2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病血漿chemerin與炎癥指標的相關性

金二榮 王 璐 張 潔 邸阜生 劉 聰 洪燕青

非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）包括非酒精性單純性脂肪肝（NAFL）以及由其演變的非酒精性脂肪性肝炎（NASH）和肝硬化，炎癥在NAFLD的發生、發展過程中起重要作用。近來發現脂肪組織、肝臟分泌的脂肪因子chemerin可通過結合受體chemer?inR趨化巨噬細胞、淋巴細胞、自然殺傷細胞參與機體炎癥反應，在NAFLD患者血漿chemerin水平明顯增高[1]。本文就2型糖尿病（T2DM）伴NAFLD患者血漿chemerin水平變化以及chemerin與T2DM伴NAFLD炎癥的關系進行探討。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2008年5月—2010年10月在天津市第三中心醫院門診新確診或病史<5年而未使用任何降糖藥物治療的T2DM患者，其中合并NAFLD患者120例（A組），不合并NAFLD患者62例（B組），選取同期健康體檢者60例（C組）。所有T2DM患者均排除糖尿病急慢性并發癥、慢性腎功不全、冠心病、心律失常、腫瘤、妊娠及風濕免疫系統疾病，無飲酒史或飲酒折合乙醇量男性每周<140 g,女性每周<70 g，并排除病毒性肝炎、自身免疫性肝病、藥物及毒物引起的肝病等。T2DM診斷采用1999年WHO診斷標準；NAFLD的診斷標準參照參考文獻[2]。

1.2 研究方法

1.2.1 基本數據采集 測量各研究對象的身高、體質量，腰圍、臀圍，計算體質量指數（BMI）和腰臀比（WHR）。

1.2.2 標本采集 全部受試對象空腹8 h后取肘正中靜脈血測空腹血糖（FBG）、餐后2 h血糖（2 hPG）、HbA1c（%）、總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、高敏C反應蛋白（hs-CRP）、腫瘤壞死因子（TNF）-α、白細胞介素（IL）-6、chemerin。口服75 g無水葡萄糖行葡萄糖耐量試驗（OGTT）及胰島素、C肽釋放試驗測空腹胰島素（FINS），計算穩態模型胰島素抵抗指數（HOMA-IR）=FBG×FINS/22.5。

1.2.3 檢測方法 內臟脂肪面積測量采用電阻抗法，血糖測定采用葡萄糖氧化酶法，血脂測定采用酶化學法，HbA1c測定采用高效液相層析法，血漿胰島素測定采用放射免疫法，chemerin測定采用酶聯免疫吸附法（試劑購自北京康肽生物科技有限公司），TNF-α、IL-6采用酶聯免疫吸附法（試劑購自北京愛迪森生物科技有限公司），hs-CRP采用散射比濁法，B超檢查用AKLOKA5000型B超檢測儀。

1.3 統計學處理 數據采用SPSS 13.0軟件統計處理，計量資料用±s表示，多組間比較采用方差分析及q檢驗，計數資料間比較采用χ2檢驗，指標間的關系判定采用Pearson相關分析和多元逐步回歸分析，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 3組臨床資料比較 除性別、年齡、身高外，體質量、BMI、腰圍、WHR、TC、TG、LDL-C、FBG、2hPG、HbA1c、FINS、HOMA-IR、內臟脂肪面積在A、B組均顯著高于C組，HDL-C顯著低于C組（均P<0.01）；A組與B組的體質量、BMI、腰圍、WHR、TC、HDL-C、FBG、2 h PG、HbA1c、FINS、HOMA-IR差異無統計學意義（均P>0.05），TG、LDL-C、內臟脂肪面積差異有統計學意義（P<0.05或P<0.01），見表1。

2.2 3組間chemerin水平及炎性指標的比較 A組、B組的chemerin、hs-CRP、IL-6、TNF-α均高于C組（P<0.01），A組的chemerin、hs-CRP、IL-6、TNF-α均高于B組（P<0.05或P<0.01），見表2。

