COX-2在乳腺癌組織的表達及其臨床病理意義

畢麗榮,楊 明,王悅增,茅淑硯

(1.吉林大學白求恩第一醫院病理科;2.吉林大學白求恩第一醫院乳腺外科;3.吉林大學病理生物學教育部重點實驗室,吉林長春 130021）

環氧合酶(Cyclooxygenase,COX）是催化花生四烯酸轉化為前列腺素的重要限速酶,它有2種同工酶:COX-1和COX-2。COX-1在大多數組織中均有表達,參與機體正常的生理功能,如保護胃黏膜,控制血小板聚集等;COX-2靜息時并不表達,但在細胞因子、生長因子、癌基因等刺激因子的作用下可被誘導表達。近年來研究表明,COX-2在多種腫瘤組織中過度表達,通過多種機制參與腫瘤的發生、發展和轉移[1]。我們應用免疫組化的方法檢測了乳腺癌組織中COX-2的表達,并探討其與臨床病理指標的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2007年8月-2009年5月在吉林大學第一醫院行乳腺癌改良根治術,并經病理證實的腫瘤石蠟標本46例,均為浸潤性癌,術前均未行化療或放療及內分泌治療。同時取距癌旁2cm患者正常乳腺組織10例,乳腺良性病變10例作為對照。本組病例均為女性,年齡23歲-69歲,平均年齡48.5歲。病理類型:浸潤性導管癌35例,浸潤性小葉癌3例,其他類型浸潤性癌8例。腫瘤分期:Ⅰ期8例、Ⅱ期30例、Ⅲ期8例。雌激素受體(ER）陰性18例、ER陽性28例。孕激素受體(PR）21例、PR陽性25例。HER-2陽性14例,HER-2陰性32例。所有病例均無非甾體類抗炎藥和糖皮質激素長期用藥史。

1.2 方法

組織經10%的甲醛固定,常規石蠟包埋,組織切片厚4 μ m,免疫組織化學檢測所用兔抗人COX-2單克隆抗體及SP通用試劑盒均購自福州邁新生物制品有限公司,工作濃度為1∶100。采用免疫組化SP法,高溫修復抗原,操作嚴格按照試劑盒說明進行,并用PBS代替一抗作為陰性對照。用已知肺癌陽性標本作陽性對照。

1.3 COX-2的評定標準

COX-2的免疫組化染色以細胞漿內出現棕黃色顆粒為陽性表達。COX-2采用半定量記分法,根據切片陽性細胞率和陽性細胞著色強度分別記分,胞漿內或(和）核膜呈棕黃色者為陽性,無細胞染色記0分,＜10%為1分,10%-50%為2分,50%-80%為3分,＞80%為4分;著色強度:陰性為0分,弱陽性為1分,陽性為 2分,強陽性為3分,以上兩項之乘積小于6分為陰性表達,6-12分為陽性表達。

1.4 統計學處理

應用SPSS13.0統計軟件進行 χ2檢驗,以P＜0.05為有統計學意義。

2 結果

2.1 COX-2的表達情況COX-2免疫組化染色主要定位于細胞漿,(見圖1）本組46例乳腺癌標本中29例呈COX-2陽性表達,陽性表達率為63%;10例良性病變中有1例陽性表達,陽性表達率為10%,10例癌旁正常組織中有1例呈陽性表達。乳腺癌組織和良性病變以及癌旁組織中COX-2表達率相比均有顯著性差異(P＜0.01）。(見表1）,而良性病變和癌旁組織之間無差異。

圖1 COX-2主要在胞漿表達(200×）

表1 COX-2在乳腺癌、乳腺良性病變及癌旁組織的表達

2.2 COX-2表達與乳腺癌臨床病理指標之間的關系COX-2在乳腺癌組織中的表達與年齡、腫瘤大小、ER、PR等無關,與HER-2陽性和淋巴結轉移有關(p＜0.01）。(見表2）

表2 COX-2表達與乳腺癌臨床病理指標的關系

3 討論

本組研究46例乳腺癌標本中,有29例呈COX-2陽性表達,陽性表達率為63%(29/46）。10例癌旁組織中,1例呈陽性表達,表達率為10%(1/10）,10例良性病變中陽性表達率也為10%,癌組織和癌旁及良性病變中的表達有顯著性差異(P＜0.01）,而癌旁組織和良性病變之間沒有差異。與文獻報道[2-5]結果相似。這一結果提示了COX-2參與乳腺癌的發生、發展,也可以間接作為判斷良惡性的指標之一。Shim等[6]研究表明,COX-2在DCIS中高表達,并提示COX-2是乳腺癌早期事件,在乳腺癌的早期即發揮作用。目前認為COX-2促進乳腺癌發生和發展的機制有:促進腫瘤細胞增殖,抑制腫瘤細胞凋亡,促進腫瘤新生血管形成等[7,8]。由于COX-3在乳腺癌的原位癌和浸潤癌階段都過表達,明顯高于周圍正常組織和良性病變,因此其可以作為腫瘤治療的靶點之一,在乳腺癌的各個階段應用抑制劑都有可能抑制腫瘤的生長和侵襲,改善患者的預后。

目前HER-2已被公認為與乳腺癌發生發展密切相關的原癌基因,參與調控細胞生長、增殖及分化,其產物過度表達常提示腫瘤惡性程度高,臨床預后差[9]。本組病例的結果顯示,COX-2的表達和HER-2表達明顯相關(＜0.05）,與文獻報道[2,3,5]結果相似,提示COX-2有可能和HER-2一樣成為判斷預后的指標之一。

淋巴結轉移狀況是判斷乳腺癌預后的最重要的指標。Ristimaki等[10]對1576例浸潤性乳腺癌標本研究后證實,COX-2的表達與腋淋巴結轉移呈正相關。本研究顯示COX-2在乳腺癌組織中的表達與腫瘤大小,ER、PR等無關,而與HER-2陽性表達以及與淋巴結轉移有關,特別是與淋巴結轉移顯著相關:淋巴結陽性組COX-2的陽性表達率為75%,而淋巴結陰性組COX-2的陽性表達率為僅為35.7%,兩組差異顯著(p＜0.01）,與Ristimaki等的研究結果相同,提示其可以作為判斷乳腺癌預后的有用指標。

2002年ASCO會議曾提出將COX-2作為一個新的乳腺癌治療和預防的靶點[11]。最近已有研究表明[12],COX-2的選擇性抑制劑-塞來昔布(Celecoxib）可以提高內分泌治療的效果。相信隨著研究的進展,不論是在乳腺癌的診斷、預后判斷,還是在靶向治療上,COX-2都是一個有用的指標。

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