針刺“足三里”\\“腎俞”\\“關(guān)元”\\“三陰交”對圍絕經(jīng)期大鼠性腺軸的調(diào)節(jié)作用

作者單位：150036 黑龍江省護理高等?？茖W(xué)校（付麗艷）；黑龍江省森工總醫(yī)院（趙晶）；黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)（劉洋）

通訊作者：劉洋

【摘要】 目的 從生殖內(nèi)分泌的角度探討電針治療圍絕經(jīng)期綜合征的作用機制。方法 將45只16月齡圍絕經(jīng)期大鼠隨機分為圍絕經(jīng)期對照組、針刺（電針“足三里”、“腎俞”、“關(guān)元”、“三陰交”）組及電針非經(jīng)穴點組，另將15只4月齡大鼠設(shè)為青年對照組。電針刺激結(jié)束后，檢測各組血清雌二醇（E2）、卵泡刺激素（FSH）、促黃體生成素（LH）、下丘腦多巴胺（DA）、下丘腦促性腺激素釋放激素（GnRH）。結(jié)果 （1）與青年對照組比較，各項指標(biāo)均有顯著性變化（P<0.05，或P<0.01）。（2）針刺組與圍絕經(jīng)期對照組比較，針刺組對血清E2、FSH、LH、下丘腦DA、GnRH有顯著調(diào)節(jié)作用（P<0.05，或P<0.01）。結(jié)論 電針“足三里”、“腎俞”、“關(guān)元”、“三陰交”對圍絕經(jīng)期大鼠的調(diào)節(jié)作用與性腺軸有關(guān)，可通過調(diào)節(jié)下丘腦-垂體-卵巢軸的功能治療圍絕經(jīng)期綜合征。

【關(guān)鍵詞】 針刺； 圍絕經(jīng)期； 性腺軸； 調(diào)節(jié)

圍絕經(jīng)期綜合征（peri-menopausal period）又稱更年期，指婦女一生中自性成熟期進入老年期的過渡階段，一般為45～55歲。此期中，卵巢功能逐漸退化，引起下丘腦-垂體-卵巢內(nèi)分泌軸的功能失調(diào)，導(dǎo)致以植物神經(jīng)系統(tǒng)功能紊亂為主，并伴有心理癥狀的一組癥候群。在這一特殊時期，隨著卵巢功能的衰退，機體的生殖內(nèi)分泌環(huán)境也發(fā)生相應(yīng)的改變。隨著社會發(fā)展、生活及工作節(jié)奏的不斷加快，圍絕經(jīng)期綜合征的發(fā)病率日漸增高。據(jù)統(tǒng)計資料顯示，我國婦女圍絕經(jīng)期綜合征的發(fā)病率約占87%。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)主要采用對癥及激素替代治療（HT），其不良反應(yīng)大，禁忌證多^［1］，安全性尚待研究。尋求一種有效且風(fēng)險較低的治療方法十分必要。近幾年來，中藥及針灸治療圍絕經(jīng)期綜合征的研究取得很大進展^［2］。為此，本實驗以16個月圍絕經(jīng)期大鼠為實驗對象，觀察電針“足三里”、“腎俞”、“關(guān)元”、“三陰交”對圍絕經(jīng)期大鼠子血清雌激素（E2）、促黃體生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）、下丘腦多巴胺（DA） 、下丘腦促性腺激素釋放激素（GnRH）的影響，進一步探討電針對圍絕經(jīng)期綜合征的可能機理。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 實驗動物:Wistar雌性大鼠組，16個月圍絕經(jīng)期大鼠60只，體重（410±20） g；4月齡年輕大鼠20只，體重（200±20） g。均由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供。

1.2 動物分組及模型復(fù)制 采用自然老化的圍絕經(jīng)期大鼠模型^［3］。采用陰道涂片法（vaginal smeartest，VST）^［4］，根據(jù)5次涂片的陰道細胞學(xué)表現(xiàn)，篩選符合本實驗要求的大鼠并進行分組。從60只16月齡Wistar雌性大鼠中選取符合不規(guī)律的動情周期，或無排卵持續(xù)動情期，或反復(fù)偽孕，或持續(xù)無動情狀態(tài)的大鼠45只，用隨機數(shù)字表分為3組，每組15只，即圍絕經(jīng)期對照組、電針非經(jīng)穴點組及電針“足三里”、“腎俞”、“關(guān)元”、“三陰交”組。從20只4月齡Wistar雌性大鼠中選取陰道細胞學(xué)表現(xiàn)為動情周期規(guī)律性強的大鼠15只，作為青年對照組。

