福建省結(jié)核病檢驗學科發(fā)展報告

福建省防癆協(xié)會

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福建省結(jié)核病檢驗學科發(fā)展報告

福建省防癆協(xié)會

1　引言

1.1 國內(nèi)外、福建省結(jié)核病流行現(xiàn)狀

結(jié)核病是結(jié)核分枝桿菌引起的慢性傳染性疾病。目前，全球約有20億人感染結(jié)核菌，活動性結(jié)核患者數(shù)約1500萬，每年新發(fā)結(jié)核患者達800～1000萬，有180萬人因結(jié)核病死亡。1993年世界衛(wèi)生組織（WHO）宣布“全球結(jié)核病處于緊急狀態(tài)”，將結(jié)核病列為重點控制的傳染病之一。1998年，WHO再次指出“遏制結(jié)核病行動刻不容緩”。

據(jù)WHO 2008年全球結(jié)核病控制報告估計，2006年我國結(jié)核病發(fā)病人數(shù)為131萬，占全球的14.3%，位居全球第二位，是全球22個結(jié)核病高負擔國家之一。2000年全國結(jié)核病流行病學抽樣調(diào)查結(jié)果顯示，我國結(jié)核病疫情特點是：感染人數(shù)多，全國有5.5億人口已感染結(jié)核菌，明顯高于全球平均感染水平；結(jié)核病患者多，全國有活動性肺結(jié)核患者約450萬人，其中傳染性肺結(jié)核患者約150萬人；死亡人數(shù)多，全國約有13萬人死于結(jié)核病；農(nóng)村患者多，全國約80%結(jié)核患者在農(nóng)村；耐藥患者多，特別是耐多藥和嚴重耐多藥患者，據(jù)2007年～2008年全國結(jié)核病耐藥基線調(diào)查顯示：我國結(jié)核病耐多藥率為8.32%，廣泛耐多藥率為0.68%，以此估算我國每年新發(fā)耐多藥結(jié)核病患者12萬例。

在我國傳染病疫情網(wǎng)絡報告中，肺結(jié)核報告發(fā)病和報告死亡數(shù)位居甲乙類傳染病前列。我省結(jié)核病疫情也不容樂觀，每年登記報告的肺結(jié)核患者均達到23000例，其中傳染性患者占13000例。全國3/4的肺結(jié)核患者為最具有勞動能力的青壯年。結(jié)核病仍是制約農(nóng)村地區(qū)特別是貧困地區(qū)經(jīng)濟和社會發(fā)展的重大疾病之一。同時，我國結(jié)核病防治工作還面臨著流動人口結(jié)核病、耐多藥肺結(jié)核和結(jié)核菌/艾滋病病毒雙重感染等新的挑戰(zhàn)[1]。

福建省結(jié)核病疫情也不容樂觀。2010年5月全國結(jié)核病流行病學調(diào)查，我省隨機抽查5個點采用胸部X-光片和痰涂片檢查相結(jié)合的方法進行結(jié)核病篩查。受檢人數(shù)有7020人，其中涂陽病人10個，涂陽患病率為142.5人/100000，活動性肺結(jié)核病人有30人，患病率為427.4/100000。流調(diào)顯示目前我省結(jié)核病流行態(tài)勢還是比較嚴峻的。

1.2 結(jié)核病檢驗學科在結(jié)核病控制工作中的地位

結(jié)核病實驗室檢查是發(fā)現(xiàn)傳染源的最主要手段，是確診結(jié)核病、選擇治療方案、考核療效的主要依據(jù)[1]。隨著科學技術的進步，結(jié)核病實驗室檢查的方法也在不斷地發(fā)展，不僅大大提高了敏感性和特異性，也提高了結(jié)核病流行病學調(diào)查、臨床診斷、鑒別診斷的水平和質(zhì)量。比如：BACTEC460和BACTEC MGIT960快速培養(yǎng)系統(tǒng)；血清學實驗檢測，包括酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）、斑點金標免疫滲濾法（DIGFA）和結(jié)明實驗（MycoDot）等；聚合酶鏈式反應（Polymerase chain reaction， PCR）及基于PCR基礎之上的快速診斷方法（如LipA， Hains 診斷技術，GeneXpert系統(tǒng)等）；結(jié)核病蛋白質(zhì)組學的研究等等，這些檢測技術的推廣與應用大大縮短結(jié)核分枝桿菌的培養(yǎng)時間，不僅具有較高的特異性，同時具有很高的臨床診斷價值。因此，對公民的生命健康的保障具有重要的社會意義和經(jīng)濟意義。

