大皰性類天皰瘡中IL-5與IL-17的表達(dá)與意義

郝靜娜 郭書萍

大皰性類天皰瘡是一種獲得性自身免疫性大皰性皮膚病，其發(fā)病機(jī)制尚未清楚。本研究采用免疫組織化學(xué)技術(shù)法對大皰性類天皰瘡病例組中IL-5和IL-17細(xì)胞因子進(jìn)行檢測，完善對大皰性類天皰瘡發(fā)病機(jī)制的認(rèn)識(shí)，有利于大皰性類天皰瘡的治療。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2008年1月至2010年12月在我院皮膚科就診的患者，大皰性類天皰瘡病例組38例，其中男18例，女20例，年齡60～82歲，平均73.4歲;對照組20例均是來自我院整形科和普外科的正常人，其中男12例，女9例，年齡58～76歲，平均66.5歲，無任何皮膚病及系統(tǒng)性疾病。

1.2主要試劑 兔抗人白介素5(IL-5)多克隆抗體、兔抗人白介素17(IL-17)多克隆抗體、多聚體抗兔IGG-HRP二抗試劑盒均由武漢博士德公司提供。

1.3方法 ①切片脫蠟至水。②3%H2O2室溫10 min以滅活內(nèi)源性酶。蒸餾水洗2 min 3次。③對抗原進(jìn)行枸櫞酸鈉熱修復(fù)。④滴加封閉液，室溫放置10 min。甩去多余的液體，不洗。⑤滴加一抗，37℃孵育2 h。⑥滴加聚合HRP標(biāo)記抗兔IgG，37℃孵育30 min，PBS沖洗5 min 3次。⑦DAB顯色，蘇木素復(fù)染，乙醇脫水，二甲苯透明，封片。

1.4結(jié)果判定 IL-5免疫組織化學(xué)結(jié)果以細(xì)胞漿有棕黃色顆粒為陽性，IL-17免疫組織化學(xué)結(jié)果以細(xì)胞漿和(或)細(xì)胞核有棕黃色顆粒為陽性，每張切片隨機(jī)選取5個(gè)視野，利用MIAS-2000圖像分析系統(tǒng)分析陽性區(qū)域積分光密度值(IOD值)，以IOD值的大小代表陽性產(chǎn)物表達(dá)的多少。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 兩組間比較采用t檢驗(yàn)，兩指標(biāo)間相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析。所有統(tǒng)計(jì)學(xué)資料采用 SPSS 13．0統(tǒng)計(jì)軟件分析，P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

大皰性類天皰瘡皮損中IL-5的陽性表達(dá)主要分布于表皮全層尤其以基底層為主，IL-17陽性表達(dá)分布于表皮全層;而在正常皮膚組織中均稱陰性或弱陽性表達(dá)。……