冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病猝死的法醫(yī)病理學(xué)探討

王志明

[摘要] 目的 探討冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病猝死的法醫(yī)病理學(xué)。 方法 方便選擇自2010年1月—2016年12月50例冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病猝死患者尸檢案例作為研究對(duì)象，命名為研究組，另選擇50例非冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病猝死患者尸檢案例作為研究對(duì)象，命名為對(duì)照組；兩組均接受法醫(yī)病理學(xué)檢測(cè)，并對(duì)比分析兩組的管壁測(cè)量值、心臟重量以及心室壁厚度。 結(jié)果 研究組的男性內(nèi)膜厚度（0.30±0.05）mm明顯高于對(duì)照組（t=9.600 6，P=0.000 0）；研究組的女性內(nèi)膜厚度（0.26±0.03）mm明顯高于對(duì)照組（t=9.559 ，P=0.000 0）；研究組的男性中膜厚度（0.61±0.04）mm明顯高于對(duì)照組（t=36.644 9，P=0.000 0）；研究組的女性中膜厚度（0.59±0.03）mm明顯高于對(duì)照組（t=50.552 2，P=0.000 0）；研究組的心臟重量（385.33±81.30）g明顯重于對(duì)照組（t=4.281 6，P=0.000 1）；研究組的左心室心室壁厚度（1.22±0.29）cm明顯高于對(duì)照組（t=3.369 2，P=0.001 3）；研究組的右心室心室壁厚度（0.31±0.15）cm明顯高于對(duì)照組（t=3.911 4，P=0.000 2）。 結(jié)論 冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病猝死患者可見心臟肥大，動(dòng)脈壁不均勻增厚現(xiàn)象發(fā)生率較低，臨床結(jié)合法醫(yī)病理學(xué)檢測(cè)結(jié)果可以給予臨床預(yù)防冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病提高有效參考依據(jù)。

[關(guān)鍵詞] 冠狀動(dòng)脈粥樣硬化；心臟病；猝死；法醫(yī)病理學(xué)

[中圖分類號(hào)] R919.4 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742（2019）03（b）-0026-03

[Abstract] Objective To investigate the forensic pathology of sudden death in coronary atherosclerotic heart disease. Methods From January 2010 to December 2016， 50 patients with sudden death from coronary atherosclerotic heart disease were convenient selected as study subjects， and the study group was selected as 50 patients with non-coronary atherosclerotic heart disease. The autopsy case was selected as the study group. The two groups were examined by forensic pathology， and the wall measurements， heart weight and ventricular wall thickness were compared. Results The male intima thickness （0.30±0.05）mm in the study group was significantly higher than that in the control group（t=9.600 6， P=0.000 0）. The female intima thickness （0.26±0.03）mm in the study group was significantly higher than that in the control group（t=9.559 5， P=0.000 0）； the men's media thickness （0.61±0.04）mm in the study group was significantly higher than that in the control group（t=36.644 9， P=0.000 0）； the media thickness of women in the study group （0.59±0.03）mm was significantly higher than that in the control group（t=50.552 2， P=0.000 0）； the heart weight of the study group （385.33±81.30）g was significantly heavier than the control group（t=4.281 6， P=0.000 1）； the left ventricular wall thickness （1.22±0.29）cm of the study group was significantly higher than the control group（t=3.369 2， P=0.001 3）； the right ventricular wall thickness （0.31±0.15）cm in the study group was significantly higher than that in the control group（t=3.911 4， P=0.000 2）. Conclusion The patients with sudden coronary atherosclerotic heart disease can be seen with cardiac hypertrophy and the incidence of uneven thickening of the arterial wall is low. The clinical combination of forensic pathology can provide an effective reference for clinical prevention of coronary atherosclerotic heart disease.