2　國內(nèi)外結(jié)核病檢驗學科發(fā)展現(xiàn)狀

結(jié)核分枝桿菌在傳統(tǒng)的羅氏培養(yǎng)基中生長緩慢，經(jīng)過長期的實驗研究，國內(nèi)外建立和發(fā)展了一系列結(jié)核分枝桿菌的檢測方法，并已制定了規(guī)范的診斷評價標準。本學科主要技術發(fā)展有以下幾點：

2.1 BACTEC460和MGIT960快速培養(yǎng)系統(tǒng)

基于結(jié)核分枝桿菌的早期感染特點，從上世紀70年代開始，逐步建立起一系列的結(jié)核分枝桿菌快速檢測系統(tǒng)，并用于藥敏試驗的研究[2-3]。與傳統(tǒng)的羅氏培養(yǎng)方法相比，該系統(tǒng)可以大大縮短結(jié)核分枝桿菌的培養(yǎng)時間，使結(jié)核病人及早得到治療。

2.2 血清學實驗室檢測

血清學實驗中盡管假陽性情況較多，但由于方法學的簡易和實驗室的易操作性使它仍有應用價值。比如酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）、斑點金標免疫滲濾法（DIGFA）和結(jié)明實驗（MycoDot）等簡易快速，無需特殊的儀器，同時具有較高的特異性。但是，目前市場上商品化的組合抗原檢測試劑盒都無法檢測出所有結(jié)核患者血清中的抗結(jié)核抗體[4]。采用多種抗原聯(lián)合檢測，可以在保證特異性的基礎上提高靈敏度。這是因為結(jié)核分枝桿菌抗原多且復雜，在宿主體內(nèi)表達的數(shù)量、種類可能因患者的個體差異和病程不同而呈現(xiàn)出多樣性的抗體譜。

2.3 聚合酶鏈式反應（PCR）技術

由于分子生物學技術的發(fā)展和應用，帶動了結(jié)核分枝桿菌的檢測在基因水平上的進步。PCR 的敏感性優(yōu)于常規(guī)診斷方法，且能快速地從臨床痰標本中直接檢測結(jié)核分枝桿菌。PCR 技術好處多多，但目前市場上仍缺乏權(quán)威性的PCR診斷試劑盒，擴增時交叉污染引起的假陽性、標本中PCR Taq DNA 聚合酶抑制物質(zhì)造成的假陰性，因此該方法還有待進一步改進。

2.4 結(jié)核桿菌DNA探針檢測

該檢測缺點是靈敏度低，標本中細菌數(shù)較少時難以檢出，限制了其臨床應用。但是將靈敏度高的PCR 技術與特異性強的DNA探針技術有機結(jié)合，將成為結(jié)核病診斷的發(fā)展趨勢。

2.5 生物芯片（DNA芯片、基因芯片）

系指將大量序列已知的寡聚核苷酸探針分子固定于支持物（玻璃片、硅片、硝酸纖維素膜等）上后，與待檢標本中標記的DNA或RNA進行分子雜交，通過檢測每個探針分子的雜交信號強度，進而獲取樣品分子的數(shù)量和序列信息。該方法適用于基因表達、基因功能、基因分型和序列分析等的研究。1999年研發(fā)出首塊結(jié)核病相關芯片[5]，包括兩部分，一部分是根據(jù)結(jié)核分枝桿菌種間多態(tài)性的16S rRNA 基因片段，鑒別結(jié)核分枝桿菌與非結(jié)核分枝桿菌；另一部分通過分析耐利福平菌株rpoB 基因突變的情況，用于結(jié)核分枝桿菌對利福平耐藥性的快速檢測。基因芯片具有豐富的信息量、高通量及能快速、準確地分析基因，在結(jié)核分枝桿菌菌種鑒定、耐藥性監(jiān)測、基因組比較分析等方面發(fā)揮著重要的作用，由于儀器昂貴和制備芯片成本高等因素限制了其推廣。

2.6 結(jié)核病蛋白質(zhì)組學研究

當前蛋白質(zhì)組研究處于初級階段[6]，相關技術手段還不是很完善。由于蛋白質(zhì)的復雜性和識別原則的多樣性，缺乏一種高通量的識別工具仍然是蛋白質(zhì)組學深入研究的瓶頸。隨著對大規(guī)模蛋白質(zhì)相互作用研究的重視，發(fā)展高通量和高精度的蛋白質(zhì)相互作用檢測技術也被科學家所關注。國際上已建立了結(jié)核分枝桿菌蛋白質(zhì)組學跨國合作研究體系，計劃在5年左右的時間內(nèi)闡明大多數(shù)結(jié)核分枝桿菌相關蛋白的結(jié)構(gòu)和功能。

