吳春香,馬 晉(四川省醫學科學院/四川省人民醫院城東病區檢驗科,成都 610101)
全血細胞分析在臨床檢測中應用廣泛。血小板計數成為臨床血栓、出血性疾病診療的重要依據,也是手術患者術前檢測的重要參數之一。國際血液標準委員會(ISCH)推薦使用乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝血進行全血細胞計數。然而,某些人群會發生EDTA依賴性假性血小板減少(PTCP),其發生率為0.07%~0.21%[1],如發現血小板計數有誤,需進行糾正。
1.1 標本來源 4例標本均來自2010年11月至2011年8月本院門診住院患者。患者1為血液內科輕度貧血患者;患者2為骨科手術患者,術前檢測發現血小板減少;患者3為體檢中心體檢者;患者4為血透中心透析患者。4例EDTA抗凝全血儀器檢測血小板均減少。
1.2 儀器與試劑 美國Beckman Coulter LH-750全自動血液分析儀及進口配套試劑;Sysmex KX-21血細胞分析儀及試劑;Olympus雙目顯微鏡;BD公司EDTA-K2真空抗凝管;草酸銨血小板稀釋液;瑞氏染液。
1.3 方法 首先,用Beckman Coulter LH-750全自動血液分析儀篩檢出血小板減低且與臨床聯系患者無出血淤斑等癥狀的標本。對標本進行涂片干燥瑞氏染色鏡檢。其次,用KX-21進行全血標本復檢。再次,取20μL EDTA抗凝全血標本于380μL血小板稀釋液稀釋鏡檢。最后重新采集患者末梢血于KX-21檢測。
1.4 統計學處理 用SPSS10.0軟件進行統計學處理,用t檢驗,P<0.05為差異有統計學意義。
4例患者EDTA抗凝全血標本LH-750分析儀檢測血小板降低。染色鏡檢、EDTA抗凝全血復檢、抗凝全血草酸銨處理鏡檢、患者末梢血復檢等結果見表1。

表1 各種方法血小板檢測結果
EDTA抗凝全血于LH750檢測各主要參數結果與KX-21復檢以及重采患者末梢血復檢數據比較見表2。應用配對設計均數比較的t檢驗,LH750全血血小板檢測結果與KX-21檢測結果差異無統計學意義。LH750檢測血小板結果與末梢血復檢結果差異有統計學意義。KX-21檢測血小板結果與末梢血復檢結果差異有統計學意義。

表2 不同方法各參數處理結果
4例患者標本中LH750檢測血小板數均減少,且血小板直方圖曲線不擬合,提示信息顯示:巨血小板,血小板凝塊。患者無出血、淤點等臨床癥狀,瑞氏染色鏡檢見血小板有聚集,取少量EDTA抗凝血草酸銨處理鏡檢見仍有凝集,而無抗凝劑的患者末梢血檢測血小板正常。該4例患者考慮為EDTA抗凝致血小板假性聚集,即PTCP的可能。LH750檢測EDTA全血時因使用電阻抗原理檢測血小板,EDTA致血小板假性聚集后成血小板團體積增大,大于儀器通常設定的血小板體積范圍2~30 f L,從而使血小板數量減少,故儀器提示巨血小板,血小板凝塊。末梢血因無EDTA未產生假性聚集,故血小板數量相對準確。對于EDTA假性聚集產生的原因有學者報道可能與抗血小板抗體的自身抗體等有關,如IgG、Ig M及抗血小板抗體或抗心磷脂抗體等[2]。還有學者認為與血小板表面存在某些隱匿性抗原有關。對EDTA依賴的血小板凝集報道越來越多,對于該現象的處置要求檢驗者有高度責任感,以發現PTCP,進一步可草酸銨稀釋計數或重采患者末梢血復檢,以糾正血小板檢測結果。
[1]Sakurai S,Shiojima I,Tanigawa T,et al.Aminoglycosides prevent and dissociate the aggregation of platelets in patients with EDTA-dependent pseudothrombocytopenia[J].Br J Haematol,1997,99(4):817-823.
[2]魯家才,王超.乙二胺四乙酸依賴性血小板聚集形成原因初探[J].現代中西醫結合雜志,2004,13(11):1467-1468.