不同發育期黃牛血漿 心肌中心鈉素的測定

沈明華，李 莉，俞紅賢

（青海大學農牧學院，青海 西寧 810016）

心鈉素是通過自分泌、旁分泌、胞內分泌及周身分泌而產生的心源性的肽類激素，也稱心房利鈉多肽（atrial natriuretic peptide，ANP）。ANP主要存在于哺乳動物的心房肌細胞的胞漿中，具有強大的利鈉、利尿、擴張血管、減少血容量、降低血壓、參與水鹽代謝的作用，此外ANP在肺循環中也有重要的作用，可抑制去甲腎上腺素、血管緊張素、組胺、5-HT等引起的肺動脈和支氣管收縮，同時還具有促進肺泡表面活性物質的分泌而改善肺通氣防止肺水腫發生的功能；在腦組織視上核，ANP提高滲透壓閾值，抑制渴閾從而使機體適應提高了滲透壓的內環境；在胰臟，調整胰腺內分泌，促進胰腺外分泌，從而促進消化功能；在胃腸道促進對鹽的吸收，從而促進吸收功能；還具有增強巨噬細胞吞噬，增強免疫功能等等。研究表明，ANP對心臟功能的調節具有重要作用，血漿ANP含量和心肌組織中ANP的變化反映了心臟內分泌功能改變的情況。當前對ANP的生理、生化、藥理及臨床應用的研究正逐步完善，為了探討ANP分泌調節與生長發育期的關系，筆者等對1日齡、1月齡、6月齡、成年等不同發育期的黃牛血漿、心肌中ANP含量進行了測定，報告結果如下。

1 材料與方法

1.1 試驗動物 山東省萊蕪市某牛場（海拔400m左右）黃牛，按出生年齡分為1日齡、1月齡、6月齡、成年組（13周歲左右）4組，每組5頭份，不分性別，均臨床健康，營養狀況良好。血樣在屠宰前頸靜脈采血，用10%EDTA-Na2及抑肽酶抗凝分離血漿，-20℃冷凍保存，心肌組織在屠宰后液氮保存送實驗室備用。

1.2 儀器和試劑 自動放免儀（中國科大中佳公司提供），ANP放射免疫分析藥盒，購自中國原子能科學研究院同位素研究所，批號：S10950119。

1.3 測定方法 血漿ANP測定按試劑盒說明書操作；心肌組織解凍后濾紙吸去表面殘血，分別精確稱取50mg，加入1mL 0.05mol／L Tris-HCl緩沖液（pH值=7.2）碾磨，沸水浴中10min，制成勻漿，4℃～3000r／min離心15min，取上清液按試劑盒說明書操作測定ANP含量。

1.4 數據處理 所有數據采用SPSS（11.0版）軟件進行方差分析及Duncan′s多重比較，組間差異用t檢驗，數據以均數±標準差（）表示。

2 結果

不同發育期黃牛血漿和心肌組織中的ANP含量見表1。

表1 不同發育期黃牛血漿、心肌中ANP的含量 （pmol／L）

1日齡組血漿中ANP含量低于其他3個年齡組，差異顯著（P＜0.05），1月齡組已達到與成年組相同水平（P＞0.05）。隨著年齡的增加左右心房肌中ANP含量逐漸增加，到6月齡時差異顯著（P＜0.05），而左右心室肌中ANP含量無明顯變化（P＞0.05）。

心房肌中ANP的含量明顯高于血漿和心室肌（P＜0.01），6月齡組左、右心房肌中ANP的含量均顯著高于1日齡組和1月齡組（P＜0.05）。每個年齡組心肌不同部位ANP的測定結果顯示，ANP含量有多至少依次為：左心房、右心房、右心室、左心室。

3 討論

3.1 ANP是近年發現的動物活性多肽，廣泛分布于心、肺、腎及神經系統中。能調節心臟功能、改善心律失常、增加微循環，具有舒張冠狀動脈及肺動脈，增加心肌供血和提高微循環血流量的作用，ANP可通過利鈉、利尿作用減少容量負荷，改善心功能，還可作為神經遞質影響神經細胞的興奮性 ，調節某些激素的釋放。因此，內源性ANP增加是機體重要的保護性代償反應，對維持心血管系統功能穩定起重要作用［1］。本試驗中隨著年齡的增長黃牛血液中ANP的含量顯著增加（P＜0.05），心房肌中ANP含量逐漸增加，到6月齡時差異顯著（P＜0.05）。可以看出隨著黃牛機體的不斷發育，其循環系統功能逐漸提高，心房肌處于分泌活躍的釋放狀態，對心肌和肺臟都起到一種很好的代償性保護作用，揭示了黃牛心臟具有很好的適應能力和良好的內分泌調節機制。

3.2 多數研究認為，ANP主要由心房合成分泌 ，也有研究發現肺及心室也參與ANP的分泌和合成［2］。本試驗中，不同年齡段黃牛心房肌中ANP的含量均明顯高于血漿和心室肌（P＜0.01）。各年齡段黃牛心肌不同部位分泌結果顯示，ANP分泌有多至少依次為：左心房、右心房、右心室、左心室，表明心房是分泌ANP的主要部位，且以左側心房肌分泌居多。

3.3 本研究中，1日齡黃牛血漿中ANP含量顯著低于其他3個年齡組；其他3個年齡組之間差異不顯著（P＞0.05）。據羅世生等［3］報道，胎兒及新生兒早期ANP較成人高，這是新生兒為適應生后循環變化的一種生理調節過程，也是導致新生兒早期生理性體重下降和早產兒低鈉血癥的直接原因，隨著年齡的增長，心肌ANP含量降低，提示這種代償能力隨年齡增長進行性減弱。李莉等［4］報道，牦牛隨著年齡的增長血液中的ANP含量逐漸降低，而本試驗中黃牛隨著年齡的增長血液中ANP含量呈逐漸增高趨勢（P＜0.01），且1日齡和1月齡時黃牛血漿中ANP含量均低于相同年齡段牦牛，到了6月齡和成年時均顯著高于相同年齡段牦牛（P＜0.05），這與李莉報道的牦牛隨年齡的增長血漿中ANP含量呈現遞減趨勢有所不同，這是否與動物品種或動物所生活的環境有關，有待進一步研究。

［1］Grlnstead W C，Young J B.The myocardial renin-angiotensin system：existence，importance and clinical implications［J］.Am Heart，1992，123：1039-1045.

［2］喬珊，孫艷蓀，王小花.睡眠呼吸暫停／低通氣綜合征患者心鈉素變化及意義［J］.中國呼吸與危重監護雜志，2004，3：43-46.

［3］羅世生，徐昭文.心房利鈉多肽的某些研究進展［J］.臨床薈萃，1994，9（10）：442-445.

［4］李莉，俞紅賢.不同發育期牦牛血漿和心肌中心鈉素的測定意義［J］.中國獸醫雜志，2007，43（3）：13-14.