2.7創(chuàng)新性快速診斷方法（GeneXpert系統(tǒng)）

由于分枝桿菌培養(yǎng)及其核苷酸擴增的技術較為復雜，全球“僅少數(shù)”患有耐藥肺結(jié)核的患者可獲得充分敏感的診斷性檢測和藥物敏感性測試。全球范圍內(nèi)，無效的肺結(jié)核檢測、不斷增長的多藥耐藥和廣泛耐藥的肺結(jié)核致使在肺結(jié)核流行的國家需要大力提高結(jié)核桿菌的培養(yǎng)和耐藥性檢測能力。為了滿足這種需要，創(chuàng)新診斷方法基金會（FIND）開發(fā)了這種新型的檢測方法GeneXpertMTB/RIF，并且設計、監(jiān)督和資助了針對這種方法的評估研究。這種Xpert MTB/RIF檢測提供一個一次性的包含結(jié)核桿菌細菌分析、核酸提取、PCR擴增和擴增檢測所需的所有反應試劑的試劑盒。將加入殺菌緩沖液的痰樣本轉(zhuǎn)移至試劑盒中后，將此試劑盒置入GeneXpert裝置中，2小時內(nèi)即可出結(jié)果。經(jīng)簡單培訓后，醫(yī)務人員可熟練應用這種檢測方法。由于在樣本轉(zhuǎn)入后，該試劑盒不再打開，所以擴增污染的機會很小。痰在液化的同時即已失活，所以無需在生物安全柜中進行。另外一項最新研究的結(jié)果證實，這種檢測方法未導致感染事件發(fā)生，這就不需要實驗室具有全面的生物安全性。目前這種快速診斷檢測方法已經(jīng)得到WHO的認可，不久將在低收入國家中推廣。我國也將開展該種快速診斷方法的評估研究。

2.8 跨國結(jié)核病參比實驗室建設

目前許多國家建立了跨國結(jié)核病參比實驗室，比如我國周邊的韓國、日本、印度以及香港地區(qū)都有跨國結(jié)核病參比實驗室，并且建立了完善的實驗室計算機網(wǎng)絡系統(tǒng)[7]，開展跨國結(jié)核病監(jiān)測、統(tǒng)一監(jiān)測技術標準，提高水平與質(zhì)量，達到資源共享。

目前，國內(nèi)許多結(jié)核病實驗診斷技術正處于從實驗室向臨床應用的轉(zhuǎn)折階段，但同時也面臨很多問題，如實驗操作的規(guī)范化、儀器試劑的標準化、實驗結(jié)果的臨床界定等。同時，分子生物學技術的不斷改進及結(jié)核分枝桿菌遺傳信息資料的不斷積累，也為快速診斷結(jié)核分枝桿菌提供了更快捷、更敏感的手段，在診斷技術領域擁有巨大的發(fā)展?jié)摿Γ诩夹g普及方面還有待改進。由于結(jié)核分枝桿菌染色體變異的多樣性，有時用一種方法不能鑒定區(qū)分所有的菌株，還需要幾種方法聯(lián)合使用。

3　福建省結(jié)核病檢驗學科發(fā)展現(xiàn)狀及與國內(nèi)外對比分析

3.1 福建省結(jié)核病檢驗人力資源現(xiàn)狀分析

目前，我省結(jié)核病檢驗人員隊伍不斷壯大，共有140名技術人員從事結(jié)核病的檢驗工作，其中省本級4名、9個設區(qū)市9名，86個縣級結(jié)防機構(gòu)各有一名實驗檢驗人員。省本級技術人員4人，本科3人，碩士研究生1人；初級職稱3人，中級職稱1人。9 個地級市有13名技術人員，男性4人，女性9人；年齡45 歲以下10人；高中1人，中專8人，專科以上4人；初級職稱9人，中級3人，高級1人;檢驗專業(yè)9人，其他專業(yè)4人；專職12人，兼職1人。按照中國結(jié)核病防治規(guī)劃實施工作指南的要求，省本級及9個設區(qū)市的結(jié)核病檢驗人員配備不足。86個縣(縣級市、區(qū)) 有127 名技術人員，男69 人，女58人；年齡45 歲以下92 人，占72.4%；工作年限10 年以上79 人，6～10 年19人，5 年以下29人；中專學歷84人（占66.1%），大專以上28人（占22.0%），高中15人，占11.8%;初級職稱87人（占68.5%），中級32人（占25.2%），高級8人（6.3%）；檢驗專業(yè)72人（占56.7%），其他專業(yè)55人（占43.3%）；專職53人（占41.7%），兼職74人（占58.3%）。縣級結(jié)防機構(gòu)中技術人員以中青年為主（占72.4%），具備一定的工作經(jīng)驗，但高學歷及中、高級職稱人員所占的比例低，僅占31.5%，人員的學歷和中高級職稱梯度構(gòu)成主要以中專學歷和初級職稱為主，且專業(yè)技術人員比例偏低為56.7%，專職人員不足50%（41.7%）。提示我省結(jié)核病檢驗人員的專業(yè)素質(zhì)有待提高。但是，這支隊伍通過不斷努力，以其職業(yè)精神和責任感超額完成了國家及省政府每年下達的工作任務。