1.3 取穴定位于電針操作 按照《實驗針灸學(xué)》取穴定位。足三里:大鼠膝關(guān)節(jié)后外側(cè)，在腓骨小頭下約5 mm處取之。腎俞：第2腰椎棘突下旁開7 mm。關(guān)元:取大鼠于仰臥位，于腹正中線，臍與恥骨聯(lián)合前緣連線2/5處取之。三陰交:大鼠小腿內(nèi)側(cè)，內(nèi)踝與膝關(guān)節(jié)連線1/5處取之。非經(jīng)穴點取以上四穴旁開5 mm處。每組針后接G6805-Ⅱ型電針儀，220 V，用2 Hz與100 Hz交替出現(xiàn)的疏密波電針治療，強度以局部輕微顫抖為度，時間10 min，1次/d，連續(xù)5 d為一個療程，1個療程結(jié)束后休息1 d，共4個療程。青年對照組、圍絕經(jīng)期對照組動物每天只進行抓取刺激，不作針刺。

1.4 標(biāo)本采集 針刺30 d后，于最后針刺結(jié)束24 h后，將所有實驗大鼠斷頭取血，放置4 ℃的冰箱中，靜置4 h以上，3000 r/min離心處理后，取上清液，保存在零下20 ℃的冰箱中，待用于各種激素濃度的測定。

1.5 指標(biāo)檢測 E2、FSH、LH、GnRH等采用ELISA法測定。按試劑盒說明書操作程序進行。

1.6 統(tǒng)計結(jié)果 數(shù)據(jù)采用SPSS 12.0軟件處理，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，多組間統(tǒng)計資料采用方差分析（one-way ANOVA），組間兩兩比較采用StudentNewman Keuls檢驗（SNK），P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 電針對血清E2、FSH、LH含量的影響 與青年對照組比較，圍絕經(jīng)期對照組、電針非經(jīng)穴點組及電針組E2含量均顯著下降（P<0.05），F(xiàn)SH和LH含量均顯著上升（P<0.01，或P<0.05）。與圍絕經(jīng)期對照組比較，電針組E2含量顯著上升（P<0.05），F(xiàn)SH和LH含量顯著下降（P<0.05，或P<0.01），電針非經(jīng)穴組E2、FSH、LH含量無明顯差異（P>0.05）。見表1。

表1 各組血清E2、FSH、LH含量（x±s）

2.2 電針對下丘腦DA、GnRH含量的影響 與青年對照組比較，圍絕經(jīng)期對照組下丘腦DA、GnRH含量顯著上升（P<0.05，或P<0.01）;與圍絕經(jīng)期對照組比較，電針組下丘腦DA、GnRH含量顯著下降（P<0.05，或P<0.01），電針非經(jīng)穴組血清下丘腦DA、GnRH含量無明顯差異（P>0.05）。見表2。

