草莓屬植物SCoT分析體系的建立及優(yōu)化

摘要：為利用SCoT技術(shù)開展草莓屬（Fragaria）植物種質(zhì)資源遺傳多樣性及分子系統(tǒng)學(xué)研究，以草莓屬植物11個(gè)野生種和1個(gè)栽培品種為試材，采用L25（56）正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，建立了草莓屬植物的最優(yōu)SCoT－PCR 反應(yīng)體系，即20 μL反應(yīng)體系中，含Mg2+ 2.0 mmol·L-1、dNTPs 0.3 mmol·L-1、Taq 酶 0.75 U、引物 0.75 μmol·L-1、模板DNA 40 ng，并對(duì)退火溫度進(jìn)行了優(yōu)化，對(duì)電泳檢測(cè)方法及草莓屬植物DNA 提取方法進(jìn)行了改進(jìn)。共篩選出22個(gè)適于進(jìn)行草莓屬植物SCoT 分析的引物。經(jīng)驗(yàn)證，該反應(yīng)體系穩(wěn)定性好、可重復(fù)性強(qiáng)、多態(tài)性高、擴(kuò)增效果好，適于草莓屬植物的SCoT 分析。