毛木耳菌絲體營養優勢菌株的篩選研究*

趙 爽， 布 達， 劉 宇， 許 峰， 耿小麗， 王守現， 孟莉莉

（1.北京農林科學院植保環保研究所，北京 100097；2.河南農業大學生命科學學院，河南 鄭州 450002）

毛木耳Auricularia polytricha(Mont.)Sacc.，隸屬于擔子菌門、層菌綱、木耳目、木耳科、木耳屬，自然情況下主要分布在熱帶和亞熱帶地區。毛木耳的生命力強，適應性廣，栽培方法簡便，生產周期短，產量高，所以是一個世界性的重要栽培品種，主要栽培地區涉及到我國南方和東南亞一些國家[1]。

毛木耳是一種藥食同源的食用菌，作為食品其脆而有韌性，口感好，別有風味，是深受消費者歡迎的一種食用菌食品。每100克干品含粗蛋白質7 g～9.1 g、粗脂肪0.6 g～1.2 g、 碳水化合物 64.6 g～69.2 g、 粗纖維 9.7 g～14.3 g、灰分 2.1 g～4.2 g， 熱量 1230.10 kJ～1334.70 kJ。 還含胡蘿卜素 0.01 mg、 硫胺素 0.09 mg～0.36 mg、 抗壞血酸 7.04 mg～8.35 mg 以及尼克酸 1.7 mg～4.0 mg[2]。毛木耳中富含 Zn、Fe、 Ca、 Mg、 Cu、 Mn、 K、 Na等人體需要的微量元素[3]。

中醫認為，毛木耳具有滋陰強陽、清肺益氣、補血活血、止血止痛的功效，是一種具有保健功能的食品[4]。從藥用價值上分析，毛木耳的腺苷成分，具有抑制二磷酸腺苷（ADP）誘導血小板聚集的作用，對動脈粥樣硬化的發生具有保護作用，毛木耳的粗多糖也能夠誘導血小板的聚集，并且具有明顯的量效關系[5]。其中，蛋白質和多糖是毛木耳發揮功效的重要營養物質，本研究以這兩個指標為基礎對保藏的不同品種的毛木耳進行測定，以篩選出利用價值高的毛木耳品種。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 供試菌株

供試的毛木耳菌株為本實驗室多年保藏菌株，分別為毛木耳雜交6號、毛木耳雜交34號、毛木耳白背120、毛木耳特大、毛木耳西南召、毛木耳紫木耳、毛木耳781、毛木耳福建農和毛木耳豐收一號。

1.1.2 培養基

綜合PDA培養基：馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、瓊脂粉20 g（北京夢怡美公司）、KH2PO43 g、VB110 mg（湖北華中藥業）、蛋白胨5 g（北京奧博星公司，總氮＞9%、氨基氮＞3%）、MgSO41.5 g，蒸餾水1000 mL；綜合 PDA液體培養基為上述培養基不添加瓊脂粉，其它試劑均為分析純，購自北京化學試劑公司。

1.1.3 試劑

BCA蛋白定量試劑盒購于北京博邁德科技公司，苯酚、濃硫酸、NaCl和乙醇均為分析純，購自北京化學試劑公司。

1.1.4 實驗儀器

生物安全柜MSC 1.2，美國Thermo公司；全波長酶標儀VERSA max，美國Molecular Devices公司；精密天平AR2140，美國奧豪斯公司；旋轉蒸發儀RE－52AA，上海振捷公司；恒溫培養搖床HZQ－F160，江蘇太倉公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 菌種活化及培養

將毛木耳斜面菌株接種到綜合PDA平板上進行活化，25℃恒溫培養，待菌絲長滿平板后將其接種到液體培養基中，25℃、160 r·min－1搖瓶培養7 d后，再轉接1次液體搖瓶培養7 d后收集菌絲體，存于－20℃冰箱內待用。

