安徽省玉米小斑病菌對5種殺菌劑的敏感性

張立新, 張 軍, 王建華, 檀根甲

(安徽農業大學植物保護學院,合肥 230036)

安徽省玉米小斑病菌對5種殺菌劑的敏感性

張立新, 張 軍, 王建華, 檀根甲*

(安徽農業大學植物保護學院,合肥 230036)

為明確安徽玉米小斑病菌對常用殺菌劑的敏感性現狀,從安徽省的主要玉米產區分離到9個代表性玉米小斑病菌菌株,采用生長速率法測定其對常用5種殺菌劑的敏感性。結果表明,玉米小斑病菌對百菌清、烯唑醇、腐霉利敏感性較高,其EC50分別為0.734 2～13.091 8、0.010 6～4.258 0 g/mL和 0.140 6～76.806 3 g/mL,且不同菌株之間對同一種藥劑的敏感性差異較大;甲基硫菌靈和多菌靈對玉米小斑病菌的抑制作用不明顯。

玉米小斑病菌; 殺菌劑; 敏感性

玉米小斑病是由玉蜀黍平臍蠕孢(Bipolaris maydis)引起的玉米葉部病害之一,該病害廣泛分布在世界玉米產區,嚴重影響玉米生產,一般造成減產10%～20%,發病嚴重時高達30%以上[1-3]。近年來由于全球氣候變化、栽培制度的改變以及病原菌致病力變異等因素影響,玉米小斑病在安徽省玉米產區發病逐年加重,已對當地玉米產量和品質構成威脅。

有研究者報道利用植物提取物可以有效抑制玉米小斑病菌,像白頭翁、黃花蒿以及黃柏皮提取物均對玉米小斑病菌具有較好的抑菌活性,但在生產中很少應用[4-6]。我國防治玉米小斑病仍以利用抗耐病品種為主,化學防治為輔的綜合防治措施。化學防治常用藥劑有烯唑醇、腐霉利、百菌清、甲基硫菌靈等[7-8]。近年來有研究報道玉米小斑病菌對烯唑醇、腐霉利等殺菌劑的敏感性強,而對甲基硫菌靈、多菌靈等殺菌劑的敏感性較低[1-3]。然而,目前關于安徽省玉米小斑病菌對這些常用殺菌劑的敏感性研究還未見報道。為此,筆者采用生長速率法測定了安徽省主要玉米產區分離的玉米小斑病菌對常用5種殺菌劑的敏感性,明確玉米小斑病菌對殺菌劑的抗藥性程度,為開展其抗性檢測與治理提供依據。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

2007-2009年,在安徽省內濉溪、長豐、蒙城等玉米產區的主推玉米品種上,于玉米小斑病發生時期采集具有典型癥狀的病葉標樣,采用組織分離法對病斑上的病菌進行分離和純化。經過2次純化后,采用稀釋法進行單孢分離,得到純培養物。菌株編號以各自分離的地點命名開頭,SX003、SX004、SX005采集于濉溪縣;CF002、CF004、CF006采集于長豐縣;MC001、MC003、MC005采集于蒙城縣。

1.2 供試藥劑

75%百菌清可濕性粉劑,陜西億農高科藥業有限公司;90%烯唑醇原粉,山東大成農藥工業股份公司;50%腐霉利可濕性粉劑,日本住友化學株式會社;70%甲基硫菌靈可濕性粉劑,江陰市利港化工廠;98%多菌靈原粉,山東華陽農藥化工集團有限公司。將供試藥劑分別溶解后配成有效成分濃度為104μ g/mL的母液備用。

1.3 玉米小斑病菌對不同殺菌劑的敏感性測定

采用菌絲生長速率法[9-10]測定玉米小斑病菌對5種殺菌劑的敏感性水平。在超凈工作臺上將供試藥劑的104μ g/mL母液用無菌水稀釋成一系列濃度后,用移液器量取1 mL藥液加入到9 mL約50℃融化的PDA培養基中,混勻后立即倒入滅菌的培養皿中制成含藥平板。測定時,將培養好的玉米小斑病菌用打孔器沿菌落邊緣打取直徑6 mm的菌塊,分別移到含系列濃度的供試藥劑的培養基平板中央,以加無菌水的培養基平板為對照,每處理濃度接種4皿。

將接菌培養皿放入25℃培養箱中培養6 d后,采用垂直十字交叉法測量菌落直徑,計算抑制率[11]。所得數據經DPS統計軟件進行處理,求出5種藥劑對各供試菌株的毒力回歸方程、相關系數和EC50值。

2 結果

2.1 玉米小斑病菌對百菌清的敏感性

百菌清對9個菌株的EC50在0.734 2～13.091 8 μ g/mL之間,其中菌株SX003的EC50最大,MC005的EC50最小,為最敏感菌株,前者的 EC50是后者的17.8倍,其他菌株的敏感性在11倍以下,表明各供試菌株對百菌清比較敏感(表1)。

2.2 玉米小斑病菌對烯唑醇的敏感性

烯唑醇對9個菌株的EC50為0.010 6～4.258 0 μ g/mL之間,其中菌株MC001的EC50最大,SX004的EC50最小,為最敏感菌株,前者的 EC50是后者的401.7倍,其他菌株的敏感性在5倍以下,表明各供試菌株對烯唑醇較敏感(表2)。