為了提高我省結(jié)核病檢驗人員的操作技能，每年都面向地市及縣級單位舉辦一次結(jié)核病檢驗技術培訓班，同時也保證了操作的規(guī)范性。通過結(jié)核病防治人員不斷探索和研究，全省結(jié)核病的診斷和檢測水平也在不斷提高。

3.2 福建省結(jié)核病檢測技術現(xiàn)狀

（1）福建省9個地市、86個縣級結(jié)防機構(gòu)的實驗室及結(jié)核病定點醫(yī)院均能開展痰涂片鏡檢工作，并能對鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院的痰檢點進行督導。

（2）9個地市及30個縣級結(jié)防機構(gòu)的實驗室已經(jīng)開展結(jié)核分枝桿菌的培養(yǎng)工作，正在實施我省的結(jié)核病耐藥監(jiān)測工作任務。

（3）省結(jié)核病參比室、廈門市結(jié)核病實驗室、福州肺科醫(yī)院檢驗室開展了結(jié)核病的藥物敏感性試驗工作，以此探討我省結(jié)核病的耐藥情況，為結(jié)核病的防控提供依據(jù)。

（4）近年來，福州肺科醫(yī)院開展了MGIT 960 快速培養(yǎng)檢測，酶聯(lián)免疫斑點試驗檢測[8]等。省結(jié)核病參比室與福州肺科醫(yī)院充分利用現(xiàn)有的資源和條件，合作研究結(jié)核分枝桿菌快速培養(yǎng)及一線和二線抗結(jié)核藥物的藥敏試驗方法，探討適合我省結(jié)核分支桿菌生長的快速培養(yǎng)和藥物敏感性試驗的方法，為我省耐藥結(jié)核病的快速診斷奠定基礎。

（5）隨著分子生物技術的廣泛應用，我省已經(jīng)開展了相關的分子生物技術對結(jié)核分枝桿菌進行檢測和分型研究[9]。應用分子克隆方法實現(xiàn)了結(jié)核分枝桿菌Rv0577 基因在畢赤酵母的高效表達，其重組抗原可被結(jié)核病患者血清識別，具有抗原活性，為結(jié)核分枝桿菌血清診斷抗原的篩選奠定基礎[10]。

（6）通過福建省自然科學基金、全球結(jié)核病項目基金、省衛(wèi)生廳青年基金的科研項目資金支持，開展結(jié)核病的流行病學調(diào)查研究，如對寧德市少數(shù)民族聚居地區(qū)的結(jié)核病調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)[11]，我省畬族人群所患結(jié)核病以Ⅰ型基因型（非北京基因型）為主，且耐藥率高，而當?shù)氐臐h族結(jié)核病病人以北京基因型為主，提示了該地區(qū)結(jié)核病高耐藥率與畬族人群結(jié)核病的流行相關，為進一步調(diào)查和控制該地區(qū)高耐藥現(xiàn)象提供了依據(jù)。

（7）2008年起，全省實施結(jié)核病耐藥性監(jiān)測工作，了解我省結(jié)核病耐藥流行狀況及特征，以及對全省監(jiān)測點的結(jié)核分枝桿菌進行基因分型等相關研究。

（8）利用PCR-測序，反向斑點雜交等相關技術研究我省結(jié)核分枝桿菌耐藥相關基因的快速檢測。

（9）全省結(jié)核分枝桿菌耐藥相關基因等相關數(shù)據(jù)庫也正在建設當中，該庫的建立有利于監(jiān)測和了解我省結(jié)核病的耐藥態(tài)勢和指導臨床用藥，為我省結(jié)核病的防治工作奠定一定的基礎。

