抗C1q抗體在系統(tǒng)性紅斑狼瘡及狼瘡腎炎診斷中的作用

李 娜，李寶全，鞏 路

（天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院感染免疫科，天津300052）

系統(tǒng)性紅斑狼瘡 (system lupus erythematosus，SLE)是一種自身免疫病，突出表現(xiàn)有多種自身抗體，發(fā)病機(jī)制取決于多種因素。狼瘡腎炎（lupus nephritis,LN）是SLE最常見(jiàn)的并發(fā)癥。據(jù)國(guó)外報(bào)道SLE患者血清中有超過(guò)150種自身抗體，但是只有少數(shù)與LN相關(guān)，如抗雙鏈DNA（抗dsDNA），抗C1q抗體等。研究表明抗dsDNA抗體的滴度升高與SLE、LN活動(dòng)度及復(fù)發(fā)相關(guān)，但抗dsDNA抗體在非活動(dòng)性SLE和無(wú)腎炎的患者中也可存在，特異性較差。且抗dsDNA抗體陰性SLE患者也可出現(xiàn)LN，提示LN的發(fā)生可能有其他因素參與。另?yè)?jù)報(bào)道血清抗C1q抗體在SLE患者中常可檢測(cè)到。近年來(lái)許多研究顯示，抗C1q抗體參與SLE，尤其狼瘡腎炎的發(fā)病[1-2]，在抗C1q抗體缺乏的情況下發(fā)生重度LN很罕見(jiàn)[3]。本研究通過(guò)檢測(cè)SLE患者血清中抗C1q抗體水平，探討了抗C1q抗體在SLE和LN診斷及病情活動(dòng)性判斷中的價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象收集2010年5月~2011年3月于天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院感染免疫科住院確診的SLE患者102例，其中女性92例，男性10例；年齡17～65歲，平均（35±13）歲；病程 1個(gè)月～35年，平均病程（45±74）月，全部診斷均符合1997年美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)修訂的SLE分類診斷標(biāo)準(zhǔn)。疾病活動(dòng)性根據(jù)2000年修訂的SLE疾病活動(dòng)度指數(shù)（systemic lupus erythematosus disease activity index，SLEDAI）進(jìn)行評(píng)分：≥10分疾病活動(dòng)，<10分疾病穩(wěn)定。60例患者為疾病活動(dòng)組，42例為疾病穩(wěn)定組。LN判斷標(biāo)準(zhǔn)為符合下述 3條中至少 1條：（1）連續(xù)兩次蛋白尿≥+++，或 24 h 尿蛋白定量≥0.5 g；（2）管型尿，可為紅細(xì)胞、血紅蛋白、顆粒管型或混合管型；（3）腎功能異常。50例患者符合LN標(biāo)準(zhǔn)，52例無(wú)LN。

疾病對(duì)照組共60例，其中男14例，女46例；年齡 18～65歲，平均（35±10）歲；病程3周～40年，平均（44±12）月。包括:類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎23例，原發(fā)性干燥綜合征9例，多發(fā)性肌炎及皮肌炎8例，系統(tǒng)性硬化6例，強(qiáng)直性脊柱炎5例，成人斯蒂爾病9例，診斷均符合國(guó)際診斷標(biāo)準(zhǔn)。另選40例健康體檢者作為對(duì)照，男9名，女31名；年齡 23～54歲，平均（38±14）歲，且與病例組在年齡、性別上匹配。

記錄患者臨床資料和相關(guān)免疫學(xué)指標(biāo)，包括白細(xì)胞（WBC）、血紅蛋白（HGB）、血小板（PLT）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLO）、肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）、血沉（ESR）、C 反應(yīng)蛋白（CRP）、免疫球蛋白（IgG）、補(bǔ)體（C3、C4）、抗 dsDNA 抗體水平、SLEDAI、24 h 尿蛋白定量等指標(biāo)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 抗C1q抗體的檢測(cè) 抽受檢者外周靜脈血3 mL，3000 r/min離心分離血清，快速凍存于-20℃冰箱。采用的ELISA試劑盒購(gòu)自O(shè)rgentec公司。嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明操作，酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度，測(cè)定波長(zhǎng)為450 nm，以≥3.18 U/mL定為抗C1q抗體陽(yáng)性判斷值。

1.2.2 血常規(guī)、ALB、GLO、Cr、BUN、C3、C4、IgG、CRP、抗dsDNA抗體水平、24 h尿蛋白定量及ESR的測(cè)定 由醫(yī)院常規(guī)檢驗(yàn)方法測(cè)定。以上數(shù)據(jù)均由天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院檢驗(yàn)科提供。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料兩組率比較采用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析，所有結(jié)果P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血清抗C1q抗體的比較 102例SLE患者的血清抗C1q抗體陽(yáng)性66例，陽(yáng)性率64.7%，其中LN患者的血清抗C1q抗體平均水平明顯高于非LN的SLE患者，二組均明顯高于疾病對(duì)照組及正常對(duì)照組（P<0.05），見(jiàn)表 1。