2.3 血漿chemerin與各變量間的相關性分析 T2DM合并NAFLD患者血漿chemerin水平與腰圍、LDL-C、內臟脂肪面積、TNF-α、IL-6呈正相關（r分別為 0.193、0.185、0.822、0.687、0.731，P<0.05 或P<0.01），與臀圍、WHR、身高、體質量、BMI、TC、TG、HDL-C、FBG、2 h PG、FINS、HOMA-IR、HbA1c、hs-CRP無相關性（r分別為 0.087、0.139、0.128、0.164、0.033、-0.061、-0.025、0.055、-0.132、-0.023、-0.076、-0.148、0.125、0.001，均P>0.05）。

表1 3組臨床參數的比較 ±s）

表1 3組臨床參數的比較 ±s）

表中數據采用±s或例表示；*P<0.05，**P<0.01，表2同

組別 n WHR A組B組C組F或χ2 q A∶B A∶C B∶C 120 62 60性別（男/女）56/64 30/32 31/29 0.358---年齡（歲）60.73±11.83 60.23±10.47 59.00±9.41 0.839---身高（cm）165.22±8.31 166.07±7.91 166.02±7.26 1.824---體質量（kg）73.73±5.93 74.58±6.47 65.47±6.39 35.020**1.27 6.53**7.80**BMI（kg/m2）27.10±2.50 27.10±2.27 23.72±1.34 53.294**0.66 9.25**8.60**腰圍（cm）89.30±6.64 88.80±5.03 76.13±5.55 45.78**1.47 11.45**7.90**0.95±0.06 0.94±0.04 0.87±0.05 45.003**1.16 8.73**7.58**內臟脂肪面積（cm2）117.95±8.17 108.63±7.34 98.42±3.27 98.801**7.72**16.17**8.45**TC（mmol/L）5.33±2.17 5.17±1.10 3.70±0.80 21.635**2.17 6.01**5.32**TG（mmol/L）LDL-C（mmol/L）HDL-C（mmol/L）FBG（mmol/L）2 h PG（mmol/L）FINS（mU/L）HbA1c（%）組別 n HOMA-IR A組B組C組F或χ2 q A∶B A∶C B∶C 120 62 60 2.19±2.56 1.91±1.30 1.01±0.28 9.229**2.18*3.85**3.17**3.34±0.46 3.20±0.39 2.89±0.27 22.509**2.03*6.57**4.45**0.97±0.16 1.04±0.16 1.30±0.07 41.330**0.51 10.17**10.51**9.65±2.20 9.55±1.92 5.10±0.61 78.831**1.02 14.48**14.17**14.90±5.08 14.34±5.08 7.23±0.48 63.425**0.74 10.10**7.32**11.08±1.86 10.76±2.09 7.89±1.69 52.608**0.77 9.24**8.47**4.76±1.42 4.53±0.96 1.80±0.51 72.441**1.23 15.70**14.44**8.73±1.42 8.27±1.52 5.05±0.30 68.128**0.51 19.82**16.08**

表2 3組chemerin及炎癥指標的比較

2.4 多元逐步回歸分析 以T2DM合并NAFLD患者血漿chemerin水平為因變量，以BMI、腰圍、臀圍、WHR、內臟脂肪面積、TC、TG、LDL-C、HDL-C、FBG、2 h PG、FINS、HOMR-IR、HbA1c、TNF-α、hs-CRP、IL-6為自變量進行多元逐步回歸分析，結果表明內臟脂肪面積、TNF-α、IL-6進入分析模型，=-209.184+1.629X1+0.313X2+0.425X3（：chemer?in；X1：內臟脂肪面積；X2：TNF-α；X3：IL-6），所得模型決定系數（R2）=0.764（F=129.302，P<0.01）。

