青壯年糖尿病患者自身抗體聯(lián)合檢測(cè)的臨床應(yīng)用價(jià)值

周細(xì)國(guó)，楊一波，楊偉平（湖南省懷化市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 418000）

隨著人們的生活水平的不斷提高，青壯年肥胖者也漸多，以致青壯年的糖尿病發(fā)病率也有增加，對(duì)青壯年糖尿病患者應(yīng)有足夠的重視。空腹血糖、餐后2 h血糖和糖化血紅蛋白（HbA1c）可作為糖尿病的診斷指標(biāo)和治療效果觀察指標(biāo)。但糖尿病患者的不同個(gè)體間又是復(fù)雜多樣的。目前認(rèn)為，最早確認(rèn)的胰島細(xì)胞抗體（ICA）是一種針對(duì)數(shù)種胰島細(xì)胞分子的異質(zhì)抗體系列；接著發(fā)現(xiàn)的是胰島自身抗體（IAA）及谷氨酸脫羧酶抗體（GAD－Ab）參與1型糖尿病發(fā)病；1994年，又發(fā)現(xiàn)了蛋白酪氨酸磷酸酶抗體（IA－2－Ab）［1］。確認(rèn)免疫中介1型糖尿病主要依賴在糖尿病患者中檢出針對(duì)胰島β細(xì)胞各種抗原的自身免疫性抗體，因此對(duì)青壯年不同類型糖尿病患者的治療方案各異。本研究對(duì)212例青壯年糖尿病患者的GAD－Ab、ICA、IAA和IA－2－Ab等自身免疫性抗體進(jìn)行聯(lián)合檢測(cè)，并對(duì)其空腹血糖（FPG）、餐后2 h血糖（PBG）和糖化血紅蛋白（HbA1c）等血液生化指標(biāo)進(jìn)行比較，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2011年1月至2012年1月本院內(nèi)分泌科門診就診或住院治療的15～50歲糖尿病患者212例，平均年齡42.3歲，其中男123例，女89例，所有病例均符合1999年世界衛(wèi)生組織（WHO）糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)。健康對(duì)照組為40例來(lái)醫(yī)院體檢的健康者，年齡為20～50歲，平均年齡36.2歲，其中男20例，女20例，均排除糖尿病家族史及相關(guān)內(nèi)分泌疾病。所有對(duì)象均采取靜脈血分離血清待測(cè)。

1.2 檢測(cè)指標(biāo)與方法 采用免疫印跡法檢測(cè)GAD－Ab、ICA、IAA和IA－2－Ab，4種抗體在同一膜條進(jìn)行檢測(cè)，質(zhì)控品、陰陽(yáng)性對(duì)照均由深圳伯勞特生物制品有限公司提供，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書操作；采用葡萄糖氧化酶法在奧林巴斯AU2700全自動(dòng)生化分析儀上測(cè)定FPG、PBG，標(biāo)準(zhǔn)物、質(zhì)控品和測(cè)定試劑由上海科華公司提供，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書操作；采用免疫法在奧林巴斯AU2700全自動(dòng)生化分析儀上測(cè)定HbA1c，標(biāo)準(zhǔn)物、質(zhì)控品和測(cè)定試劑由德國(guó)萊邦公司提供，嚴(yán)格按說(shuō)明書操作。

2 結(jié) 果

2.1 兩組對(duì)象血清 GAD－Ab、ICA、IAA 和IA－2－Ab自身抗體陽(yáng)性率比較，青壯年糖尿病患者4項(xiàng)指標(biāo)陽(yáng)性率顯著高于健康對(duì)照組（P＜0.01），見(jiàn)表1。

表1 兩組對(duì)象4項(xiàng)自身免疫抗體檢測(cè)陽(yáng)性率［n（%）］

2.2 自身抗體陽(yáng)性組與抗體陰性組FPG、PBG及HbA1c比較，兩組差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表2。

表2 抗體陽(yáng)性組與陰性組生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果（）

表2 抗體陽(yáng)性組與陰性組生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果（）

組別 n FPG（mmol／L）PBG（mmol／L） HbA1c（%）抗體陽(yáng)性組86 7.19±2.01 12.11±2.09 6.86±0.87抗體陰性組126 7.01±1.62 11.56±1.94 6.61±0.76

3 討 論

糖尿病是一種代謝綜合征，胰島自身抗體作為胰島β細(xì)胞免疫損傷的標(biāo)志性的特異指標(biāo)，是區(qū)別1型糖尿病和2型糖尿病的重要標(biāo)志［2］。目前發(fā)現(xiàn)的胰島自身抗體有GAD－Ab、ICA、IAA、IA－2－Ab等。

