不同產地山藥中成分含量分析

宋瑞麗

(鄭州鐵路職業技術學院，河南 鄭州 450052)

山藥為薯蕷科植物薯蕷(Dioscorea opposita Thunb)的干燥根莖，主治脾虛食少，久瀉不止，肺虛喘咳，腎虛遺精，帶下，尿頻，虛熱消渴［1］等癥。山藥具有多種生物活性，并認為山藥中的主要功效成分是山藥多糖，有增強免疫、抗衰老、抗氧化活性、抗腫瘤、治療糖尿病的效果［2］。水溶性浸出物中含有水溶性多糖、皂苷類、低聚糖、蛋白質以及氨基酸等，常被作為一項測定指標評價藥材質量，通常采用藥典附錄XA方法進行含量測定。

本試驗對來源于三個不同省的山藥藥材中多糖、水溶性浸出物進行了含量測定，為山藥藥材的質量評價提供了科學數據，為山藥GAP基地的建設提供參考。

1 實驗材料

1.1 樣本來源及處理

2006年10月～2007年1月期間采自于河南、山西、河北三產地，由河南中醫學院中藥鑒定教研室主任陳隨清教授鑒定為薯蕷科植物薯蕷的根莖。

取鮮品，切去根頭，洗凈，除去外皮和須根，趁鮮切厚片，干燥，備用。

1.2 儀器與化學試劑

UV－2201紫外可見分光光度計，(FA2004A)萬分之一分析天平，CS101－2D電熱鼓風干燥箱，RT201型粉碎機，R205旋轉蒸發器，SZ－93自動雙重水蒸餾器。

葡萄糖(北京化工廠，AR級)，水為雙蒸水，其余試劑均為分析純。

2 實驗方法

2.1 多糖的含量測定

大多采用分光光度法——苯酚硫酸法［3］進行含量測定。

2.1.1 標準曲線繪制

稱取105℃干燥至恒重的葡萄糖50mg，精密稱定，置于500ml量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，即得0.1012mg/ml的對照品溶液。精密吸收上述對照品溶液 1.0ml、3.0ml、5.0ml、7.0ml、10ml分別置于10ml容量瓶中，加水至刻度，混勻，配成系列標準溶液。分別準確吸取系列標準溶液1ml溶液于錐形瓶中，以蒸餾水1ml作空白，分別向其中加入5%苯酚1ml，混勻，迅速加入濃硫酸H2SO45ml充分混勻，放至室溫，在489nm波長處測其吸收度值。在1.0120 ×10－2～0.10120mg/ml之間有良好的線性，線性方程:y=0.1152x+0.0018(R2=0.9999)。

2.1.2 供試品溶液的制備和含量測定

取山藥粗粉20g，精密稱定，置索氏提取器中，加入250ml石油醚90℃回流4h，取出樣品揮干后，加入80%乙醇200ml(90℃)回流兩次(每次兩小時)，以除去單糖、多酚、低聚糖和苷類等小分子物質;將樣品揮干溶劑后，加入200ml的水，80℃水浴提取兩次，每次提取4小時，合并提取液，用旋轉蒸發器真空濃縮至50ml，用sevage法除蛋白后，再次真空濃縮至20ml，加入95%乙醇(使乙醇濃度達80%)，靜置過夜，濾過，殘渣先后用無水乙醇、乙醚、丙酮依次洗滌，低溫干燥得山藥粗多糖，稱重。精密稱取山藥粗多糖10mg，溶于100ml容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻。精密吸取上述溶液適量，置25ml容量瓶中，蒸餾水定容，即得供試品溶液。按照2.1.1項下的方法測定吸收度A，由回歸方程計算濃度C。按下式計算山藥中多糖的含量以葡萄糖計。

其中，W為樣品的質量(g)，C為多糖濃度(mg/ml)，V為溶液的體積(ml)，D為稀釋因素。

2.1.3 精密度試驗

取供試品溶液1ml，共5份，按2.1.1項下方法操作測得其平均百分含量為18.86%，其RSD為1.67%。

表1 精密度試驗結果

2.1.4 重現性試驗

稱取同一樣品5份，各20g，精密稱定，按2.1.2項下方法計算山藥多糖的含量，檢驗此測定方法的重現性，RSD為1.77%。

表2 重現性試驗結果

2.1.5 穩定性試驗

取供試品溶液1ml，按2.1.1項下方法測定吸收度，每15分鐘測定1次，考察其穩定性，結果顯色后吸收度在1.5h內無明顯變化，RSD為0.17%，說明苯酚－硫酸法顯色穩定。

表3 穩定性試驗結果

2.1.6 加樣回收率試驗

稱取10g山藥，精密稱定，置索氏提取器中，加石油醚脫脂，揮干溶劑，加80%乙醇索氏提取以除去單糖，低聚糖以及甙類。藥渣揮干溶劑后，加入葡萄糖及蒸餾水，回流提取，其余操作方法同2.1.2項，測得平均回收率為 96.23%，RSD=1.63%(n=5)。

表4 加樣回收率試驗

2.1.7 樣品中多糖的含量

按照2.1.2 制備供試品溶液，按 2.1.1 項下方法對來自三個省市的30份樣品進行含量測定，每個樣品的測定結果為3次測定平均值，結果見表5。

2.2 水溶性浸出物含量測定

按照中國藥典2005版一部附錄XA浸出物測定法(冷浸法)測定三個省市的30份樣品進行含量測定，每個樣品的測定結果為3次測定平均值，結果見表5。

3 結果分析

3.1 含量分析

比較來自三產地10批藥材的成分，其中水溶性浸出物，河南、山西含量明顯高于河北。多糖含量相差比較大，以河南整體最高。

3.2 道地性分析

河南武陟、溫縣屬古懷慶府地帶，以其特定的種質、產區、生產技術和加工方法，有道地產區之稱。從數據資料顯示，可把水溶性浸出物、多糖成分的含量做為考察山藥道地性的指標，為道地藥材的市場流通提供科學的保障。注:1－10號來自河南省，11－20號來自山西省，21－30號來自河北省。

表5 不同產地山藥各成分的含量

3.3 地域環境分析

河南、山西、河北地理位置的差異，氣候、土質、水質等生長環境不同，山藥中的各成分都受到了影響。河北藥材的整體含量偏低，這與生長的環境有很大關系。山西藥材的整體含量相對于河北更接近于河南藥材，這與山藥自古以來在山西的長期種植有關。

4 結語

中藥材生長講究水土氣候特殊的自然環境，不能隨便“搬家”移植，否則，藥材的質量就很難得到保證。中藥材質量不穩定，藥效下降，就無法確保臨床用藥的合理性。最近幾年國家已投入大量經費促進了藥材道地產區的發展，最大限度地滿足市場的需求，讓老百姓用到安全可靠的藥材。

［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010年版(一部)［S］.中國醫藥科技出版社，2010:27.

［2］張紅英.山藥多糖研究進展［J］.河南中醫學院學報，2006，21(127):87 －88.

［3］王東，林力，袁昌魯，等.車前子多糖含量的分析［J］.中草藥，2002，33(10):896 －897.