，方差分析顯著者采用LSMEANS過程進行多重比較，試驗結果用平均數±標準差表示。

2 結果與分析

2.1 微生態制劑對蛋雞飼料中能量、蛋白質、干物質、鈣、磷表觀消化率的影響

由表2可知，0.02%芽孢桿菌組和0.03%復合微生態組表觀代謝能顯著高于對照組 （P＜0.05），分別提高 11.8%、13.6%。由此可知，0.02%芽孢桿菌組和0.03%復合微生態組可以顯著提高產蛋后期蛋雞飼料表觀代謝能。

表2 不同添加水平的微生態制劑對蛋雞營養物質表觀消化率的影響

0.02 %芽孢桿菌組和0.03%復合微生態組干物質表觀消化率顯著高于對照組（P＜0.05），分別提高14.7%、17.7%；由此可知，0.02%芽孢桿菌組和0.03%復合微生態組可以顯著提高產蛋后期蛋雞飼料干物質表觀消化率。

0.02 %芽孢桿菌組和0.03%復合微生態組蛋白質表觀消化率顯著高于對照組（P＜0.05），分別提高35%、42.5%；試驗組之間蛋白質表觀消化率差異不顯著（P＞0.05）。

0.01 %糞腸球菌組、0.02%芽孢桿菌組和0.03%復合微生態組蛋雞鈣、磷表觀消化率均顯著高于對照組（P＜0.05）。與對照組相比，各試驗組鈣表觀消化率分別提高19%、29.2%和30%，試驗組之間差異不顯著（P>0.05）；試驗組磷表觀消化率分別提高20.7%、28.0%和29.2%，試驗組之間差異不顯著（P>0.05）。

2.2 微生態制劑對蛋雞飼料中氨基酸表觀消化率的影響 由表3可知，與對照組相比，0.03%復合微生態制劑組可以顯著提高天冬氨酸、絲氨酸、谷氨酸、蘇氨酸、精氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、組氨酸、蛋氨酸、和半胱氨酸的表觀消化率（P＜0.05）；0.02%芽孢桿菌組可以顯著提高絲氨酸、谷氨酸、精氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸和半胱氨酸的表觀消化率（P＜0.05）；0.01%糞腸球菌組可以顯著提高精氨酸消化率、亮氨酸和半胱氨酸的表觀消化率（P ＜ 0.05）。

表3 不同添加水平的微生態制劑對氨基酸表觀消化率的影響 %

3 討論

在現代集約化飼養條件下，產蛋后期蛋雞日糧的主要成分是玉米、豆粕等。植物細胞壁中的植酸和纖維素等抗營養物質與蛋白質和礦物元素等形成不溶復合物或絡合物，從而影響營養物質的消化吸收。抗營養大分子物質較難溶解于產蛋后期蛋雞分泌的消化液中，增加了消化道內容物的粘稠度，縮短了飼料通過消化道的時間，同時使日糧中的營養物質和機體分泌的內源酶難以擴散，并與消化酶作用降低酶活，導致營養物質的利用率降低。而微生態制劑可通過提高固有的消化過程的效率或通過促進原本不能消化的物質的消化來改善食物利用率，從而提高動物的生產性能（杜德偉，2006）。

本試驗結果表明,添加0.01%糞腸球菌可以顯著提高蛋雞鈣、磷表觀消化率，與前人研究結果相同，同時可以顯著提高精氨酸、亮氨酸、半胱氨酸表觀消化率 （P＜0.05）。這可能是由于糞腸球菌屬于乳酸菌，分泌大量乳酸，降低了腸道內容物的pH值，偏酸的環境有利于被結合或螯合的礦物元素以游離態釋放，從而提高了鈣、磷的利用率（杜晉平，2002）。同時通過產酸化環境，增加蛋白酶活性來參與蛋白質代謝過程，促進動物生產和生長（張日俊等，2005）。武英等（2004）在試驗中發現，仔豬日糧中添加活菌制劑，一部分營養物質消化率成分絕對值較高，但與對照組相比差異不顯著，這可能由于微生態制劑添加劑量不夠，效果不明顯。

本試驗中，添加0.02%芽孢桿菌、0.03%復合微生態制劑可以分別顯著提高蛋雞日糧代謝能、干物質、粗蛋白質、鈣磷表觀消化率以及絲氨酸、谷氨酸、精氨酸等氨基酸表觀消化率 （P＜0.05）。這可能是芽孢桿菌代謝產生具有較強活性的蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、果膠酶、葡聚糖酶、戊聚糖酶和纖維素酶等各種消化酶和促生長因子，可降解植物飼料中非淀粉多糖（Sogaard，1990），對植物性碳水化合物有較強的降解能力（Gomez-Gil等，1998），同時也可促進降解動物體內的甘油三酯、蛋白質、氨基酸等，增強對飼料養分的消化和吸收。同時，芽孢桿菌在其生長繁殖過程中能產生揮發性脂肪酸（VFA），降低動物腸道的pH值，抑制腸內病原菌的生長，促進礦物質吸收。這與他人的報道結果相一致，徐海燕等（2006）研究發現，芽孢桿菌發酵液中含有一定量的乙酸、丙酸、丁酸等有機酸，這些物質可以降低腸道pH，起到促進礦物質吸收的作用。李俊波等（2009）的試驗也證明，日糧中添加枯草芽孢桿菌制劑能顯著提高日糧粗蛋白質和有機物消化率。也有研究表明，微生態制劑可以通過其產生糖化酶、蛋白酶、脂肪酶等的作用來促進機體對營養成分的消化吸收。同時，微生態制劑可以影響小腸上皮細胞微絨毛中吸收酶的水平，調節營養吸收（Sogaard，1990）。 另外0.03%微生態制劑組中的主要菌種成分芽孢桿菌進入腸道并萌發成有代謝活性的細胞，消耗腸道中的氧氣而有利于厭氧環境的形成，從而促進糞腸球菌以及腸道內乳酸菌的生長繁殖，降低腸道pH值，形成有利于提高消化酶活性和分泌量的腸道內環境，同時芽孢桿菌也分泌各種酶類和生物活性物質，共同加強機體對飼料中各種營養成分的消化吸收，提高飼料的利用率。

4 結論

本試驗條件下，0.01%糞腸球菌、0.02%芽孢桿菌和0.03%復合微生態制劑可以顯著提高產蛋后期蛋雞日糧中鈣、磷表觀消化率和部分氨基酸表觀消化率；0.02%芽孢桿菌和0.03%復合微生態制劑可以顯著提高日糧代謝能和干物質、粗蛋白質、鈣、磷表觀消化率。

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