表2 電針對下丘腦DA、GnRH含量的影響（x±s）

3 討論

現(xiàn)代中醫(yī)認為圍絕經(jīng)期，是婦女在絕經(jīng)前后，腎氣漸衰，腎陰不足、陽失潛藏或腎陽虛弱，經(jīng)脈失卻溫煦的狀態(tài)，發(fā)生一系列臟腑氣血不協(xié)調(diào)的證候。治療上主要采用補腎、調(diào)理沖任二脈為基本原則。本實驗中選取足三里、腎俞、關(guān)元與三陰交四穴，其中“足三里”是“足陽明胃經(jīng)”的主要穴位之一，它具有調(diào)理脾胃、補中益氣等功能；“腎俞”益腎助陽，強腰利水；“足三里”與“腎俞”同為全身強壯真陽之要穴。現(xiàn)代國內(nèi)外研究指出，在內(nèi)分泌系統(tǒng)方面，對垂體-腎上腺皮質(zhì)系統(tǒng)功能有雙向性良性調(diào)節(jié)作用?！瓣P(guān)元”為任脈與足三陰經(jīng)的交會穴，也是任脈與沖脈的交會穴;“三陰交”為肝脾腎三經(jīng)交會穴，其在生理上相互調(diào)節(jié)，病理上互為影響，故治療上通過三陰交穴可調(diào)理沖、任、督、帶的病變。沖脈、任脈與肝、脾、腎關(guān)系密切，取之可以調(diào)理沖任，和調(diào)臟腑，是針刺治療圍絕經(jīng)期綜合征的有效處方之一^［5］。本實驗選用疏密波、高低頻混用的刺激，一則避免大鼠產(chǎn)生耐受^［6］，二則因為低頻刺激引起經(jīng)典神經(jīng)遞質(zhì)如β-EP釋放，高頻刺激引起遞質(zhì)共存^［7］，選用混頻可以更好地發(fā)揮針刺效應(yīng)。圍絕經(jīng)期大鼠各項指標(biāo)指出卵巢功能減退，雌、孕激素水平下降對下丘腦和垂體的周期性反饋性抑制減弱，下丘腦-垂體-卵巢軸平衡失調(diào)，下丘腦弓狀核促性腺激素釋放激素（GnRH）的脈沖式釋放增加，垂體FSH、LH升高，體內(nèi)雌激素水平下降，免疫活性細胞不能獲得生理劑量的雌激素刺激，這種內(nèi)分泌變化影響了自主神經(jīng)中樞及其支配下的各臟器功能。本研究表明，圍絕經(jīng)期模型大鼠的主要表現(xiàn)為下丘腦-垂體-卵巢軸的功能改變。本實驗發(fā)現(xiàn)電針非經(jīng)穴組血清E2、FSH、LH下丘腦DA、GnRH含量與圍絕經(jīng)期對照組比較，雖有改變但無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。電針對血清E2、FSH、LH的含量與圍絕經(jīng)期對照組比較，電針組E2含量顯著上升（P<0.05），F(xiàn)SH和LH含量顯著下降（P<0.05，或P<0.01），電針組下丘腦DA、GnRH含量顯著下降（P<0.05，或P<0.01）。說明電針組的各項指標(biāo)與圍絕經(jīng)期對照組比較，主要表現(xiàn)在對生殖內(nèi)分泌激素和下丘腦神經(jīng)遞質(zhì)的調(diào)節(jié)。下丘腦、垂體和卵巢之間存在著復(fù)雜和密切的聯(lián)系，但這種聯(lián)系并非孤立的，它和內(nèi)、外環(huán)境也有密切關(guān)系。來自內(nèi)、外環(huán)境的刺激，可以通過中樞神經(jīng)系統(tǒng)影響下丘腦分泌GnRH，繼而改變垂體及卵巢的功能。多巴胺與中樞神經(jīng)系統(tǒng)電活動、軀體運動、精神情緒活動、垂體內(nèi)分泌功能、心血管活動的調(diào)節(jié)相關(guān)。卵巢是體內(nèi)雌激素合成、分泌的主要部位，當(dāng)卵巢功能衰退時，腎上腺皮質(zhì)等器官可起代償作用，而電針可能加強這一作用，促進腎上腺皮質(zhì)內(nèi)側(cè)區(qū)的功能活動，提高腎上腺源性雄激素和雌激素進入血液的水平。雄激素在脂肪、肝臟等組織中為合成雌激素的前體，在芳香化酶的作用下轉(zhuǎn)化為雌激素，從而提高血中雌激素的含量。本研究表明，電針組對圍絕經(jīng)期模型大鼠的調(diào)節(jié)作用主要通過對下丘腦-垂體-卵巢軸功能的干預(yù)^［8］，調(diào)節(jié)有關(guān)激素水平，調(diào)節(jié)交感神經(jīng)及腎上腺髓質(zhì)的神經(jīng)功能活動，從而保持體內(nèi)激素水平和內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，緩解圍絕經(jīng)期癥狀。

參 考 文 獻

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（收稿日期：2011-03-09）

（本文編輯：車艷）