谷氨酸脫羧酶（GAD）中谷氨酸轉(zhuǎn)化過(guò)程中的限速酶，其中GAD65主要在人類胰島β細(xì)胞上表達(dá)，血清中如果出現(xiàn)GAD的自身抗體GAD－Ab，就會(huì)誘發(fā)胰島β細(xì)胞的自身免疫性炎癥，導(dǎo)致β細(xì)胞功能衰竭［3］。近年研究發(fā)現(xiàn)胰島β細(xì)胞的水平與糖尿病的發(fā)生、進(jìn)展以及病情的演變有密切的關(guān)系，尤其是GAD65－Ab在整個(gè)糖尿病的病程中的敏感性和穩(wěn)定性更好，在指導(dǎo)對(duì)糖尿病患者進(jìn)行早期免疫干預(yù)治療方面有重要意義［4-6］。目前GAD－Ab被認(rèn)為是1型糖尿病患者標(biāo)志性抗體，而且與病情的嚴(yán)重程度、病程的進(jìn)展和治療藥物的選擇都有密切關(guān)系。

ICA是最早證實(shí)存在于患者血清中的一種免疫球蛋白，為針對(duì)胰島自身細(xì)胞的抗體，當(dāng)胰島細(xì)胞抗體和胰島細(xì)胞的表面抗原結(jié)合后引起免疫反應(yīng)，激活補(bǔ)體系統(tǒng)，對(duì)胰島細(xì)胞的胞漿成分產(chǎn)生細(xì)胞毒效應(yīng)，引起細(xì)胞的溶解和死亡而導(dǎo)致糖尿病［7］。但I(xiàn)CA也可同時(shí)存在于其他自身免疫性疾病，單獨(dú)ICA陽(yáng)性預(yù)測(cè)糖尿病的發(fā)生價(jià)值有限。

IAA是一組能與胰島素結(jié)合的抗體，它不是DM患者體內(nèi)的特異性抗體，其陽(yáng)性率不及GAD－Ab和ICA，IAA絕大部分與胰島素結(jié)合成復(fù)合物而使其失去生物活性，因此IAA的測(cè)定能為DM的治療提供重要依據(jù)。

IA－2是繼相對(duì)分子質(zhì)量為65×103的谷氨酸脫羧酶（GAD65）后發(fā)現(xiàn)的又一個(gè)重要的胰島細(xì)胞自身抗原，是先前發(fā)現(xiàn)的胰島細(xì)胞40×103胰蛋白消化片段抗原的前體，其抗原決定簇局限于胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域中。IA－2自身抗體（IA－2－Ab）不僅是1型糖尿病診斷分型的一個(gè)佐證；還是1型糖尿病發(fā)病前的一個(gè)重要免疫學(xué)指標(biāo)，在高危個(gè)體的預(yù)測(cè)篩查方面起積極作用。

本研究結(jié)果表明，雖然為發(fā)病時(shí)間不長(zhǎng)的青壯年糖尿病患者，但4項(xiàng)自身免疫抗體均有不低的陽(yáng)性率，4項(xiàng)自身免疫抗體全陰性患者占總患者數(shù)的59.4%，明顯高于老年糖尿病患者的37.6%，說(shuō)明青壯年糖尿病患者是以自身免疫抗體陰性的型糖尿病居多［8］。4項(xiàng)自身免疫抗體全陰性患者和有1項(xiàng)以上陽(yáng)性患者比較空腹血糖、餐后2 h血糖和HbA1c水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與陳剛等［9］報(bào)道相仿。青壯年糖尿病患者發(fā)病較早，以后的治療過(guò)程還很長(zhǎng)，選擇更加合理的治療方案尤其重要，聯(lián)合檢測(cè)自身免疫性抗體GAD－Ab、ICA、IAA和IA－2－Ab對(duì)青壯年糖尿病患者的診斷和療效觀察及治療方案的制定和調(diào)整有重要意義；采用免疫印跡法在同一膜條上進(jìn)行檢測(cè)，方法簡(jiǎn)便，特異性和重復(fù)性高。

［1］Pietropaolo M，Hutton JC，Eisenbarth GS.Protein tyrosine phosphatase－like proteins：link with IDDM［J］.Diabetes Care，1997，20（2）：208－214.

［2］董喜環(huán).自身抗體在成人隱匿性自身免疫性糖尿病中的診斷價(jià)值［J］.中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生，2009，47（15）：49－50.

［3］Bonfacio E，Lampaon V，Bernasconi L.Maturation of the humoral autoimmune response to epitopes of GAD in pre clinical childhood type［J］.Diabetes，2000，49（2）：202－208.

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［8］周細(xì)國(guó)，楊一波，楊偉平.老年糖尿病患者血清GAD－Ab、ICA、IAA和IA－2－Ab聯(lián)合檢測(cè)的臨床應(yīng)用價(jià)值［J］.醫(yī)學(xué)臨床研究，2011，28（10）：1909－1911.

［9］陳剛，俞茂華，夏燕萍，等.老年糖尿病患者GAD抗體檢測(cè)的意義［J］.中國(guó)老年保健醫(yī)學(xué)，2007，5（4）：5－7.