[Key words] Coronary atherosclerosis； Heart disease； Sudden death； Forensic pathology

冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病（CORONARYATHER OSECLEROTICHEARTDISEASE），是臨床常見心血管疾病，主要是因冠狀動(dòng)脈發(fā)育異常、冠狀動(dòng)脈狹窄等冠狀動(dòng)脈結(jié)構(gòu)異常，以及冠狀動(dòng)脈痙攣等功能異常，導(dǎo)致血管腔狹窄，進(jìn)而誘發(fā)心肌缺血缺氧而致心臟疾病。冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病與冠狀動(dòng)脈功能性改變可統(tǒng)稱為“冠狀動(dòng)脈性心臟病”[1-2]。目前臨床研究冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病猝死并不少，而且逐漸被人們?cè)絹碓街匾暸c關(guān)注。臨床對(duì)于冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病猝死的研究主要通過調(diào)查方法、尸體解剖方法，以給予案例相關(guān)因素實(shí)施法醫(yī)病理學(xué)檢測(cè)、法醫(yī)病理學(xué)分析，從而得出明確死亡原因結(jié)論，以給予法律審判提供有效鑒定依據(jù)[3-4]。該次研究工作選擇自2010年1月—2016年12月冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病猝死患者尸檢案例50例作為研究對(duì)象，旨在探討冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病猝死的法醫(yī)病理學(xué)。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選擇冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病猝死患者尸檢案例50例作為研究對(duì)象，命名為研究組（n=50）；另選擇非冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病猝死患者尸檢案例50例作為研究對(duì)象，命名為對(duì)照組（n=50）。研究組：性別：男性患者有28例，女性患者有22例；年齡：25～78歲之間，平均年齡為（52.50±8.75）歲。對(duì)照組：性別：男性患者有30例，女性患者有20例；年齡：24～79歲之間，平均年齡為（51.85±8.95）歲。兩組研究對(duì)象的一般資料均差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

1.2 方法

研究組與對(duì)照組均接受法醫(yī)病理學(xué)檢測(cè)。法醫(yī)病理學(xué)檢測(cè)方法具體操作如下。

（1）試劑選擇。兔抗人多克隆抗體（CX40）均選自武漢博士德工程有限公司生產(chǎn)；S-P免疫組化試劑盒均選自PROTEINTECH公司生產(chǎn)；DAB顯色血液均選自PROTEINTECH公司生產(chǎn)；石蠟包埋組織MICRO RNA快速提取試劑盒均選自LIFETECH-NOLOGIES（美國(guó)）公司生產(chǎn)；TAQMAN MICRO RNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒均選自LIFETECH-NOLOGIES（美國(guó)）公司生產(chǎn)；分析試劑盒均選自LIFETECH-NOLOGIES（美國(guó)）公司生產(chǎn)。

（2）心臟組織與石蠟切片制備。①取材。心臟組織標(biāo)本取左心室心肌組織一塊、右心室心肌組織一塊、室間隔肌壁心肌組織一塊，大小約為1.2 mm×1.2mm×1.2 mm。②固定。首先給予組織塊平衡鹽溶液清洗，接著置于10%甲醛固定液中，持續(xù)24 h。③石蠟切片制備。使用梯度乙醇脫水，使用二甲苯溶液作透明浸蠟，使用專門切片機(jī)切片，大小約為4～6 μm[5]。

（3）HE（蘇木素伊紅）染色。放入已入蒸餾水切片于HE溶液中，進(jìn)行數(shù)分鐘染色；接著放入酸水分色數(shù)秒及氨水分色數(shù)秒；接著以流水持續(xù)沖洗1～15 min；接著放入70%酒精持續(xù)脫水10 min及90%酒精持續(xù)脫水10 min；接著放入HE染色持續(xù)23 min；接著將切片以純酒精脫水及二甲苯透明；最后使用中性樹膠封固[6]。

（4）免疫組織化學(xué)染色。免疫組織化學(xué)染色選擇S-P免疫組化試劑盒程序?qū)嵤紫葘⑹炃衅撓炛了唤又胖糜?%H2O2室溫進(jìn)行孵育，持續(xù)孵育5～10 min，以有效消除內(nèi)源性過氧化物酶活性；接著放入蒸餾水進(jìn)行沖洗，接著放入PBS浸泡5 min；接著放入5%～10%正常兔血清作封閉，并放置于室溫持續(xù)孵育10 min。接著將血清傾去，勿洗，滴入適當(dāng)稀釋比例的一抗工作液，并放置于37℃持續(xù)孵育1～2 h（或放置于4℃過夜）；使用PBS沖洗（5 mi/次n，共3次）；滴入適當(dāng)稀釋比例的生物素標(biāo)記二抗，并放置于37℃持續(xù)孵育10～30 min（或者滴入適當(dāng)稀釋比例的第二代生物素，并放置于37℃持續(xù)孵育10～30 min），接著使用PBS沖洗（5 min/次，共3次）；滴入適當(dāng)稀釋比例的辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素生物素標(biāo)記二抗，并放置于37℃持續(xù)孵育10～30min，接著使用PBS沖洗（5 min/次，共3次）；接著給予顯色劑顯色處理；接著給予自來水作充分沖洗、復(fù)染以及封片。在空白對(duì)照時(shí)的染色中選擇PBS緩沖液[7]。