1.2.2 菌絲體蛋白質含量的測定

標準曲線的制作：利用標準樣品小牛血清蛋白（BSA）配置成不同濃度的蛋白溶液，采用BCA蛋白定量試劑盒制作標準曲線[6]。

根據趙爽等改良的方法，用BCA蛋白定量試劑盒測定9個品種菌絲體中蛋白質的含量[6]。

1.2.3 菌絲體水溶性多糖含量的測定

標準曲線制作：將葡萄糖 105℃烘干至恒重，配置成不同濃度溶液，采用苯酚－硫酸法制作葡萄糖標準曲線[6，7]。

同樣根據改良后的多糖測定法，采用苯酚－硫酸法測定9個毛木耳品種中水溶性多糖的含量。

2 結果與討論

通過BCA和苯酚－硫酸法制作出蛋白質和葡萄糖的標準曲線[6]，根據分光光度法測定出樣品的吸光度值回歸到線性方程中，可計算出9個品種菌絲體的蛋白質和水溶性多糖的含量，具體測定結果見表1和表2。

通過分析比較發現，毛木耳福建農、毛木耳特大木耳品種和毛木耳紫木耳菌絲體中蛋白質含量相對較高，分別占菌絲體鮮重的8.99%、7.759%和7.528%，是蛋白質含量篩選中的優勢菌株；在水溶性多糖含量比較中發現，毛木耳紫木耳、毛木耳特大木耳和毛木耳豐收一號3個品種的水溶性多糖含量較高，分別占菌絲體干重的2.625%、1.55%和1.525%，與其它品種比較均達到了顯著性差異的程度，為水溶性多糖篩選中的優勢菌株。

為建立種質資源信息平臺，本實驗室測定了不同品種菌絲體的蛋白質和多糖含量，比較發現，毛木耳福建農菌絲體中蛋白含量明顯高于姬松茸的優勢菌株姬松茸11號，是其的1.64倍，毛木耳紫木耳菌絲體中多糖含量明顯高于姬松茸中優勢菌株姬松茸7號，是其含量的1.75倍[6]。這種差異可能是來自于種間的差異，也與不同菌種的生長周期和生長史有關系，同時發酵條件也是導致營養物含量變化的一個至關重要的因素。

表1 9個毛木耳品種菌絲體蛋白含量測定結果

表2 9個毛木耳品種菌絲體多糖含量測定結果

由于蛋白質和多糖含量在同一物種不同品種間存在一定的差異，所以在毛木耳功能產物加工中，可以根據需求選定毛木耳品種，通過改良發酵工藝使目標產物最大化生產，為深加工產品的開發提供穩定的材料來源，也為擴大栽培提供理論基礎，同時本研究數據可以為毛木耳種質資源庫提供有力的營養學數據。

3 結論

經過本實驗研究，毛木耳福建農是9個品種中蛋白質含量最高的菌株，毛木耳紫木耳是所有檢測品種中水溶性多糖含量最高的菌株，從營養、功能性角度分析它們都屬于優勢菌株，可以作為擴大栽培或深加工的優勢材料，用以進一步挖掘毛木耳的可利用資源。

[1]羅信昌，陳士瑜.中國菇業大典[M].北京：清華大學出版社，2010.

[2]張丹，鄭有良.毛木耳 (Auricularia polytricha)的研究進展[J].西南農業學報， 2004， 17(5)： 668－673.

[3]呂文英.黑木耳和毛木耳中無機營養元素含量的測定與研究[J].微量元素與健康研究，2007，24(4)：30－31.

[4]高峰，謝凌慧，盧偉，等.毛木耳液體菌種的研究及栽培試驗[J].中國食用菌， 2009， 28(3)： 32－34.

[5]趙因，張悅.毛木耳的藥理作用及其臨床應用 [J].基層中藥雜志，2001， 15(1)： 49.

[6]趙爽，劉宇，王守現，等.不同品種姬松茸菌絲體蛋白質和水溶性多糖含量的研究[J].食品工業科技，2010，31(12)：121－122，126.

[7]張維杰.糖復合物生化研究技術 （第二版）[M].杭州：浙江大學出版社，1994.