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進食栗山天牛粉對小鼠血生化指標的影響1)

2011-08-09 11:08:04李大軍高程程高峻崇
東北林業大學學報 2011年9期
關鍵詞:小鼠水平

李大軍 高程程 王 寶 高峻崇

(吉林農業大學,長春,130118) (吉林省森林病蟲防治檢疫總站)

栗山天牛(Mallambyx raddei Blessig)是一種重要的蛀干害蟲,寄生于櫟、蘋果、梨、梅等林木和果樹,現階段主要通過燈光誘捕天牛成蟲來控制。民間早有食用昆蟲的習慣,天牛營養含量豐富,黃瓊等[1]的研究表明,星天牛(Anoplophora chinensis)和粗鞘雙條杉天牛(Semanotus sinoauster Gressitt)幼蟲蛋白質為其鮮質量的16%~18%,粗脂肪約為其鮮質量的13%,其中不飽和脂肪酸所占比例約為總脂肪的77%。還有研究表明,天牛翼翅富含甲殼素[2-3]。李大軍等[4]的研究表明,栗山天牛成蟲干樣蛋白質質量分數為46%,甲殼素抽提得率為17%,且含有豐富的游離氨基酸,食用后對動物體具有潛在的生物學效果。但是《本經逢原》記述,天牛:甘,溫,小毒;《中國藥用動物志》記述,云斑天牛(Batocera horsfields)可活血祛瘀,鎮肝熄風,散瘀解毒?,F代對于天牛食用安全性方面的科學研究未見報道。在森林防護工作中,人工捕獲天牛成蟲需要繁重的人工投入,天牛回收量大。如能安全食用或飼用栗山天牛成蟲,對促進林業害蟲人工防治工作有重要的實際意義。本研究把天牛處理后飼喂小鼠,分析比較進食不同劑量的天牛粉后,小鼠血6種生化指標的劑量效應反應關系,探討天牛食用的安全性和食藥開發潛力。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

栗山天牛成蟲(吉林永吉林業站捕獲,冷凍致死,室溫風干,研磨成粉,由吉林農業大學食品科學與工程學院實驗室儲備),玉米、豆餅、基礎飼糧為市售,實驗動物KM小鼠(吉林農業大學食品科學與工程學院實驗室自繁)。

1.2 飼糧準備

參照實驗動物飼料標準[5],飼糧由基礎飼糧和玉米、豆餅、天牛粉組成,調整營養水平使其最大程度地保持相近,營養指標見表1。KM小鼠飼糧天牛粉加入劑量分別為12.5%、25.0%、50.0%、100.0%,以不加天牛粉為對照。

表1 小鼠飼糧組成與營養指標 %

1.3 動物分組

將平均體質量為(22.50±1.70)g的60只清潔級KM小鼠編號并隨機分為5組,每組12只,雌雄各半,分別投給5種飼糧。雌、雄分籠飼養于潔凈度10 000級的SPF環境中28 d,室溫(23±4)℃,相對濕度(50±5)%,飲水瓶飲水,每日10 h光照。試驗期監測體質量和進食量變化。

1.4 采血

試驗期末摘除空腹小鼠眼球放血,放入Eppendorf管中,4℃、2 000 r/min、5 min離心分離取血漿,用CB171半自動生化分析儀檢測血生化指標。

1.5 血生化指標檢測

血生化指標檢測參照試劑盒標明的方法,其中甘油三酯、總膽固醇、血糖水平檢測,采用醌亞胺比色法;白蛋白水平檢測,采用溴甲酚綠比色法;尿素氮、丙氨酸氨基轉移酶、天門冬氨酸氨基轉移酶水平檢測,采用煙酰胺腺嘌呤二核苷酸比色法;堿性磷酸酶水平檢測,采用對硝基苯酚比色法。

1.6 數據分析

采用SPSS11.0軟件,以LSD法檢驗各處理組的血生化指標與對照組的統計學差異。

2 結果與分析

進食天牛粉飼糧小鼠的血生化指標如表2所示。與對照相比,試驗結束時,飼糧為100%天牛粉的小鼠體質量顯著降低,血漿總膽固醇、尿素氮水平顯著升高(p<0.05),白蛋白值顯著降低(p<0.05),堿性磷酸酶活性降低(p=0.063);飼糧含50%天牛粉處理的小鼠,其尿素氮、天門冬氨基轉移酶活性升高(p<0.05)。

