2010年北京地區市售注射用哌拉西林鈉/舒巴坦鈉質量評價

寇晉萍，方 穎，余 立，王俊秋（北京市藥品檢驗所，北京市 100035）

哌拉西林屬青霉素類廣譜抗生素，通過干擾細菌細胞壁的合成而起殺菌作用，主要用于銅綠假單胞菌和各種革蘭陰性桿菌所致的感染。但哌拉西林易被細菌產生的β-內酰胺酶水解而產生耐藥性；舒巴坦除對奈瑟菌科和不動桿菌有抗菌活性外，對其他細菌無抗菌活性，但是舒巴坦對耐藥菌株產生的β-內酰胺酶具有不可逆性的抑制作用，因此可防止耐藥菌對青霉素類和頭孢菌素類抗生素的破壞，與青霉素類和頭孢菌素類具有明顯的協同作用[1]。注射用哌拉西林鈉/舒巴坦鈉作為一種能有效降低細菌耐藥作用，且具有良好協同作用的復方廣譜抗生素制劑，在臨床上被廣泛應用，但隨之而來的是其不良反應日益顯現[2]。該品種在北京地區也有若干生產企業產品在售，為有效監控藥品質量，保證用藥安全，并為臨床醫師選擇藥品提供依據，2010年北京市藥品監督管理局對注射用哌拉西林鈉/舒巴坦鈉進行了評價性抽驗。本次抽驗，從各醫療機構及經營企業共得到4個生產企業的21批次樣品，涵蓋1.25、1.5、2.5、3.0 g 4種規格。筆者分別按現行法定標準及非標文獻[3]方法進行了質量考察，詳細如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

LC-20A高效液相色譜（HPLC）系統，包括LC-20AT泵、SIL-20AC自動進樣器、CBM-20A控制器、SPD-M 20A檢測器、CTO-20A柱溫箱及LC-Solution工作站（日本島津公司）；BP211D電子天平（德國Sartorius公司）。

1.2 試藥

哌拉西林標準品（批號：130419-200103，純度：90.5%）、舒巴坦標準品（批號：130430-200906，純度：89.7%）均由中國食品藥品檢定研究院提供；乙腈、甲醇均為色譜純，四丁基氫氧化銨、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、醋酸、磷酸均為分析純；注射用哌拉西林鈉/舒巴坦鈉由國內A、B、C和D企業生產，具體情況詳見表1。

表1 樣品概況Tab 1 General information of samp les

2 方法與結果

2.1 采用現行標準的檢驗情況

注射用哌拉西林鈉/舒巴坦鈉各國藥典均未收載，因此沒有統一的法定標準。目前國內批準生產的企業有8家，批準文號17個，各自有相應的國家藥品標準。本次抽驗涉及4個生產企業、5個批準文號，對應使用5個國家藥品標準檢驗，檢驗標準[4～8]的比較詳見表2；各標準設置的檢驗項目和方法基本一致，限度要求略有差異，經分別檢驗后，具體結果詳見表3（注：所有批次的鑒別（液相色譜、鈉鹽）及一般檢查項目（酸度、溶液的澄清度與顏色、平均裝量、可見異物、不溶性微粒、無菌、熱原、細菌內毒素等）均符合規定，故在表中未列出；Y4、YG4、Y3、YG3指標準比色編號）。

經檢驗，所有批次的樣品均符合現行質量標準。

2.2 采用非標文獻方法的檢驗情況

哌拉西林為β-內酰胺類抗生素，該類化合物由于結構中含有β-內酰胺環，非常容易開環而形成開環物，造成分子間和分子內的聚合而形成高分子聚合物。研究[9]顯示，β-內酰胺類抗生素引發的速發型過敏反應與藥物中存在的高分子雜質有密切的關系，其含量的高低與臨床不良反應發生率相關性很高。通過對藥品中高分子雜質的控制，可以有效減緩速發型變態反應第2階段的進行，減少臨床不良反應的發生[10]。β-內酰胺類抗生素中存在的高分子雜質主要包括外源性高分子雜質（主要為生產過程中引入的蛋白類或肽類大分子物質）和內源性高分子雜質（即聚合物）2大類，外源性的高分子雜質可以通過控制生產原料有效排除，因此控制聚合物這類高分子雜質的含量是降低過敏反應發生率的有效手段?，F行檢驗標準中有關物質的檢查方法均不能有效地檢測到聚合物這類高分子雜質，因此現采用王成剛等[3]建立的高效分子排阻色譜法考察注射用哌拉西林鈉/舒巴坦鈉中高分子雜質的含量，測定方法及結果如下：