3 討論

NAFLD是一種多病因引起的肝細胞內脂質蓄積過多的臨床病理綜合征。本研究發現A組、B組患者 TC、TG、LDL-C、FBG、2 h PG、HbA1c、FINS、HOMA-IR、內臟脂肪面積高于正常對照組，HDL-C低于正常對照組，表明T2DM、NAFLD患者存在有糖脂代謝紊亂。研究發現NAFLD與糖尿病、肥胖等代謝綜合征密切相關，存在脂肪組織和肝臟的天然免疫功能紊亂，肥胖和肝脂肪變性時，脂肪組織、肝臟可分泌TNF-α、hs-CRP、IL-6多種炎性細胞因子，在NAFLD的形成和發展中發揮重要作用[3]。本研究亦顯示A組、B組患者血漿IL-6、TNF-α、hs-CRP高于正常對照組，與以上所述一致，表明炎癥在糖尿病、脂肪肝的發生、發展中起重要作用。

Kukla等[1]研究發現NAFLD血漿chemerin水平明顯較正常人高。本研究得出相似的結果：T2DM合并NAFLD血漿chemerin水平高于正常對照組和單純T2DM患者，同時T2DM合并NAFLD患者血漿IL-6、TNF-α、hs-CRP高于單純 T2DM 患者，而chemerin又是機體炎癥反應標志物[3]。提示chemer?in可能通過炎癥機制參與T2DM合并NAFLD的發生、發展。國外研究發現肥胖患者血漿chemerin水平與炎癥指標TNF-α、IL-6、hs-CRP呈正相關[3]。本研究顯示T2DM合并NAFLD血漿chemerin水平與TNF-α、IL-6、腰圍、內臟脂肪呈正相關，腰圍、內臟脂肪面積是肥胖的臨床指標，表明chemerin還與肥胖尤其是中心性肥胖的發生相關。Chemerin可促進脂肪細胞的分化，參與成熟脂肪細胞的脂肪分解，chemerin與LDL-C相關，提示chemerin還參與NAFLD的脂代謝。但本研究chemerin與hs-CRP、臀圍、WHR、身高、體質量、BMI、TC、TG、HDL-C、FBG、2hPG、FINS、HOMA-IR 、HbA1c無相關性。

本研究表明TNF-α、IL-6是血漿chemerin的影響因素，TNF-α、IL-6可導致糖尿病患者胰島素抵抗，增加糖尿病患者脂肪肝的發生率。由此推論T2DM患者炎癥、胰島素抵抗與NAFLD的發生、發展密切相關，而chemerin在這個環節起到重要作用。內臟脂肪面積也是影響血漿chemerin的危險因素，這可能與chemerin主要由內臟脂肪組織產生有關。

Chemerin的表達受炎性因子的調節。Parlee等[4]研究發現TNF-α可增強chemerin前體在脂肪細胞中的合成和分泌。國內研究發現高脂飲食誘導的非酒精性脂肪肝C57BL/6小鼠模型與對照組相比，肝臟chemerin的mRNA表達下調，但是肝臟中chemer?in R的mRNA表達卻上調[5]。肝臟chemerin的mRNA表達下調是由炎癥使脂肪變的肝細胞氧化應激、脂質過氧化不斷加重，肝細胞的功能和完整性遭破壞所致；而chemerin R mRNA表達上調可能與TNF-α促進單核細胞chemerinR表達有關[5]。

[1]Kukla M,Zwirska-Korczala K,Hartleb M,et al.Serum Chemerin and vaspin in non-alcoholic fatty liver disease[J].Scand J Gastroen?terol,2010,45(2):235-242.

[2]中華醫學會肝病學分會脂肪肝和酒精性肝病學組.非酒精性脂肪性肝病診療指南（2010年修訂版）[J].中華肝臟病雜志，2010，18(3)：163-166.

[3]Lehrke M,Becker A,Greif M,et al.Chemerin is associated with markers of inflammation and components of the metabolic syndrome but does not predict coronary atherosclerosis[J].Eur J Endo crinol,2009,161(2):339-344.

[4]Parlee SD,Ernst MC,Muruganandan S,et al.Serum chemerin levels vary with time of day and are modified by obesity and tumor necro?sis factor-{alpha}[J].Endocrinology,2010,151(6):2590-2602.

[5]張強，朱榕峰,劉爽，等.高脂誘導非酒精性脂肪性肝病小鼠肝臟Chemerin及其受體的表達[J].新鄉醫學院學報,2009，26(3)：224-228.