表1 各組血清抗C1q抗體的比較Tab 1 Comparison of anti-C1q between SLE and control groups

2.2 SLE不同組抗C1q抗體的比較 抗C1q抗體的陽(yáng)性與陰性在LN組、非LN的SLE組及SLE活動(dòng)組、穩(wěn)定組間的比較見(jiàn)表2。

表2 LN組、非LN組及SLE活動(dòng)組、穩(wěn)定組血清抗C1q抗體的比較Tab 2 Comparisonofanti-C1qbetweenLNant;bodiesandnon LN,active and stable groups in SLE patients

2.3 相關(guān)性描述 抗C1q抗體與SLE患者SLEDAI及其它實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)的相關(guān)性分析見(jiàn)表3。

表3 抗C1q抗體與SLE患者SLEDAI及其它實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)的相關(guān)性Tab 3 Correlations between anti-C1q antibodies and laboratorycharacteristics in SLE patients

3 討論

SLE是一種累及多系統(tǒng)、多器官的自身免疫性疾病，免疫功能紊亂貫穿了SLE的整個(gè)發(fā)病過(guò)程，患者體內(nèi)存在多種自身抗體。據(jù)國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道SLE患者血清中有超過(guò)150種自身抗體，但真正對(duì)疾病診斷和治療有意義的抗體并不多。SLE臨床表現(xiàn)有多樣性，病情可反復(fù)活動(dòng)，其器官損害常出現(xiàn)在疾病活動(dòng)期。LN是SLE最常見(jiàn)的并發(fā)癥，腎臟受損程度是判斷SLE療效及預(yù)后的重要因素之一。腎活檢是診斷LN的金標(biāo)準(zhǔn)，是評(píng)價(jià)預(yù)后較好的手段，但因其創(chuàng)傷性及條件限制使其不能廣泛應(yīng)用。因此尋找高敏感性、高特異性的自身抗體對(duì)SLE及LN的早期診斷、治療和預(yù)后有重要的意義。近年來(lái)國(guó)內(nèi)外報(bào)道，SLE患者體內(nèi)存在針對(duì)C1q分子膠原樣區(qū)（CLR）的lgG型自身抗體即抗C1q抗體，與狼瘡活動(dòng)性及狼瘡腎炎有著顯著相關(guān)性[3]。

C1q是補(bǔ)體C1的第一組分的第一個(gè)反應(yīng)亞基，在補(bǔ)體經(jīng)典激活途徑中起重要作用，同時(shí)還參與介導(dǎo)單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)清除感染因素、凋亡產(chǎn)物及免疫復(fù)合物。當(dāng)血清中出現(xiàn)抗C1q抗體時(shí)，必然會(huì)影響C1q的生理功能。抗C1q抗體與C1q分子CLR結(jié)合，使免疫復(fù)合物清除障礙，凋亡的細(xì)胞清除緩慢，刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生更多抗體，是導(dǎo)致疾病活動(dòng)的因素[4]。研究發(fā)現(xiàn)抗C1q抗體水平與C1q、C3、C4呈負(fù)相關(guān)，與狼瘡活動(dòng)強(qiáng)相關(guān)[5]?？笴1q抗體水平的升高可以預(yù)示LN病情活動(dòng)[6-7]。Moroni等[2]認(rèn)為抗C1q抗體與LN復(fù)發(fā)密切相關(guān)，在SLE出現(xiàn)腎損傷前或腎疾病復(fù)發(fā)前，就能夠檢測(cè)到抗C1q抗體，可作為監(jiān)測(cè)LN活動(dòng)性的重要實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)。國(guó)內(nèi)蔡小燕等[5]研究證實(shí)抗C1q抗體陽(yáng)性患者腎損害發(fā)生率明顯高于陰性患者。狼瘡腎炎的發(fā)病可能與循環(huán)免疫復(fù)合物的沉積損傷有關(guān)，抗C1q抗體沉積造成腎臟損害與腎小球內(nèi)存在的其他已結(jié)合C1q的免疫復(fù)合物有關(guān)，抗C1q抗體放大了致病性補(bǔ)體活化效應(yīng)[8]。