表2 注射用哌拉西林鈉/舒巴坦鈉各檢驗標準比較Tab 2 Comparison of the specification standard of Piperacillin sodium/sulbactam sodium for injection

表3 不同生產企業樣品的質量考察結果Tab 3 Evaluation results of the products from different manufacturers

2.2.1 色譜條件。色譜柱：TSK-GEL G2000SWXL（30 cm×7.8mm，5μm）；流動相：0.01mol·L－1醋酸銨（用稀氨溶液調節pH值至7.0）-乙腈＝90∶10，流速：0.6m L·m in－1；檢測波長：254 nm。

2.2.2 測定方法及結果。精密稱取本品適量，加水溶解制成每1m L中含哌拉西林1mg的溶液，作為供試品溶液；另精密稱取哌拉西林標準品適量，加甲醇適量使溶解，加水稀釋制成每1m L中約含10μg的溶液，作為對照溶液。精密量取對照溶液20μL，注入液相色譜儀，調節檢測靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的20%～25%，立即精密量取供試品溶液與對照溶液各20μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜，按外標法以峰面積計算，保留時間小于哌拉西林的各高分子雜質總量以哌拉西林計。所有樣品的測定結果詳見表4。

從表4可見，不同生產企業產品中高分子雜質含量測定結果具有明顯差異。

3 討論

（1）2010年北京地區市售的復方抗生素制劑注射用哌拉西林鈉/舒巴坦鈉，經考察所有批次樣品均符合現行標準規定，不同企業產品質量略有差異，主要表現在以下幾個方面：①性狀不同：不同的生產工藝造成產品的性狀不同，主要分為直接無菌分裝生產的粉末狀固體和溶解后冷凍干燥制成的疏松塊狀物。②水分差異：各生產企業工藝控制的程度以及包裝不同，造成藥品水分含量的差異。③有關物質含量差異：與生產工藝有關，根據樣品性狀與有關物質含量之間的對應關系，可以看出冷凍干燥的制備工藝使成品中雜質含量水平較低，似更適合本品的生產。④無水物含量：由于各生產企業產品中哌拉西林和舒巴坦的比例不同（生產企業A二者比例為2∶1，其他各生產企業二者比例為4∶1），因此每1mg中的含量水平不同。

表4 不同生產企業樣品中高分子雜質含量測定結果比較Tab 4 Results of content determ ination of high molecular im purities in products from differentmanufacturers

（2）我國現行法定檢驗標準中均未控制哌拉西林中高分子雜質的含量，而此次在21批產品中均檢出了高分子雜質，含量在0.42%～2.66%之間，不同生產企業的樣品存在明顯差異。根據前述，高分子雜質是引起不良反應中過敏反應的主要原因。通過10 000例臨床試驗[10]結果顯示，同類抗生素的高分子雜質含量低于某一限度時（青霉素V鉀＜0.2%、阿莫西林＜0.1%、氟氯西林＜1.5%等），對于青霉素過敏史患者的過敏反應發生率處于較低水平，為0.2%～0.7%。注射用哌拉西林鈉/舒巴坦鈉的不良反應發生率日漸上升，據統計[2]，其中有1/3的不良反應為過敏反應，因此更應該嚴格控制樣品中易引起過敏反應的高分子雜質含量。建議在檢驗標準中增加哌拉西林高分子雜質含量檢查項。

[1]孫明杰，呂華沖，王 霆.注射用哌拉西林鈉/舒巴坦鈉（2∶1）[J].中國新藥雜志，2007，16（13）：1 061.

[2]董 濤.32例注射用哌拉西林舒巴坦鈉（2∶1）不良反應分析[J].中國醫藥導報，2009，6（29）：121.

[3]王成剛，劉海濤，王俊秋，等.不同生產企業注射用哌拉西林鈉/舒巴坦鈉的質量考察[J].中國臨床藥理學雜志，2010，26（11）：839.

[4]國家食品藥品監督管理局.國家食品藥品監督管理局標準（試行）YBH21102005[S].2005.

[5]國家食品藥品監督管理局.國家食品藥品監督管理局標準（試行）YBH21472005[S].2005.

[6]國家食品藥品監督管理局.國家食品藥品監督管理局標準（試行）YBH02642004[S].2004.

[7]國家食品藥品監督管理局.國家食品藥品監督管理局標準（試行）YBH04382005[S].2005.

[8]國家食品藥品監督管理局.國家食品藥品監督管理局標準（試行）YBH16532005[S].2005.

[9]金少鴻，胡昌勤.β-內酰胺類抗生素過敏反應研究進展[J].中國新藥雜志，1994，3（4）：38.

[10]胡昌勤.抗菌藥中高分子雜質的特性和抗菌藥過敏反應（上）[J].中國藥師，2006，9（3）：238.