2個檢測系統ALT、AST、CK、LDH測定結果比對分析

北京京煤集團總醫院（102300）崔雯 史光華

檢測系統是指檢測某些項目所涉及的儀器、試劑、校準品等的組合。在現代實驗室中，使用不同檢測系統測定相同的項目非常普遍。《醫療機構臨床實驗室管理辦法》要求應對實驗室內不同的檢測系統進行定期的比對以保證檢測結果的一致性[1]。北京京煤集團總醫院參照美國臨床實驗室標準化委員會（NCCLS）指南文件的要求，按期對實驗室內不同的檢測系統進行檢測性能的評價，完成實驗室內比對，效果較好，現將實驗方法和結果介紹如下：

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 1.1.1 儀器 日立7180全自動生化分析儀 ，美國強生Vitro250干片式化學分析儀 。

1.1.2 試劑 日立7180全自動生化分析儀所用試劑：ALT、AST為北京九強生物技術有限公司提供；CK由日本和光提供；LDH試劑為北京中生生物技術有限公司產品。美國強生Vitro250干化學分析儀：ALT、AST、CK、LDH為強生公司干化學分析儀原裝配套干片試劑。

1.2 實驗方法

1.2.1 質量控制 檢驗人員應熟悉檢測系統各環節（儀器、試劑、校準品及操作程序等），熟悉評價方案。按室內質控SOP文件的要求完成室內質控，通過后進行二個檢測系統的性能驗證。

1.2.2 樣本的準備 選用40例本院門診和住院病人標本，剔除溶血、黃疸、乳糜等影響因素的標本，樣品濃度中有大于50%不在參考區間內，基本涵蓋高、中、低值，均在儀器檢測的線性范圍內，每個樣本一分為二。每日采用8份混合血清標本，按常規樣本測定的方法測定ALT、AST、CK、LDH。每份血清重復測定2次，連續測定5天，結果取均值，共計40份生化結果。

1.2.3 檢測系統的比對[2]

1.2.3.1 離群性檢驗 按NCCLS的EP9-A文件進行二臺儀器測定值的離群值并判斷。方法內離群點的檢驗：計算每份樣品于每臺儀器重復測定值間差值及其均值，以4倍均值為限，超出限值的即為離群點；方法間離群點的檢驗：計算兩方法間成對結果的差值及其均值，以4倍均值為限，超出限值的即為離群點。若僅有一個離群點應該剔除，有一個以上離群點須檢查原因，判斷是否保留，若原因不清應用一批新標本重新評價，凡是剔除的應另用標本補做。

1.2.3.2 二個檢測系統相關性分析 以日立7180全自動生化分析儀測定結果作為測定值（X），Vitro250干化學分析儀測定結果作為比對方法的測定值（Y）用X與Y的均值做相關分析得到回歸方程并計算相關系數(r)。要求r≥0.975（或r2≥0.95），此時認為標本濃度范圍是適合的，實驗方法Y = bXc + a，直線回歸統計的斜率和截距是可靠的。否則，應加大樣本檢測例數。

1.2.3.3 二臺儀器偏差估計和可接受性判斷 將ALT、AST、CK、LDH的醫學水平濃度帶入回歸方程，計算系統誤差SE=∣(b-1)Xc+a∣或SE%=SE/Xc×100%，以CLIA′88總允許誤差為判斷依據， 將儀器間比較評估的SE（SE%）≤1/2CLIA′88 允許總誤差(EA)作為臨床可接受水平。

1.3 統計分析 用SPSS13.3進行統計分析，二個檢測系統各指標的關系采用相關回歸分析。

2 結果

2.1 離群點檢查 結果表明四個生化項目分別于2臺儀器重復兩次測定結果均無離群點出現，同濃度水平于二臺儀器間也無離群點出現。

2.2 二個檢測系統的相關性檢查 二臺機器測定ALT、AST、CK、LDH的結果做相關性分析，r ≥0. 975說明選取的統計數據分布合理，回歸方程的斜率b和截距a可靠，可用于評估二臺儀器的系統誤差，而且日立7180和Vitro250所測的結果具有良好的相關性。見附表1。

2.3 不同醫學水平評估二臺儀器檢測結果的相對偏差 四個檢測項目在各自的醫學決定水平的誤差都小于1/ 2CLIA′88 允許總誤差(EA)，二臺儀器的檢測結果具有可比性，二個檢測系統的ALT、AST、CK、LDH檢測結果一致可互用。見附表2。

3 討論

檢測系統是指完成一個檢測項目所涉及的儀器、試劑、校準品、檢驗程序、保養計劃的組合。現在國內實驗室多使用不同的儀器和試劑測定同一個檢測項目，實驗結果的可比性是擺在臨檢人員面前的一個亟待解決的問題。現許多檢測系統比對的報道在統計學上采用t檢驗進行方法學評價，即二臺儀器的檢測結果經t檢驗無統計學差異，即認為二個檢測系統相關性良好，這種驗證方法不夠規范[3]。

筆者從2006年以來嚴格按照NCCLS的EP9-A2文件要求的技術方案進行實驗室內比對的操作，監測檢測結果的可比性。本實驗檢測結果良好，兩臺儀器具有良好的相關性及一致性，保證了臨床結果的一致性。

在實驗中要注意方法學比較必須與臨床相結合[4]。實驗時選擇的數據要圍繞醫學決定水平，并統計各個水平的系統誤差。若某項目只有一個臨床決定水平，須估計在實驗數據均值附近的系統誤差。

此外，實驗前應按臨床標本規范進行儀器的維護、保養、校準、質控，質控通過后才能進行正式實驗。收集標本時要注意標本不能有乳糜或溶血，標本收集后用正確的方法保存和處理。只有每一步嚴格控制才能有滿意的結果。

在日常工作中，應重視實驗室內檢測項目的比對，確定比對方案并嚴格操作程序，對比對試驗不合格項目，應盡快找到原因，制定解決方案，保證臨床檢驗結果的準確、可靠。

附表1 二個檢測系統檢驗結果相關性分析

附表2 評估二臺儀器檢測結果的相對偏差