芪花降糖方對四氧嘧啶致小鼠糖尿病模型的影響

　　摘 要：目的：研究民族藥芪花降糖方對四氧嘧啶小鼠糖尿病模型的影響。方法：小鼠尾靜脈注射四氧嘧啶復制糖尿病小鼠模型，以二甲雙胍為陽性對照，研究芪花降糖方灌胃給藥對糖尿病小鼠血糖的影響。結果：芪花降糖方對糖尿病小鼠有明顯降血糖作用，與模型組比較差異有顯著性意義（P<0.05）。結論：芪花降糖方能降低糖尿病小鼠的血糖，值得進一步深入研究。
　　關鍵詞：芪花降糖方；糖尿病；血糖
　　中圖分類號：R285文獻標識碼：A
　　文章編號：1007-2349（2011）05-0059-02
　　
　　芪花降糖方是本項目組在對云南民族藥進行整理研究工作中，收集到的治療糖尿病的有效驗方，由云南苗族藥三七等藥物組成，為考察該方對糖尿病的作用，筆者復制了四氧嘧啶糖尿病小鼠動物模型，并用該模型觀察了該藥的抗糖尿病作用。現將實驗結果報告如下。
　　1 實驗材料
　　1.1 動物 健康昆明種小鼠，雄性，體重18～22 g，四川省醫學科學研究院動物研究所提供，生產許可證號：SCXK（川）2008-24。生產批號：Dossy2010-7。
　　1.2 藥品與試劑 芪花降糖方藥物煎劑，由云南中醫學院民族醫藥研究中心提供，是由云南產三七等藥組成的復方，按常規方法制備供試藥，臨用前用蒸餾水配成所需濃度；二甲雙胍片，北京雙鶴藥業股份有限公司，090809；四氧嘧啶（Alloxan），Sigma-Aldrich公司，1437801；葡萄糖氧化酶法測定試劑盒，上海榮盛生物技術有限公司，20100501。
　　1.3 儀器 UV2250-紫外分光光度計，島津公司（日本）；CF16 RXⅡseries冷凍離心機，HITACHI公司（日本）。
　　2 實驗方法
　　2.1 四氧嘧啶致糖尿病小鼠模型復制 參照文獻^［1］選用健康雄性昆明種小鼠，禁食6 h，自由飲水，實驗前測定正常小鼠血糖值為7.30～9.99 mmol/L，自尾靜脈按70 mg/kg注入四氧嘧啶，復制糖尿病模型。造模后第4 d尾靜脈取血，用葡萄糖氧化酶法測定血糖，選用血糖值>11.0 mmol/L的小鼠作為合格的受試糖尿病模型小鼠^［2］。
　　2.2 實驗動物的分組與給藥^［3~4］ 受試小鼠在造模4 d后測定的血糖值記為0周，將篩選合格的小鼠，隨機分為模型對照組，陽性對照組和芪花降糖方組；分別給予等量蒸餾水、二甲雙胍、芪花降糖方藥液。各組動物均按0.2mL/10 g體重灌胃（ig）給藥，每天定時給藥1次，連續給藥4周。
　　2.3 實驗動物血糖測定方法 每周取血前1 h均給藥1次，斷尾取血10 μL，加入400 μL蛋白沉淀劑中（冰浴中放置），3000 r/min，離心5min（冷凍離心機），取上清液250 μL，按試劑盒說明書采用葡萄糖氧化酶法進行血糖測定。
　　2.4 檢測指標 （1）體重、進食量和飲水量：實驗期間，每天記錄小鼠的進食量和飲水量，并觀察動物的一般情況；每周測量1次小鼠的體重；（2）血糖：實驗期間，每周自小鼠尾靜脈取血，用葡萄糖氧化酶法測定血糖水平，連續4周，動態觀測動物血糖的變化。
　　3 統計學方法
　　實驗數據均以（Ax-G ±s ）表示，采用單因素方差分析法進行數據處理。
　　4 實驗結果
　　芪花降糖方對四氧嘧啶糖尿病小鼠進食量、飲水量、體重和血糖的影響結果分別見表1~表4。
　　從上表1、表2和表3中可看出：陽性藥物組和芪花降糖方組動物在給藥1～4周內進食量和飲水量明顯減少（P<0.05）；與模型組動物比較，差異有統計學意義（P<0.05）。在整個實驗過程中芪花降糖方對糖尿病小鼠體重無明顯影響，與模型組比較（P>0.05）。
　　本批實驗動物造模前平均血糖值為（8.72±1.12）mmol/L，模型組小鼠于造模后血糖呈升高的趨勢。陽性對照藥組于第1周血糖開始降低，與模型組比較，第1、3、4周差異有統計學意義（P<0.05）。芪花降糖方在給藥1周后血糖開始降低，第2、3、4周與模型組比較，差異有統計學意義（P<0.05）。
　　5 討論
　　四氧嘧啶是胰島β細胞毒劑，通過產生超氧自由基而破壞β細胞，導致胰島素缺乏，產生類似糖尿病的表現，是篩選糖尿病藥物最常用的動物模型^［2］。小鼠于造模后72 h后血糖穩定升高，筆者在后96 h取血測定血糖，選用血糖值>11.0 mmol/L的小鼠作為模型小鼠^［2］。造模成功的小鼠血糖值與造模型前平均血糖值為（8.72±1.12）mmol/L比較，差異有顯著性意義，且均出現明顯多飲、多食的表現。
　　芪花降糖方是由云南苗族藥三七等藥物組成的民族藥有效驗方，可明顯降低四氧嘧啶糖尿病模型小鼠的血糖，改善多飲、多食的表現，值得進一步深入研究。
　　
　　參考文獻：
　　［1］周吉銀，周世文.糖尿病大鼠模型研究進展［J］.中華中醫藥學刊，2007，25（3）：533~535.
　　［2］李儀奎.中藥藥理實驗方法學［M］.2版.上海：上海科學技術出版社，2006：603.
　　［3］李云巍，牛艷芬，黃年旭，等.黃芩苷對四氧嘧啶致小鼠糖尿病降糖作用的研究［J］，昆明醫學院學報，2009，（6）：5~8.
　　［4］趙貴卿，袁麗珍，李元敏，等.二苯乙烯類化合物E1對2型糖尿病小鼠血清游離脂肪酸組成的影響［J］.中國藥理學與毒理學雜志，2002，16（4）：287~291.
　　（收稿日期：2011-03-14）