3.3 福建省結(jié)核病檢驗技術的優(yōu)越性及與國內(nèi)外先進技術的差距

目前我省結(jié)核病實驗室已初步建立了一個綜合細菌學、分子生物學、免疫學檢測技術的結(jié)核病快速診斷及耐藥性檢測的規(guī)范化檢測平臺，建立了一系列結(jié)核病的快速診斷及耐藥性測定技術，包括BACTEC 960 快速培養(yǎng)，梅里埃3D快速培養(yǎng)等，其中正在各基層單位推廣應用的是傳統(tǒng)的羅氏培養(yǎng)方法和痰涂片鏡檢技術。我省實驗室擁有符合生物安全的P3、P2實驗室，擁有分枝桿菌快速培養(yǎng)藥敏檢測系統(tǒng)（BACTEC MGIT 960）、全自動PCR檢測儀、全自動酶標檢測儀等國際先進的結(jié)核病研究設備。BACTEC MGIT 960、DNA分析系統(tǒng)等大型設備有專人負責，經(jīng)專業(yè)培訓，熟練掌握儀器的使用保養(yǎng)，尤其是BACTEC MGIT 960在臨床上的應用，不僅大大縮短了結(jié)核病人進一步傳播的時間，并為結(jié)核病患者的及時治療贏得了時間。而傳統(tǒng)的檢驗技術的推廣應用也是符合我省的經(jīng)濟條件和結(jié)核病疫情現(xiàn)況。

目前，由于一些快速診斷的儀器價格過于昂貴，出于成本方面的考慮，我省尚未運用國際先進的結(jié)核病耐藥性快速診斷方法，如Hains 診斷技術和GeneXpert全自動熒光定量PCR一體化系統(tǒng)等。

4　福建省結(jié)核病檢驗學科發(fā)展趨勢預測

21世紀是生命科學的世紀，是檢驗學科的時代。各級政府及學者都非常關注和重視耐藥結(jié)核病的防控工作，為了提高耐多藥結(jié)核病的診斷發(fā)現(xiàn)水平，政府也加大對全省的實驗室能力建設投入，著力提高全省結(jié)核病實驗室配置，爭取在十二五規(guī)劃期間實現(xiàn)全省縣級結(jié)核病實驗室達到P2實驗室水平，能夠獨立完成結(jié)核分枝桿菌的培養(yǎng)工作；市級實驗室能夠開展結(jié)核分支桿菌的傳統(tǒng)藥敏檢測，在經(jīng)濟發(fā)達的市級實驗室能夠開展結(jié)核分枝桿菌的快速藥敏試驗；省級參比實驗室具備開展結(jié)核分枝桿菌及耐藥結(jié)核菌快速診斷的能力，并完善對全省結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)和藥敏試驗的所有實驗室的質(zhì)量控制體系。為了實現(xiàn)結(jié)核病檢測信息的共享和資源的利用，已經(jīng)開展構(gòu)建適合我省結(jié)核病的實驗室網(wǎng)絡系統(tǒng)。通過實驗室網(wǎng)絡系統(tǒng)，不僅可以將結(jié)核分枝桿菌的有關背景信息統(tǒng)一管理，而且將實驗室的檢測結(jié)果進行數(shù)字化，便于各個實驗室之間實驗數(shù)據(jù)的比較，更及時地為我省結(jié)核病防控提供依據(jù)。

5　福建省結(jié)核病防治檢驗學科發(fā)展面臨的挑戰(zhàn)、機遇

5.1 人力、財力與檢驗手段面臨的挑戰(zhàn)

我省結(jié)核病細菌學檢查技術人員，總體上是一支年輕化、有一定技能與工作經(jīng)驗的隊伍。因為這支隊伍的努力，我省2003年超額完成了省政府下達的年涂陽新登記率37/ 100000萬的任務，而后每年都完成了工作任務。但這支隊伍還不夠?qū)I(yè)化、專職化，且穩(wěn)定性不強。檢驗專業(yè)人員僅占56.17 % ，其中兼職占58.13 % ，這樣的人員配備不僅影響痰檢質(zhì)量，也難以適應我省結(jié)核病規(guī)劃涂陽病人發(fā)現(xiàn)數(shù)逐年增長的要求。以50萬人口的縣有1 名實驗室技術人員為例，按規(guī)劃要求就診率達3‰，年需查1500人，每人初診查3份痰，共4500片；2004年涂陽新登記率為38/100000，則需發(fā)現(xiàn)190 例涂陽病人，按每例隨訪至少復查3次共6份痰標本計，為1140 片，共5640片。以每年250個工作日計，每天約2216片。每張涂片的制作、染色和讀片至少要25 min ，每天至少需工作9個多小時，這是難以做到的，即使做到，其質(zhì)量也難以保證。可見目前的實驗室技術人員配備不能滿足規(guī)劃所要達到的指標，因此培養(yǎng)配備一支具有高素質(zhì)、專業(yè)化和專職化的結(jié)核病細菌學實驗室隊伍迫在眉睫。