本研究證實(shí)在SLE患者中存在著抗C1q抗體的高表達(dá)，陽(yáng)性率64.7%，抗C1q抗體平均水平明顯高于疾病對(duì)照組及正常對(duì)照組。疾病活動(dòng)組抗C1q抗體陽(yáng)性率顯著高于疾病穩(wěn)定組（P<0.01），抗C1q抗體的水平與疾病活動(dòng)指數(shù)SLEDAI、ESR、CRP、球蛋白水平、24 h尿蛋白定量和抗dsDNA抗體水平呈顯著正相關(guān),與WBC、C3、C4、白蛋白呈負(fù)相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的LN患者的血清抗C1q抗體的平均水平和陽(yáng)性率明顯高于非LN的SLE患者，差異有顯著性（P<0.01）。因此，通過(guò)檢測(cè)不僅提示抗C1q抗體在SLE發(fā)病機(jī)制及疾病活動(dòng)中起重要作用，可作為評(píng)價(jià)疾病活動(dòng)性指標(biāo)之一，同時(shí)還提示與LN密切相關(guān)，可能是LN發(fā)病的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一。本研究還發(fā)現(xiàn)80%的LN患者抗C1q抗體陽(yáng)性，即20%有LN的患者抗C1q抗體陰性，特別是3例嚴(yán)重腎功能不全患者抗C1q抗體是陰性的，這可能與長(zhǎng)時(shí)間應(yīng)用免疫抑制劑出現(xiàn)假陰性結(jié)果有關(guān)。

Marto等[9]證實(shí)沒(méi)有腎損害的患者出現(xiàn)抗C1q抗體陽(yáng)性，經(jīng)過(guò)一段時(shí)間隨訪大部分會(huì)發(fā)生不同程度的腎臟損害。LN活動(dòng)患者經(jīng)過(guò)一個(gè)月的免疫抑制治療，抗C1q抗體的水平明顯下降[10]。SLE患者血清抗C1q抗體水平持續(xù)升高，可能提示病情活動(dòng),易出現(xiàn)腎損害，此時(shí)應(yīng)及時(shí)調(diào)整治療方案，加強(qiáng)免疫抑制劑的使用，對(duì)血清抗C1q抗體的水平和患者的預(yù)后有重要影響。

綜上所述，抗C1q抗體在SLE發(fā)病機(jī)制及疾病活動(dòng)中起重要作用，可作為疾病活動(dòng)的可靠指標(biāo)，同時(shí)與LN密切相關(guān)。診斷為SLE及LN的患者密切檢測(cè)抗C1q抗體的水平有助于早期發(fā)現(xiàn)病情活動(dòng)，為判斷病情和制定治療策略提供更好的依據(jù)。

［1］Meyer OC,Nicaise-Roland P.Anti-C1q antibodies antedate patent active glomerulonephritis in patients with systemic lupus erythematosus[J].Arthritis Res Ther,2009,11(3):R87

［2］Moroni G,Trendelenburg M,del Pepa N,et al.Anti-Clq antibodies may help in diagnosing a renal flare in lupus nephritis[J].Am J Kidney Dis,2001,37(3):490

［3］Trendelenburg M,Lopez Trascasa M,Potlukova E,et al.High preva lence of anti-C1q antibodies in biopsy-proven active lupus nephritis[J].Nephrol Dial Transplant,2006,21(11):3115

［4］Botto M,Bygrave AE,Thompson EM,et al.Homozygous C1q deficiency causes glomerulonephritis associated with multiple apoptotic bodies[J].Nat Genet,1998,19(1):56

［5］蔡小燕，楊岫巖，陳小輝，等.系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清C1q抗體的檢測(cè)及臨床意義[J].中華風(fēng)濕病學(xué)雜志，2004，8(8):481

［6］Reveille JD.Predictive value of autoantibodies for activity of systemic lupus erythematosus[J].Lupus,2004,13(5):290

［7］Sinico RA,Rimoldi L,Radice A,et al.Anti-C1q autoantibodies in lupus nephritis[J].Ann N Y Acad Sci,2009,1173:47

［8］Trouw LA,Groeneveld TW,Seelen MA,et al.Anti-C1q auto-antibodies deposit in glomeruli but are only pathogenic in combination with glomerular C1q-containing immune complexes[J].J Clin Invest,2004,114(5):679

［9］Marto N,Bertolaccini ML,Calabuig E,et al.Anti-C1q antibodies in nephritis:correlation between titres and renal diease activity and positive predictive value in systemic lupus erythematosus[J].Ann Rheum Dis,2005,64(3):444

［10］Guerreiro de Moura CG,Pitangueira Mangueira CL,Sampaio Cruz LA,et al.Negative anti-C1q antibody titers may influence therapeutic decisions and reduce the number of renal biopsies in systemic lupus erythematosus[J].Nephron Clin Pract,2011,118(4):c355