國產細菌鑒定藥敏分析儀對臨床常見細菌鑒定能力的研究

姚 慶，楊瓊容，蔣 博（四川省遂寧市第三人民醫院 629000）

臨床上對細菌鑒定和藥敏分析的要求也越來越高，目前對細菌鑒定的方法和技術很多，但手工操作過于繁瑣［1］。隨著臨床微生物的發展，國內外相繼出現了一些商品化的鑒定系統，雖然國外的儀器各方面相對比較成熟，但由于價格昂貴，不適用于標本量較少的基層醫院［2］。本文選用了國內比較有代表性的HX－21的國產細菌鑒定藥敏分析儀，與法國梅里埃公司Vitek－32全自動微生物分析儀對常見的50例菌株的鑒定結果進行分析比較，并對其影響因素作簡要探討，現將結果報道如下。

1 材料與方法

1.1 菌株來源 由四川省人民醫院提供的50株微生物標本，包括腸桿菌科16株，非發酵菌9株，葡萄球菌9株，腸／鏈球菌6株，酵母樣真菌5株，弧菌科細菌3株，流感嗜血桿菌2株。

1.2 質控菌株 大腸埃希菌（ATCC25922）、金黃色葡萄球菌（ATCC25923）、銅綠假單胞菌（ATCC27853）、均購自四川省臨床檢驗中心。

1.3 儀器與試劑 HX－21細菌鑒定藥敏分析儀及其配套使用的各種鑒定試劑盒，標準0.5麥氏比濁管、補充試劑等由合肥恒星科技開發公司提供。Vitek－32全自動微生物分析儀及其配套使用的各種鑒定卡由法國梅里埃公司提供。Vitek－32測定結果由四川省人民醫院檢驗科微生物室提供（已通過ISO15189實驗室認可）。

1.4 方法

1.4.1 細菌鑒別 按《全國檢驗技術操作規程》要求接種標本，取純培養的待鑒定菌株，根據菌落、菌體形態、革蘭染色結果、氧化酶、觸酶等試驗選用相應的板條［3］。

1.4.2 菌液制備和接種菌液 無菌挑取分離純培養教的待鑒定菌株，嚴格按鑒定儀的說明書調菌液并與標準比濁管比較。最后向鑒定板每孔加入菌液進行培養。同時對板條進行質控。質控菌株：大腸埃希菌（ATCC25922）、金黃色葡萄球菌（ATCC25923）、銅綠假單胞菌（ATCC27853）。

1.4.3 結果判讀 HX－21細菌鑒定藥敏儀按操作說明書人工判讀。Vitek－32全自動微生物分析儀的鑒定結果自動判讀。

1.4.4 操作方法 以Vitek－32測定結果作為比較方法，因其已通過ISO15189實驗室認可。以本院的HX－21細菌鑒定藥敏儀作為試驗方法。

2 結 果

2.1 質控菌株 大腸埃希菌（ATCC25922）、金黃色葡萄球菌（ATCC25923）、銅綠假單胞菌經 HX－21 與 Vitek－32均鑒 定正確。

2.2 HX－21與Vitek－32對50株細菌的鑒定結果 鑒定結果完全符合（菌種一致）的48株，占96.00%，菌屬符合率為99.99%，部分符合（菌屬一致）的2株，占4.00%，見表1。

表1 HX－21與Vitek－32對細菌鑒定結果不符合的菌株

3 討 論

隨著檢驗技術的飛速發展，微生物檢驗也得到了迅速的發展，以前長期手工操作不僅是鑒定時間長，而且比較繁瑣，滿足不了臨床對細菌檢驗的要求。本文選用HX－21細菌鑒定藥敏儀是以細菌的各種特性同等重要為基礎，經每種生化反應特性在不同細菌中出現的概率進行全面分析，通過比較運用數值分類法，識別待檢菌的種、型及亞型。根據結果可以看出，兩種儀器比較鑒定結果完全符合（菌種一致）的48株占96.0%，菌屬符合率為99.99%，部分符合（菌屬一致）的2株占4%。

從以上結果分析，HX－21細菌鑒定藥敏儀對非發酵菌、葡萄球菌、酵母樣真菌的鑒定完全符合，對腸桿菌的鑒定和弧菌科細菌還分別有1例雖然鑒定到屬，但還沒鑒定到種，分析其原因可能是在鑒定過程中有兩項生化反應出現弱陽性的不典型顯色，還有部分鑒定性試驗板條上沒有，或者是有些細菌有可能經過幾次轉種后，失去了原來典型的生化特性［4］。肉眼判讀與機器也可能存在一定差異。在工作中還發現在有些細菌鑒定時，還需要補做某些鑒定試驗，耗費時間與試劑，不能一步到位，光靠氧化酶試驗結果就選腸桿菌科或非發酵菌板條有一定的局限性，比如氧化酶陽性弧菌科細菌，氧化酶陰性的鮑曼不動桿菌，這點還需要我國專業技術人員進一步改進工作。相信在不久的將來，微生物檢驗技術將愈加完善，對臨床用藥的指導將日益顯現出來［5］。

總結這次比較試驗和平時參加四川省室間質評的回報，要做好HX－21細菌鑒定藥敏儀的臨床檢驗，還需要從事這項工作的技術人員要有豐富的微生物基礎知識和全面的技術，要有一定的從業經驗，以免出現鑒定的方向性錯誤。在臨床工作中，為提高鑒定率和達到快捷、簡便，價格相對低廉的HX－21國產細菌鑒定藥敏儀成為中小型醫院不錯的選擇，測定結果的誤差臨床均可以接受。完全能夠滿足中小型醫院對常見細菌的鑒定，并配合藥敏試驗為臨床合理使用抗生素提供依據。對減少耐藥細菌傳播、提高醫療質量、引導新型抗生素的研究與開發等有重要意義［6-7］。

［1］張莉，吳炯，郭瑋，等.醫學檢驗檢測系統應用前的性能評價［J］.檢驗醫學雜志，2006，11（21）：561－562.

［2］毛彩萍，周國明.兩種儀器在微生物室間質評中的應用與比較［J］.中華醫院感染學雜志，2006，16（10）：1195－1197.

［3］馮仁豐.臨床檢驗管理技術基礎［M］.上海：科學文獻出版社，2003：5－136.

［4］龐超，劉瑋，郭愛芹，等.XK型微生物鑒定儀的評價［J］.生命科學儀器，2009，7（3）：50－51.

［5］胡靜，姚云清.2005～2007年醫院病原菌分布和耐藥性分析［J］.重慶醫學，2009，38（7）：811－814.

［6］方毅，龐立峰.老年住院患者臨床分離細菌的分布及耐藥性［J］.檢驗醫學，2011，26（6）：398－401.

［7］吳松武，陳珮瑤，范喜城，等.2010年某院分離細菌的分布及其耐藥性分析［J］.中國實用醫藥，2012，7（3）：150－151.