目前我省結(jié)核病檢驗學科的發(fā)展主要是靠項目的支持，而科研需要大量的經(jīng)費投入，因此經(jīng)費上的投入不足一定程度上限制了我省結(jié)核病檢驗學科科研上的發(fā)展。2010年，我省按照項目的要求開展了耐藥監(jiān)測，由于耐藥監(jiān)測布點比較廣且多，因此投入了大量的人力、物力和財力，旨在為我省結(jié)核病耐藥現(xiàn)狀和進一步防控提供科學的依據(jù)。傳統(tǒng)的結(jié)核病分枝桿菌藥物敏感性試驗需要耗費大量的時間，快速方便的藥敏試驗方法BACTEC MGIT 960可以為病人贏得治療的時間和減少傳播，將來我省的結(jié)核分枝桿菌藥物敏感性試驗方法朝著快速藥敏的方向開展。耐多藥結(jié)核病及結(jié)核病/艾滋病雙重感染的疫情也在緩慢上升中，為了擴大患者耐藥性檢測的可及性和提高發(fā)現(xiàn)，進一步要求我省結(jié)核病檢驗科應該建立分子生物快速診斷方法。

5.2 結(jié)核病檢驗學科發(fā)展的有利因素

檢驗在結(jié)核病診斷的作用功不可滅。當前，全球耐藥結(jié)核病的流行越來越嚴重，結(jié)核病防治工作也面臨越來越多的挑戰(zhàn)，因此結(jié)核病檢驗工作也越來越受到重視。而且我省從事結(jié)核病檢驗的技術人員大部分是青年人，是一支比較年輕化，專業(yè)化的隊伍，這部分人具有活力，善于思考和鉆研，有很好的可塑性，對于學科的發(fā)展具有很好的人力條件。結(jié)核病防治是全國乃至全球關注的焦點，各種交流的機會比較多，對結(jié)核病的研究涉及方方面面，對結(jié)核病的經(jīng)費投入也日益增加等等，這些條件都是我省發(fā)展結(jié)核病檢驗學科的有利因素。

6　福建省結(jié)核病檢驗學科的工作思路和目標

6.1 工作思路

6.1.1強化目標，匯聚隊伍。堅持以學科自主創(chuàng)新為指導，從我省目前實際存在的困難出發(fā)，根據(jù)學科發(fā)展方向，以省級結(jié)核病參比實驗室為龍頭，以結(jié)核病專科醫(yī)院為基地，重點培養(yǎng)與引進相關學科人才，匯聚科研隊伍。同時，依托國家、省部級等高級別重點項目，在實踐中鍛煉科研人員素質(zhì)和能力，逐步建立了一支具有一定科研創(chuàng)新能力的團隊。

6.1.2突出科研，凝煉方向。對于有科研能力的相關單位，應該進行系統(tǒng)性合理分工，凝練研究方向，并注重應用型的研究。例如：省級結(jié)核病參比實驗室應著重在結(jié)核菌的基因分型、耐藥性發(fā)生與流行病學等方面的研究，為全省結(jié)核病流行控制服務；結(jié)核病專科醫(yī)院的實驗室要著重在結(jié)核菌的耐藥性快速檢測、菌型鑒定、藥物敏感測定等方面的研究，為臨床診斷治療結(jié)核病患者服務。這樣才能使得各單位在實踐中認準研究方向，將有限的資源進行合理的使用，使學科發(fā)展方向穩(wěn)定，促使成果系統(tǒng)化。

6.1.3注重基礎，加強創(chuàng)新。堅持“創(chuàng)新為本，注重基礎”為發(fā)展理念，以應用研究為基礎，并結(jié)合社會需要，在研究方向、研究內(nèi)容和方法上進行變革性的創(chuàng)新。在研究中，引進臨床醫(yī)學、預防醫(yī)學、社會醫(yī)學等多個學科的相關知識和研究成果，促進學科的研究朝著良性方向發(fā)展。對于縣級機構(gòu)結(jié)核病實驗室來說，應該在實踐中收集數(shù)據(jù)，并進行分析總結(jié)，更好地為結(jié)核病人服務。

6.1.4優(yōu)化資源，構(gòu)筑基地。首先通過多渠道籌集資金，著重改善省結(jié)核病參比實驗室的硬件條件。整合現(xiàn)有科研資源，鼓勵相近學科綜合集成，合力構(gòu)筑公共研究基地，提高儀器設備利用率和更新率，努力將其建設成先進性、共享性與開放性的實驗平臺。同時計劃逐步建立一套較為完善的全省結(jié)核病實驗室計算機網(wǎng)絡管理系統(tǒng)，為地市、設區(qū)縣級單位提供一個能進行基礎研究的平臺，以充分發(fā)揮基層菌種資源豐富的優(yōu)越性。在實踐工作中，注重提高團隊的科研創(chuàng)新水平及相關技術人員科研能力的培養(yǎng)，全力推進我省結(jié)核病檢驗學科的人才隊伍建設。