3 結論與討論

天牛粉具有高蛋白(46.3%)、高脂肪(15.2%)的營養特點。在小鼠飼糧中添加天牛粉的比例越高,蛋白質和脂肪水平越高。飼糧天牛粉質量分數50%以下時,并沒有引起小鼠血漿甘油三酯、總膽固醇和血糖水平的顯著變化,顯示該劑量的飼糧脂肪水平能夠被小鼠接受。然而,進食全天牛粉飼糧小鼠的血漿總膽固醇升高,可直接導致碳水化合物供應不足使血糖降低。天牛殼聚糖含量豐富[2],但其對調節血糖水平的影響還需要試驗驗證。天牛粉比例大于50%,飼糧蛋白質水平則大于32%,相比GB 14924.3—2001推薦量20%的蛋白質水平[4]已經過高,致使小鼠血尿素氮水平顯著升高。反映了蛋白質營養過剩,這可能是引起一系列生化指標變化的主要原因。高蛋白和高脂肪營養可能使機體代謝負擔加重,代謝平衡發生變化。由于全天牛粉日糧的蛋白質和脂肪水平遠高于推薦標準,導致本試驗的全天牛粉日糧組小鼠的肝臟對過量蛋白質、脂肪的代謝負擔加重,飼糧理想氨基酸平衡變差,進而引起機體合成白蛋白能力降低,免疫機能下降。肝、心、腎損傷或藥物作用可通過ALT、AST、ALP等酶指標以及BUN、Glu、TCh、Alb 的變化反應出來[6-7]。ALT 活性的降低和AST活性的提升,反映糖異生能力的下降和蛋白質核酸代謝的活躍。這與飼糧天牛粉比例小于50%的條件下,實驗動物血糖水平降低,血漿白蛋白及尿素氮水平的波動相關。ALP主要分布于肝臟、骨骼、腎臟等組織氣器,當以上組織器官損傷時,血清ALP可升高[6],極端營養條件下堿性磷酸酶活性的降低反映機體總體代謝機能的衰弱。酶學指標變化幅度較小,總體反映出天牛粉不能對小鼠肝、心和腎產生實質性損傷或毒性。

表2 進食天牛粉飼糧小鼠的血生化指標

小鼠以天牛粉為單一食物時,高蛋白、高脂肪營養使總代謝氮水平和脂肪過剩導致血尿素氮和血清總膽固醇升高,白蛋白水平降低。碳水化合物供應減少致使血糖水平傾向于下降。丙氨酸氨基轉移酶、天門冬氨酸氨基轉移酶、堿性磷酸酶水平沒有受到進食全天牛粉飼糧的影響。小鼠正常進食天牛粉比例小于25%的飼糧時,天牛粉對小鼠生化指標無異?;虿焕绊懀伙@示血生化指標毒性效應。

[1]黃瓊,周祖基,周定剛,等.兩種天牛的營養成分分析[J].東北林業大學學報,2007,35(1):49-52.

[2]Jensen M,Weis-Fogh T.Biology and physics of locust flight V.Strength and elasticity of locust cuticle[J].Philos Trans R Soc London,1962,245:137-169.

[3]Chen Jinxiang,Ni Qingqing,Xu Yinglian,et al.Lightweight composite structures in the forewings of beetles[J].Composite Structures,2007,79(3):331-337.

[4]李大軍,宋海明,王寶.栗山天牛成分分析[J].吉林林業科技,2011,40(1):17-19.

[5]衛生部.GB 14924.3—2001.實驗動物小鼠、大鼠配合飼料標準[S].北京:中國標準出版社,2001.

[6]王天成,張智勇,賈光,等.納米氧化鎂對小鼠血清生化指標的影響[J].中國工業醫學雜志,2005,18(3):140-142.

[7]孫鳳祥,翟筱,崔群,等.丙烯酰胺對染毒小鼠血清生化指標的影響[J].濰坊醫學院學報,2002,24(1):64-65.

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