（5）石蠟包埋。使用石蠟包埋組織MICRO RNA快速提取試劑盒程序進(jìn)行石蠟包埋處理[8]。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察比較兩組的管壁測(cè)量值（包括內(nèi)膜厚度、中膜厚度）、心臟重量以及心室壁厚度（包括左心室、右心室）。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

應(yīng)用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理分析兩組數(shù)據(jù)資料，以（x±s）表示計(jì)量資料，使用t檢驗(yàn)；P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 研究組與對(duì)照組的管壁測(cè)量值比較

與對(duì)照組比較，研究組男性內(nèi)膜厚度更高（t=9.600 6， P=0.000 0）；研究組女性內(nèi)膜厚度更高（t=9.559 5，P=0.000 0）；研究組男性中膜厚度更高（t=36.644 9，P=0.000 0）；研究組女性中膜厚度更高（t=50.552 2，P=0.000 0）。見表1。

2.2 研究組與對(duì)照組的心臟重量比較

與對(duì)照組比較，研究組心臟重量更重，（t=4.2816，P=0.000 1）。見表2。

2.3 研究組與對(duì)照組的心室壁厚度比較

與對(duì)照組比較，研究組左心室心室壁厚度更高（t=3.369 2，P=0.001 3）；研究組右心室心室壁厚度更高（t=3.911 4，P=0.000 2）。見表3。

3 討論

心血管疾病為臨床常見疾病，更是威脅全球人類生活質(zhì)量、生存質(zhì)量的首要因素，臨床發(fā)生率最高的心血管疾病即為冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病。隨著近幾年來，社會(huì)經(jīng)濟(jì)持續(xù)發(fā)展進(jìn)步、人們生活水平持續(xù)提升、生活質(zhì)量持續(xù)改善，以及生活習(xí)慣改變、工作壓力增加等各種因素影響下，臨床心血管疾病發(fā)生率隨之增高。冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病主要是由于機(jī)體冠狀動(dòng)脈狹窄，以及供血不足誘發(fā)而致，該疾病的發(fā)生率、死亡率均高[9-10]。

從該次研究結(jié)果可知，冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病猝死患者尸檢案例的內(nèi)膜厚度[男性為（0.30±0.05）mm，女性為（0.26±0.03）mm，]、中膜厚度[男性為（0.61±0.04）mm，女性為（0.59±0.03）mm，]、左心室心室壁厚度[（1.22±0.29）cm]及右心室心室壁厚度[（0.31±0.15）cm]均更高于非冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病猝死患者尸檢案例（P<0.05），而且冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病猝死患者尸檢案例的心臟重量[（385.33±81.30）g]更重于非冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病猝死患者尸檢案例（P<0.05）。提示，隨著冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者的狹窄程度不斷增加，導(dǎo)致男性患者、女性患者的內(nèi)膜厚度及中膜厚度均明顯增加；其次，與非冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病猝死患者尸檢案例比較，冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病猝死患者尸檢案例的心臟重量更大，且心室壁厚度更厚[11]。與張林慶等人[12]的研究結(jié)果“對(duì)這64例冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病猝死尸檢案例進(jìn)行檢測(cè)，64例案例當(dāng)中，有女性14例，男性50例，其檢測(cè)性別比例為1：3.6；并且根據(jù)研究數(shù)據(jù)顯示觀察組的心臟重量為（384.31±81.7）g、左心室壁厚度為（1.21±0.27）cm、右心室壁厚度為（0.291±0.12）cm；對(duì)照組的心臟重量為（307.271±69.82）g、左心室壁厚度為（1.211±0.21）cm、右心室壁厚度為（0.231±0.08）cm；兩組數(shù)據(jù)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。”相符。

綜上所述，臨床結(jié)合冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病的疾病特點(diǎn)，運(yùn)用法醫(yī)病理學(xué)檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)分析，從而進(jìn)一步明確猝死原因，以及給予疾病發(fā)病機(jī)制、疾病預(yù)防等提高更科學(xué)、更清晰、更有效思路，有重要臨床應(yīng)用價(jià)值。

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（收稿日期：2018-12-20）