6.1.5注重交流，開拓視野。通過開展結(jié)核病控制項目等相關科研課題，運用“請進來，走出去”的工作方法，邀請國內(nèi)相關專家學者到我省研討及技術指導，組織相關人員積極參加國家級的專業(yè)培訓學習考察觀摩等，加強與國內(nèi)外本領域及相關領域知名院所的交流與溝通，以全面提高隊伍的專業(yè)素質(zhì)、開拓性視野和服務水平。

6.2 工作目標

6.2.1目標。緊密近年來科技先進成果，從我省結(jié)核病防治衛(wèi)生服務的需求出發(fā)，結(jié)合臨床的實際需要，完善本學科建設所需要的各項資源條件；加強對人才的挖掘和培養(yǎng)，尤其特殊人才的培養(yǎng)，努力建設一支省內(nèi)一流的科研技術團隊。使我省結(jié)核病檢驗學科達到或接近國內(nèi)水平，成為省內(nèi)有一定知名度，在國內(nèi)有一定影響的人才培養(yǎng)基地，更好地為結(jié)核病防治工作服務。

6.2.2本規(guī)劃期內(nèi)的具體目標。努力提高結(jié)核病檢驗學科的整體水平。對有科研能力的單位進行分工，注重科研和實踐相結(jié)合，以更好的檢驗水平服務于結(jié)核病的防治，服務于社會和人民。

6.2.3各項目標。

（1）加強學科團隊梯隊的建設，使團隊年齡、職稱、學歷結(jié)構(gòu)更加合理和穩(wěn)定。同時加強技術人員的再教育學習和培訓，進一步提高檢驗技能。

（2）明確學科的研究方針，研究方向成果和要體現(xiàn)出“實用性、創(chuàng)新性和先進性”。力爭獲得國家級科研成果和省級科研成果。

（3）改善工作和研究條件。力爭用5年的時間，將各個市、縣的結(jié)核病實驗室建設成為具有相對獨立，符合相應等級生物安全標準，縣級實驗室具備P2實驗室的條件，配備生物安全柜和高壓蒸汽滅菌器等，市級實驗室在原來實驗條件的基礎上進行改進，使之具備開展藥物敏感性試驗的能力。

（4）加強實驗室網(wǎng)絡化的建設，不僅可以滿足實驗室結(jié)果等信息的交流順暢，而且使得技術資源共享，讓技術人員之間相互學習交流，提高技術人員的素質(zhì)。同時通過網(wǎng)絡實驗室平臺，便于實驗室的質(zhì)量控制，保證全省實驗結(jié)果的準確性、可靠性，為全省的結(jié)核病防治提供保障。

7　我省結(jié)核病防治的戰(zhàn)略任務與關鍵技術展望

7.1 戰(zhàn)略任務

為了促進《全國結(jié)核病防治規(guī)劃（2001－2010年）》目標的實現(xiàn)，以及更好地實施落實十二五規(guī)劃的結(jié)核病防治任務，降低肺結(jié)核病的感染、發(fā)病率與死亡率。我省2010年的結(jié)核病防治任務仍然要保證四個率的達標以及發(fā)現(xiàn)治療管理活動性肺結(jié)核病人完成年度計劃。具體是：

（1）以縣為單位，DOTS覆蓋率維持在100％；

（2）全省新涂陽肺結(jié)核病人發(fā)現(xiàn)率達到70％以上；

（3）新涂陽肺結(jié)核病人治愈率達85％以上；

（4）活動性肺結(jié)核病人的系統(tǒng)管理率達95％以上；

（5）2010年全省計劃發(fā)現(xiàn)、治療管理活動性肺結(jié)核病人19919例，其中新涂陽8234例、復治涂陽1002例、涂陰（包括重癥涂陰）10683例。

隨著病人發(fā)現(xiàn)水平的提高，在十二五規(guī)劃期間，全省計劃完成發(fā)現(xiàn)結(jié)核病人80000病例數(shù)，同時擴大耐多藥結(jié)核病和TB/HIV雙重感染的檢測。

7.2 關鍵技術展望

結(jié)核病防治的目標是控制結(jié)核病的傳播和流行。將檢驗技術研究的成果有效地整合到結(jié)核病防控體系中，具有十分重要的意義。隨著政府的重視和經(jīng)費的投入，在未來的結(jié)核病防治工作中，引入靈敏度高，特異性好，操作簡易的技術勢在必行。

（1）為追蹤結(jié)核病傳染源和控制結(jié)核病的傳播，運用基因分型技術開展我省結(jié)核病的分子流行病學研究。

（2）為研究耐多藥結(jié)核病的特征和闡明我省耐多藥的機理，運用耐藥相關基因檢測，反向斑點雜交技術等進行研究；建立快速診斷結(jié)核病耐藥的方法并應用于臨床。

