藜葉蛋白質提取方法比較試驗

王康英

（西北民族大學生命科學與工程學院，蘭州 730030）

藜（Chenopodium album L.）為藜科藜屬一年生草本植物，分布于世界各地。在自然環境中，藜具有種子萌發早，繁殖力強，喜光、耐鹽堿、耐熱、耐旱、耐澇等特點，能適應典型的大陸性氣候，是撂荒地植被恢復的先鋒植物。但由于藜常出現在作物栽培地中，一直被人們作為雜草防治，耗費大量人力、物力，還因農藥的使用造成對環境的污染[1]。各種維生素，在黎中含量之高是一般蔬菜少見的，黎的維生素C含量分別是芹菜的11.57倍，是大白菜的4.87倍，是與它同屬菠菜的6.17倍；維生素B1分別是芹菜、大白菜和菠菜的5、7.5倍和7.5倍，維生素B2分別是芹菜、大白菜和波菜的0.9、9倍和5.14倍；維生素D分別是芹菜和大白菜的48和51倍；β-胡蘿卜素雖小于菠菜，但遠遠高于芹菜和大白菜，分別是芹菜和大白菜的6.3和159倍。據分析，在各類灰菜的干物質中，平均每千克含消化能9.19 MJ、代謝能8.40 MJ、可消化蛋白160g；含粗蛋白22.4%，鈣1.86%，磷0.38%，粗纖維15.8%[2]。生物資源的合理開發利用及降低環境污染是低碳減排的重要內容之一。就地采收利用各種野生雜草作飼料，既可擴大飼料資源，節省更多的糧食，又能提高養殖效益，促進畜牧業生產的發展，也可降低農藥的使用量，減少環境污染。本試驗采用直接加熱法、酸提法、酸化加熱法、絮凝劑加熱法4種方法從藜枝條提取葉蛋白，并對提取率進行比較，對藜的利用方式進行了一些探討，以期能夠對一些農田雜草的合理利用尋找出可行的途徑。

1 試驗方法及設計

1.1 試驗材料

2010年10月4日在西北民族大學榆中校區（E104°09.93′，N 35°51.18′，蘭州市榆中縣夏官營鎮）收獲的藜地上部分，植株高15～80㎝不等。按試驗設計進行樣品處理。

1.2 葉蛋白提取程序和試驗設計

1.2.1 提取程序如下[3]

材料→剪短→打漿→去渣→絮凝→過濾→干燥稱重→計算提取率

1.2.2 試驗設計

1.2.2.1 直接加熱法 70 ℃水浴加熱至出現沉淀，取出靜置30 min，過濾，沉淀干燥稱重，計算提取率。重復3次。

1.2.2.2 酸提法 用1 mol/L的鹽酸調節汁液pH為4.0，靜置30 min，出現沉淀，過濾，干燥稱重，重復3次。

1.2.2.3 酸化加熱法 逐滴滴入1 mol/L 鹽酸溶液，混勻，調節汁液pH為4.0，放入70 ℃水浴加熱至有沉淀出現，取出靜置30 min，過濾，干燥稱重，重復3次。

1.2.2.4 絮凝劑加熱法

按100 ml原液，加入0.1g聚乙二醇，混勻，70 ℃水浴加熱至出現沉淀。取出靜置30 min，過濾，干燥稱重，重復3次。

1.3 結果計算及統計分析

3次重復取均值，作為結果。提取率按以下公式計算[4]：

數據處理用SRS法統計分析。

2 結果與分析

不同方法藜葉蛋白提取率見表1。由表1可以看出，不同提取方法蛋白提取率不同，直接加熱法21.727%，酸提法22.664%，酸化加熱法23.711%，絮凝劑加熱法19.203%，并進行比較，提取率的高低為：酸化加熱法＞酸提法＞直接加熱法＞絮凝劑加熱法。對表1數據進行處理并進行方差分析，檢驗處理間差異的顯著性。結果見表2。從表2可以看出，酸化加熱法與絮凝劑加熱法之間有顯著性差異（P＜0.05），與其他方法之間無顯著性差異（P＞0.05）。

表1 不同方法葉蛋白提取率

表2 多重比較

3 討論

藜是一種營養價值較高的植物性蛋白質飼料，但長期被作為有害生物為人們所厭惡。蛋白質資源緊缺已成為世界性的問題，由于我國人口多，資源有限，蛋白質缺乏尤為嚴重，每年都要進口大量的魚粉和豆粕等蛋白質飼料原料。有關對藜資源利用，科技人員作了相關研究。孫存華等（2005）對藜作為新型蔬菜資源進行了評價，認為具有較好的利用前景，對于葉蛋白提取用作飼料蛋白則無相關報導。本研究結果表明，不同凝聚方法對藜葉蛋白提取率影響較大，提取率大小順序為酸化加熱法＞酸提法＞直接加熱法＞絮凝劑加熱法，結果與草坪草屑葉蛋白提取率加酸加熱法較高結果一致[5]，絮凝劑法提取草坪草屑葉蛋白研究[6]結果不同，有關這一問題有待進一步探討研究。葉蛋白的凝聚是整個葉蛋白生產工藝中關鍵的一環，對不同植物葉蛋白質的凝聚條件不同，即使是同種植物，在不同的生育期，其葉蛋白質的凝聚條件也有差異。因此，必須根據不同植物在不同生育期的葉蛋白質的特性通過試驗來確定最佳的凝聚條件。

[1] 惠文森.藜水分與光合特性研究[J]. 西北民族大學學報自然科學版，2011，32（1）：34～38

[2] 孫存華，李揚，賀鴻雁，等.黎的營養成分及作為新型蔬菜資源的評價[J]. 廣西植物，2005，（6）：598～601

[3] 惠文森，王康英，周軍.收獲后存放時間對三葉草葉蛋白提取率的影響[J].西北民族大學學報自然科學版，2009，30（4）：37～38,83

[4] 鄒文輝，惠文森，王康英. 草坪草屑葉蛋白質提取方法比較試驗[J].2009，（2）：20～22

[5] 惠文森，穆曉峰，王康英.草坪草屑葉蛋白質提取方法研究[J].草業科學，2009，26（3）：108～110

[6] 惠文森，王康英.絮凝劑法提取草坪草屑葉蛋白研究[J].安徽農業科學，2008，36（32）：13926，13986