表1 安徽省不同地區玉米小斑病菌對百菌清的敏感性

表2 安徽省不同地區玉米小斑病菌對烯唑醇的敏感性

2.3 玉米小斑病菌對腐霉利的敏感性

腐霉利對9個菌株的EC50在0.1406～76.806 3 μ g/mL之間,其中菌株MC005的EC50最大,SX005的EC50最小,為最敏感菌株,前者的 EC50是后者的546.3倍,其他菌株的敏感性在6倍以下,表明各供試菌株對腐霉利也較敏感(表3)。

表3 安徽省不同地區玉米小斑病菌對腐霉利的敏感性

2.4 玉米小斑病菌對甲基硫菌靈的敏感性

甲基硫菌靈對9個菌株的EC50在44.219 0～388.092 1 μ g/mL 之間,其中菌株 CF004 的 EC50最大,MC005的 EC50最小,為最敏感菌株,前者的EC50是后者的8.8倍,其他菌株的敏感性在5.8倍以下,表明各供試菌株對甲基硫菌靈的敏感性不高(表4)。

表4 安徽省不同地區玉米小斑病菌對甲基硫菌靈的敏感性

2.5 玉米小斑病菌對多菌靈的敏感性

將多菌靈藥劑104μ g/mL母液稀釋成為1 000、500 、100 、50、10、1 μ g/mL 的不同濃度藥液 ,測定其對不同地區玉米小斑病菌的毒力。結果表明,各地區的玉米小斑病菌對多菌靈均不敏感,在多菌靈濃度為500 μ g/mL時,其對玉米小斑病菌的抑制率均在45%以下,當多菌靈濃度稀釋到 50～10 μ g/mL時,對該病菌已無抑制活性。

3 討論

利用化學農藥防治植物病害具有見效快、防病效果好等優點,但如果長期施用單一殺菌劑,易使病原菌產生抗藥性。為避免或減緩抗藥菌的產生,延長藥劑使用壽命,很有必要對各地的病原菌開展抗藥性檢測,從而制定相應的用藥策略。本研究測定了安徽省主要玉米產區分離的玉米小斑病菌對百菌清、甲基硫菌靈、多菌靈、腐霉利和烯唑醇的敏感性,其中玉米小斑病菌對百菌清、烯唑醇、腐霉利的敏感性較高,其 EC50分別在 0.734 2～13.091 8、0.010 6～ 4.258 0 μ g/mL 和 0.140 6 ～ 76.806 3 μ g/mL 之間;而甲基硫菌靈和多菌靈對供試病菌的抑制活性很低。

多菌靈和甲基硫菌靈為苯并咪唑類殺菌劑,為玉米小斑病防治的常用藥劑[8,12]。其作用機理表現為束縛病菌微管蛋白亞基,阻止微管形成,進而干擾病菌的有絲分裂中紡錘體的形成,影響細胞分裂,最終殺死病菌[13-14]。本研究結果表明這兩種藥劑對安徽玉米小斑病菌基本無抑制作用,這與李廣領等[2]報道甲基硫菌靈對河南玉米小斑病菌毒力較差的研究結果一致,王曉梅等[1]也曾報道甲基硫菌靈和多菌靈對吉林玉米小斑病菌基本無效。這表明近年來分離的玉米小斑病菌對苯并咪唑類藥劑的抗藥性較強。由于研究收集的菌株有限,未發現對苯并咪唑類殺菌劑敏感的菌株,其原因是否與玉米小斑病菌微管蛋白基因變異有關,有待于進一步研究。

本研究中玉米小斑病菌對百菌清、腐霉利和烯唑醇表現出較高的敏感性,其原因可能與這些藥劑的作用機理不同于苯并咪唑類殺菌劑有關。百菌清的作用機理是與真菌細胞中的3-磷酸甘油醛脫氫酶發生作用,破壞酶的活力,使真菌細胞的新陳代謝受到破壞而喪失生命力。腐霉利是通過增大真菌線粒體膜和內質網膜上的脂質過氧化反應,干擾膜上脂質合成,最終表現為抑制孢子萌發和菌絲生長[15-16]。烯唑醇則是抑制C-14位的脫甲基反應,使甾醇合成不正常,破壞菌體細胞膜的功能,從而達到殺死病菌的目的[16]。

從本研究結果也可看出,不同菌株間對烯唑醇、百菌清和腐霉利的敏感性均存在較大差異,敏感性低菌株的抗性系數為敏感性高菌株的10～100倍以上,這可能與自然界病菌本身的生理差異有關。但大部分菌株對烯唑醇、百菌清和腐霉利處于較高敏感水平,說明這些藥劑在安徽省玉米小斑病防治中具有較大應用潛力。

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Sensitivity of Bipolaris maydis to five fungicides in Anhui Province

Zhang Lixin, Zhang Jun, Wang Jianhua, Tan Genjia
(College of Plant Protection,Anhui Agricultural University,Hefei230036,China)

To confirm the sensitivity ofBipolaris maydisto major fungicides,9 strains ofBipolaris maydiswere isolated from maize plants located at different region in Anhui.The sensitivities of 9 strains to 5 fungicides were measured by the growth rate.The results showed that the isolates were sensitive to chlorothalonil,diniconazole and procymidone,the EC50values of which ranged from 0.734 2-13.091 8 g/mL,0.010 6-4.258 0 g/mL and 0.140 6-76.806 3 g/mL,respectively.There were variations in sensitivities to the same fungicide among isolates from different areas.However,these isolates were less sensitive to thiophanate-methyl and carbendazim.

Bipolaris maydis; fungicide; sensitivity

S 435.131

B

10.3969/j.issn.0529-1542.2011.04.036

2010-08-19

2010-10-10

安徽省“十一五”科技攻關項目(08010302172)

*通信作者E-mail:tgj63@163.com