（3）為研究我省結(jié)核病患者與卡介苗接種之間的關系，以及為新型防治結(jié)核病的疫苗的研發(fā)提供依據(jù)，開展結(jié)核分枝桿菌分子免疫學方面的相關研究。

（4）為提高我省結(jié)核病痰涂片的質(zhì)量，在熟練應用齊尼染色方法的同時對新的檢測方法如LED的應用進行摸索，旨在提高我省結(jié)核病防治的工作質(zhì)量。

（5）為提高耐多藥結(jié)核病人和TB/HIV雙重感染的檢測水平，應用快速，簡便，安全的方法如GeneXpert進行檢測，提高我省耐多藥結(jié)核病快速診斷的效率，同時因該GeneXpert系統(tǒng)對實驗室的生物安全級別要求不高，甚至可以便攜到現(xiàn)場進行診斷，具有很好的應用前景。

8　福建省結(jié)核病檢驗學科發(fā)展的戰(zhàn)略對策

結(jié)核病檢驗學科在結(jié)核病防控的作用是不可忽視的，通過對目前我省結(jié)核病檢驗學科的現(xiàn)狀分析，我省該學科還存在很多的發(fā)展余地，還有很多需要改進的空間。結(jié)核病遭遇流動人口、TB/HIV雙重感染、耐藥結(jié)核病等重大挑戰(zhàn)，同時也面臨著很多機遇，比如全球基金結(jié)核病控制項目，國家重大傳染病項目等項目的支持，政府的重視，社會防病意識的提高，科技的發(fā)展等。因此，我們應該把握良好的機遇，迎接挑戰(zhàn)來發(fā)展我省的結(jié)核病檢驗學科，具體對策如下：

8.1 全面實施包括結(jié)核菌檢測在內(nèi)的遏制結(jié)核病策略，保證政府承諾，增加經(jīng)費投入，著力加大對全省結(jié)核病實驗室能力建設。為各級實驗室配備開展工作所需的儀器和耗材等。

8.2 逐步形成一支省、市、縣分工明確的專業(yè)化的檢驗隊伍

省級檢驗人員不僅應掌握痰涂片，結(jié)核分支桿菌分離培養(yǎng)，藥敏試驗，及相應的分子生物診斷技術，而且應具備為市級和縣級開展專業(yè)指導培訓的能力。市級檢驗人員應具備痰涂片，痰培養(yǎng)和藥敏試驗的能力，同時應了解相關的分子生物診斷技術，為縣級做好業(yè)務指導和督導。縣級實驗人員在熟練開展痰涂片的基礎上，應能勝任開展痰培養(yǎng)的工作任務。

8.3 建立網(wǎng)絡化的結(jié)核病實驗室，擴大交流的平臺，以交流、促進技術的進步，帶動學科的發(fā)展

分子生物技術應用到結(jié)核病的檢驗中后，結(jié)核病的診斷技術日新月異。通過實驗室網(wǎng)絡，可以了解結(jié)核病檢驗技術的最新資訊和進展，同時可以將實驗結(jié)果等信息共享，有利于實驗數(shù)據(jù)的分析比對，為全省結(jié)核病的防控提供可靠的結(jié)果，保證全省結(jié)核病防控的質(zhì)量。

8.4 明確學科發(fā)展的任務，注重學科的質(zhì)量，保證學科發(fā)展的先進性與服務性

結(jié)核病檢驗是為結(jié)核病的診斷，治療服務的。提高檢驗水平的同時也提高了病人的發(fā)現(xiàn)，準確可靠的檢驗結(jié)果為結(jié)核病的治療提供依據(jù)，從而提高病人的治愈率，為結(jié)核病的預防和控制不可或缺的支持。結(jié)核病檢驗學科的發(fā)展，將更好帶動結(jié)核病的發(fā)現(xiàn)，診斷和治療管理的提高，為全省結(jié)核病控制服務，保證公眾的健康。

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課題組成員：

1、鄭金鳳，福建省防癆協(xié)會理事長，福建省疾病預防控制中心副主任，主任醫(yī)師。

2、陳求揚，福建省防癆協(xié)會副理事長兼秘書長，福建省疾病預防控制中心科長，主任醫(yī)師。

3、黃智忠，福建省防癆協(xié)會副秘書長，福建省疾病預防控制中心主管醫(yī)師。

4、林淑芳，福建省防癆協(xié)會常務理事，福建省疾病預防控制中心副科長，副主任醫(yī)師。

5、魏淑貞，福建省疾病預防控制中心，醫(yī)師。