張譯元 常維山 (山東農業大學動物科技學院 泰安 271000)
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水貂α-干擾素基因的克隆、測序與遺傳進化分析
張譯元 常維山*(山東農業大學動物科技學院 泰安 271000)
根據GenBank發表的序列,應用DNAstart分析軟件設計并合成一對引物用于擴增水貂α干擾素(IFN-α)基因,從病死水貂的脾臟中提取總RNA,RT-PCR擴增水貂α干擾素基因,獲得了約564bp片段,將其克隆到pEasy-T1載體中,進行序列分析,證實該基因是水貂α干擾素基因。將測序結果與GenBank發表的水貂的IFN-α基因序列進行比較,核苷酸序列同源性為94.3%~95.5%,氨基酸序列同源性為89.3%~91.4%。同時將核苷酸序列、氨基酸序列與其他幾種犬科動物進行遺傳進化分析,其同源性分別在78.1%~99.3%之間和69.4%~100.0%之間。
水貂 IFN-α基因 克隆測序 遺傳進化
干擾素(Interferon, IFN)是一類能誘導動物細胞產生多種廣譜抗病毒蛋白的細胞因子,具有阻止病毒繁殖、調節機體免疫反應的生物學功能,是應用前景廣闊的重要生物制劑之一[1,2]。干擾素分為I型和II型兩類。I型干擾素包括IFN-α和IFN-β等,II型干擾素又稱免疫干擾素即IFN-γ。80年代中期,人的干擾素基因克隆成功,抗病毒與抑制腫瘤的效果十分顯著[3]。隨后,犬、豬、貓和雞的干擾素基因相繼克隆成功[4],并正在向臨床應用過渡[5~8]。我國于90年代初開始了人干擾素的研究,接著畜、禽干擾素的研究相繼展開,而犬科動物干擾素的分子生物學研究報道還很少。
近年來,貂、狐貍、貉等犬科動物作為特種經濟動物飼養正在興起。而犬科動物各種病毒性疾病是造成死亡的最重要原因。干擾素對病毒具有廣譜、特效的抗病毒感染作用[9]。……